国家自然科学基金(30901062)
- 作品数：15 被引量：29H指数：3
- 相关作者：高雪丽郑世民佟美姣李博韬隋欣更多>>
- 相关机构：东北农业大学重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教委科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- PRP基因RNAi重组慢病毒制备及PRP基因与睾丸间质细胞增殖和睾酮产生的关系被引量：1
- 2011年
- 目的制备PRP RNAi重组慢病毒,并对PRP基因功能进行初步研究。方法采用miRNA方式抑制PRP基因表达,筛选最有效序列包装慢病毒,用于转染TM3睾丸间质细胞。转染实验分为TM3-negative对照组(阴性对照质粒组,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-neg control质粒)以及A、B、C 3个干扰质粒组(分别转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRP-A,B,C质粒);RT-PCR与Western blot方法检测慢病毒对PRP基因表达影响,MTT方法检测细胞增殖情况,ELISA方法检测细胞睾酮产生情况。结果经测序鉴定,成功制备了PRP RNAi重组慢病毒;与阴性对照质粒组比较,转染pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PRP-A,B组可有效下调TM3细胞PRP mRNA和蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。MTT结果表明抑制PRP基因后,TM3细胞的增殖加快(P<0.01)。此外,相较于对照组,下调PRP基因抑制促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)刺激产生睾酮的效应(P<0.05)。结论成功制备了PRP RNAi重组慢病毒,对其功能初步研究显示,PRP不仅与睾丸间质细胞增殖有关,而且参与睾酮产生。
- 赵丽娜郝杰胡建刚吕自兰王琦王丽敏余秋波王应雄黎刚
- 关键词：慢病毒睾酮间质细胞
- 传染性囊病病毒感染对SPF雏鸡免疫器官免疫功能的影响被引量：1
- 2013年
- 以21日龄SPF雏鸡为研究对象,应用细胞培养和MTT及免疫组织化学方法分别检测了免疫器官中T、B淋巴细胞增殖功能和IgG、IgA、IgM生成细胞数量的动态变化,旨在揭示传染性囊病病毒(IBDV)感染对雏鸡免疫器官细胞免疫和体液免疫功能的影响。结果显示,IBDV感染雏鸡免疫器官中T、B淋巴细胞增殖功能和腔上囊、脾脏中IgG、IgA、IgM生成细胞数量不同程度的低于对照雏鸡,并且在感染后期逐渐恢复。表明雏鸡感染IBDV后的早期,机体免疫器官的细胞免疫和体液免疫功能均受抑制,可能是病毒感染早期导致雏鸡死亡的一个主要因素。
- 王灵娟高雪丽隋欣于志强李博韬郑世民
- 关键词：IBDV免疫器官细胞免疫体液免疫
- 家禽黏膜免疫系统与疫苗免疫被引量：3
- 2012年
- 黏膜免疫自20世纪60年代被提出后一直是国内外学者的研究热点,成为近年来研究较多、进展较快的领域之一,黏膜免疫的功能、特点等方面的知识的充实和丰富,为预防与治疗相关疾病提供了新的依据。本文就家禽黏膜免疫的结构、功能特点等进行介绍。
- 张蕊高雪丽郑世民
- 关键词：黏膜免疫禽病黏膜疫苗
- 高压生物静电场对雏鸡增重的影响被引量：3
- 2013年
- 为研究高压生物静电场对肉蛋两用雏鸡生长发育状况的影响,采用不同强度的高压静电场和不同作用时间处理雏鸡,结果表明:施加的电场场强相对低时(+21.4kV/m),无论作用时间长短,均未见统计学差异(P>0.05);28日龄时,电场场强+35.7kV/m作用30min/(次.日)较作用15min/(次.日)的雏鸡体重增加显著(P<0.01);电场场强±28.6kV/m,作用30min/(次.日),负电场高于正电场的作用效果,平均体重增长率分别为59.59%和23.46%;而电场场强增到±71.4kV/m,作用效果明显降低。结果显示,适宜的电场强度和作用时间有促进雏鸡体重增加的作用,在一定范围内的不同场强和不同作用时间对雏鸡体重增加的影响有所差异。
- 刘一鸣郑世民高雪丽刘超男李丽敏姚金石张俐
- 关键词：雏鸡增重
- 鸡TGF-β1 mRNA荧光定量PCR检测方法的建立被引量：1
- 2013年
- TGF-13超家族（transforminggrowthfaetor-~3super-family）是由许多生物学特性相同的信号分子组成的大家族”’，至少有6个结构相关的亚型，即TGF-13l、2、3、4、5、6。
- 胡丽君郑艳生高雪丽郑世民刘超男吕晓萍
- 关键词：PCR检测方法荧光定量分子组成超家族
- 鸡p53 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：1
- 2021年
- p53肿瘤蛋白由p53基因编码,在机体内有多种作用,例如,修复损伤DNA,调控细胞周期以及细胞凋亡,能够抑制肿瘤的发生。根据已发表的鸡p53 mRNA相关基因序列设计引物,提取鸡免疫器官总RNA,通过转录、纯化、链接等步骤,以提取的重组阳性质粒为标准品进行检测,绘制标准曲线,并对其特异性进行检测,建立了鸡p53 mRNA实时荧光定量检测方法。应用该方法对雏鸡免疫器官的p53 mRNA表达量进行检测,发现传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)感染21日龄SPF雏鸡后,其胸腺与脾脏中p53 mRNA表达第3天显著高于相应对照雏鸡;法氏囊中p53 mRNA表达量在病毒感染后5 d~7 d显著或极显著增高。试验结果表明,此检测方法重复性好,可操作性强,可以用于相关基因的检测。
