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江苏省教委自然科学基金(02KJD180006)

作品数：5 被引量：19H指数：3
相关作者：张锡然曹祥荣王强庞宏刘伟更多>>
相关机构：南京师范大学成都动物园更多>>
发文基金：江苏省教委自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学

主题

  • 3篇毛冠鹿
  • 2篇片段
  • 2篇基因
  • 2篇基因片段
  • 2篇CDNA文库
  • 1篇性别鉴定
  • 1篇序列标签
  • 1篇异染色质
  • 1篇全长CDNA
  • 1篇染色
  • 1篇染色质
  • 1篇种内
  • 1篇子通道
  • 1篇文库构建
  • 1篇系统进化
  • 1篇离子通道
  • 1篇脑组织
  • 1篇内含子
  • 1篇内含子序列
  • 1篇进化

机构

  • 5篇南京师范大学
  • 2篇成都动物园

作者

  • 5篇曹祥荣
  • 5篇张锡然
  • 2篇刘伟
  • 2篇庞宏
  • 2篇王强
  • 1篇汤文文
  • 1篇戴君勇
  • 1篇粘伟红
  • 1篇张文
  • 1篇胡均
  • 1篇蒋华云
  • 1篇石磊
  • 1篇邵菁

传媒

  • 2篇动物学杂志
  • 2篇遗传
  • 1篇安徽农业科学

年份

  • 1篇2007
  • 2篇2006
  • 1篇2005
  • 1篇2004
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
毛冠鹿大脑组织全长cDNA文库构建被引量：2
2006年
运用SMART技术构建了毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)大脑组织全长cDNA文库。提取大脑组织总RNA,Oligotex mRNA Kit纯化、获得poly(A)+RNA,以CDSⅢ/3′PCR引物进行逆转录,LD-PCR扩增获得全长双链cDNA,经SfiⅠ酶切及柱层析分离后,500 bp以上的片段与载体λTripIEx2连接,体外包装得到cDNA文库。经鉴定原始文库滴度为5.1×105pfu/ml,扩增后文库滴度为1.5×109pfu/ml,重组率达到85%以上,插入片断平均长度约为1.0 kb,说明构建文库质量符合要求,可用于大脑特异表达基因的筛选。从该文库中克隆到了rig基因全长,包含5′和3′非编码区,从第43至477个核苷酸为一完整阅读框(ORF),此阅读框可编码一个145氨基酸的rig蛋白。
汤文文张文曹祥荣张锡然徐春茂王强胡均
关键词：毛冠鹿大脑CDNA文库SMART技术
毛冠鹿种内异染色质变化与染色体多态被引量：3
2006年
采用原代和传代培养方法对8头毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)的皮肤细胞进行了染色体研究,发现了一种核型与以前所报道的几种核型不一致,确定为一新核型。在该核型中,染色体众数2n=47,2条X染色体异型,一条为端着丝粒,另一条为近端着丝粒。C-带显示该核型中异染色质除了分布在2条X染色体长臂中之外,在第一对大的端着丝粒染色体中的一条近着丝粒区出现一异染色质“柄”。结合C-带及薄层扫描结果对毛冠鹿种内常染色体、性染色体中异染色质的含量和分布与染色体多态的关系进行了探讨。
粘伟红庞宏张锡然曹祥荣刘伟王强
关键词：异染色质核型薄层扫描
毛冠鹿ZFY、ZFX基因片段的克隆与性别鉴定被引量：11
2004年
根据人和鼠性别分化相关的ZFY、ZFX基因序列设计引物,以雌雄毛冠鹿的基因组DNA为模板进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pMD18T上,获得ZFY、ZFX重组克隆,并测定了ZFY、ZFX基因片段的序列,序列比较显示两者同源性达91%,仅在少数位点有差异,以此确定AvaⅡ为ZFX上特异酶切位点,通过PCR扩增和AvaⅡ特异酶切对毛冠鹿性别进行鉴定。
蒋华云曹祥荣张锡然胡均徐春茂
关键词：ZFYZFX性别鉴定
麂亚科动物钾离子通道基因片段及其内含子序列的克隆与进化分析被引量：5
2005年
运用PCR扩增、T A克隆、测序等技术,获得黑麂,小麂,赤麂和毛冠鹿4种麂亚科动物基因组DNA的钾离子通道部分序列。序列分析表明:麂属动物之间的外显子区域序列差异为0.90%～1.44%,毛冠鹿与麂属动物之间的差异为0.90%～1.26%,可见这一段序列的同源性较高。而内含子部分序列差异在麂属动物之间的差异为0～1.22%,毛冠鹿与麂属动物的差异为1.83%左右。由NJ法和最大简约法(Mp法)构建的进化树表明黑麂与赤麂亲缘关系较近,小麂与他们同为一属但关系较远,而毛冠鹿与它们之间的分化程度已达到属间水平。研究表明基因组的内含子序列能够较真实反映近缘动物之间的关系,是进行分子进化比较分析的较理想标记。
戴君勇曹祥荣石磊张锡然徐春茂胡均
关键词：系统进化内含子
大规模筛选表达序列标签(ESTs)方法的改进被引量：1
2007年
介绍一种改进的大规模ESTs筛选的方法。以SMARTTM cDNA Library Construction Kit所构建的毛冠鹿大脑cDNA文库为研究材料,基于该文库噬菌体可自发转化为质粒的特点,直接把噬菌体文库转化为质粒文库。随机选取平板中转化后的质粒cDNA文库克隆,振荡培养后运用菌液电泳的方法代替传统的PCR筛选法,对重组克隆进行筛选。改进的菌液电泳法可以准确鉴定出重组的质粒,并估计出插入片段的大小。该方法能更好地保持SMARTTM cDNA Library Construction Kit所构建文库的完整性,是一种简单、高效、适用于大规模表达序列标签筛选的有效方法。
刘伟邵菁庞宏张锡然曹祥荣
关键词：CDNA文库表达序列标签
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