- 佟美姣高雪丽高雪丽
- 关键词：P53基因实时荧光定量PCR
- 传染性法氏囊病毒感染SPF雏鸡哈德尔腺和盲肠扁桃体TGF-β1 mRNA表达变化被引量：2
- 2013年
- 为探索鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染对SPF雏鸡消化道和呼吸道局部黏膜免疫组织转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA表达的影响,以21日龄SPF雏鸡为研究对象,应用荧光定量PCR方法,对SPF雏鸡感染IBDV后,其哈德尔腺和盲肠扁桃体中TGF-β1 mRNA表达的动态变化进行检测。结果发现,21日龄SPF雏鸡感染IBDV强毒后1～28d,其上述局部黏膜免疫组织中TGF-β1mRNA表达均不同程度的高于对照雏鸡,其中哈德尔腺TGF-β1 mRNA表达于病毒感染后3～28d极显著高于对照雏鸡(P<0.01);而盲肠扁桃体的上述被检指标于病毒感染后3～14d极显著高于对照雏鸡(P<0.01)。表明IBDV感染所致的雏鸡免疫抑制与雏鸡消化道和呼吸道局部黏膜免疫组织TGF-β1 mRNA表达增加密切相关。本研究为进一步阐明IBDV的免疫致病机制提供了重要的参考依据。
- 张蕊高雪丽李博韬郑世民
- 关键词：传染性法氏囊病毒SPF雏鸡盲肠扁桃体转化生长因子-Β1
- 雏鸡铁过量后肝氧化应激及组织病理学变化被引量：1
- 2022年
- 为探究铁过量对雏鸡肝氧化应激和组织病理学变化的影响,将30只1日龄海兰褐雏鸡随机分为对照组(C组)和铁过量组(I组),铁过量组雏鸡于10日龄采取口服灌胃的方式,连续3 d给予含300mg/mL FeSO_(4)·7H_(2)O的生理盐水,每只1 mL。于铁过量后第7、14、21天,每组随机取5只雏鸡,观察肝大体病理变化并计算器官指数;采用石蜡组织切片、HE染色及普鲁士蓝染色观察肝病理变化;采用化学比色法检测肝丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)和总抗氧化能力(T-AOC)。结果显示,雏鸡肝MDA和NO含量于铁过量后7~21 d均显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01);CAT和GPx活力于铁过量后7~14 d均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01);T-AOC于铁过量后7~21d均显著下降(P<0.05);铁过量组雏鸡肝出现结缔组织增生、炎性细胞浸润、含铁血黄素沉积等病理学变化。结果表明,过量铁使雏鸡肝组织发生损伤性变化,发生氧化应激,氧化-抗氧化反应失衡。
- 孙凤娇张靓玉安裕智吕晓萍刘超男高雪丽
- 关键词：铁过量雏鸡氧化应激组织病理学
- Lrg1基因敲除损伤小鼠睾丸睾酮产生与生精功能
- 2018年
- 目的利用富亮氨酸α-2-糖蛋白1(leucine-rich-alpha-2-glycoprotein 1,Lrg1)基因敲除小鼠模型,对Lrg1在睾丸中的生物学功能进行研究。方法通过Crispr/cas9技术制备Lrg1基因敲除小鼠。6只4月龄Lrg1基因敲除雄性小鼠与6只4月龄野生型雄性小鼠分别作为实验组与对照组,HE染色方法观察两组小鼠睾丸形态变化,采用ELISA方法测定小鼠促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)与睾酮水平。利用高通量测序方法分析睾丸组织基因转录谱表达变化。结果 LRG1表达于睾丸精原细胞与精母细胞。免疫荧光与Western blot实验结果表明LRG1蛋白在敲除小鼠睾丸中表达缺失。Lrg1敲除影响睾丸发育:生精小管直径降低[(196.22±27.88)μm vs(183.67±26.32)μm,P<0.05],退化生精细胞增多[(26.17±5.03)vs(196.00±40.34),P<0.01],平均每生精小管圆形精子数量减少[(76.00±12.45)vs(60.00±11.40),P<0.01]。血清睾酮水平下降[(2.90±0.92)ng/m L vs(1.90±0.29)ng/m L,P<0.05]。附睾精子数量减少,活力降低。生物信息学分析显示Lrg1敲除导致差异表达的基因集中于有丝分裂、减数分裂、染色体分离及代谢程序。具有转录调控作用的48个C2H2锌指蛋白家族成员和17个mi RNA在Lrg1敲除睾丸中表达异常,提示睾丸转录调节网络失调。结论 Lrg1基因在小鼠睾丸中参与生精功能与睾酮合成。
- 肖诗维郝杰李冲廖晓岗
- 关键词：睾酮生精功能
- 传染性法氏囊病毒诱导的细胞凋亡及相关细胞因子的变化被引量：3
- 2012年
- 传染性法氏囊病毒是传染性法氏囊病的病原体,能引起雏鸡淋巴组织的坏死、萎缩及免疫抑制。该病毒在世界范围内普遍存在,并有多种的变异株、强毒株出现,给养鸡业造成巨大损失。近些年传染性法氏囊病毒与细胞凋亡的关系不断受到学者高度关注。研究表明,病毒感染后B淋巴细胞发生凋亡,可能是病毒引起免疫抑制的主要原因,而VP2蛋白是该病毒主要凋亡因子。本文对传染性法氏囊病毒的生物学特征、病毒与细胞凋亡关系及某些相关细胞因子变化等研究进展做一简要综述。
- 佟美姣高雪丽郑世民
- 关键词：传染性法氏囊病毒细胞凋亡细胞因子
