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一种用于CYP3A5基因分型的电化学传感器阵列设计: 2011年; 目的:设计一种用于检测CYP3A5基因分型的电化学传感器阵列及其不同基因型的判别方法。方法:设计的电化学基体由印刷电路板(PCB)组成,该电路板包含一组金电极。每个金电极表面修饰有包含单链捕获探针的自组装单分子膜。设计中使用二茂铁做为电活性指示剂,基因分型检测是通过两种不同电势的二茂铁衍生物分别标记等位基因特异性信号探针来实现。结果:该设计能构建一种快速准确、操作简便的DNA电化学传感器阵列检测系统。结论:本文设计为使用电化学方法检测基因分型提供了一种新方法和新技术。; 张海燕王捷陈钰吴小丽刘仲明; 关键词：传感器基因分型

高分辨率熔解曲线分析法检测结直肠癌KRAS基因突变被引量：1: 2012年; 目的:采用高分辨率熔解曲线分析法检测结直肠癌中KRAS基因突变,探讨其用于临床检测的可行性。方法:首先用高分辨率熔解曲线分析法检测64例结直肠癌患者KRAS基因第2外显子的突变情况,再用直接测序法对结果进行验证。结果:通过高分辨率熔解曲线分析法检测,发现有23例KRAS基因突变(35.9%),经直接测序法验证,证实所有患者的突变情况与高分辨率熔解曲线法的结果完全一致;共检测出6种KRAS突变类型,G12D(GGT>GAT)的突变率最高(47.8%),G12D、G12V和G13D等3种常见突变型占总突变数的78.3%。结论:与直接测序法相比,应用高分辨率熔解曲线分析法检测KRAS基因突变具有操作简单快捷、结果准确、成本低的优点,适合应用于临床检测。; 刘丽琴张海燕吴小丽张伟陈晓东王捷; 关键词：结直肠癌 KRAS基因突变高分辨率熔解曲线

DNA电化学生物传感器的研究进展被引量：1: 2013年; 近年来,随着电化学生物传感器的发展,生物传感器在基因诊断、环境监测、药物研究等领域已经广泛应用,关于提高生物传感器的灵敏度和选择性、优化检测方法的研究也越来越受到大家的关注。本文介绍了电化学生物传感器的原理及组成,着重综述生物敏感膜的制备、纳米材料和石墨烯在提高检测灵敏度方面的应用,以及生物传感器在临床诊断和指导临床治疗方面的应用前景。; 赵燕珍张海燕吴小丽刘仲明王捷; 关键词：DNA电化学生物传感器纳米材料石墨烯灵敏度

喷射式流动注射电化学发光免疫检测禽流感H9亚型被引量：1: 2012年; 利用磁分离和生物素亲和素技术,形成亲和素化磁微球-生物素化抗体-抗原-钌标抗体的免疫夹心复合物,初步建立了体外免疫诊断试剂的制备方法,并利用喷射式流动注射电化学发光体系对制备出的禽流感病毒H9免疫复合物进行检测。实验选择最适的包被抗体,检测抗体和封闭剂,优化Ru标抗体的最佳稀释度。在生物素化的兔抗H9多抗作为亲和素化的磁微球的结合抗体,鼠抗H9单抗作为Ru(bpy)32+标记抗体,2%BSA作为封闭剂,1:50倍稀释的Ru-鼠抗H9单抗条件下,非特异性吸附最低。测定不同浓度的H9抗原,发现抗原浓度在3.125～100μg/mL范围内与电化学发光强度呈较好的线性关系。实验还测定了不同亚型的禽流感病毒、不同来源的毒株和鸡的棉拭子样品。; 吴小丽石鑫王捷刘仲明; 关键词：流动注射电化学发光禽流感病毒

DNA电化学传感器中电极修饰条件的探讨: 2013年; 目的探讨ssDNA单层膜的制备的最佳条件。方法利用自组装单分子膜技术,将人工合成并修饰的含22个碱基的特异性单链DNA序列固定到金电极上制备成DNA修饰的金电极,通过控制DNA溶液的浓度、作用时间,以及改变修饰基团探讨最佳的修饰条件,并利用循环伏安法初步研究了该修饰电极的电化学行为。结果通过对不同标记探针、不同探针浓度及不同标记时间的表征,结果显示巯基化ssDNA和二硫键修饰的ssDNA探针浓度为80μmol/L,自组装固定时间为12 h时对DNA探针的固定效率最佳。结论巯基化ssDNA和二硫键修饰的ssDNA通过自组装方法可在金电极表面形成稳定、有序的自组装单分子膜(self-assembled monolayer,SAM),可应用于SAM为基底的DNA传感器的设计与应用。; 赵燕珍王捷张海燕吴小丽; 关键词：DNA电化学传感器自组装金电极循环伏安法

非离子表面活性剂对流动注射电化学发光的增敏作用: 2012年; 研究了非离子表面活性剂聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)对流动注射电化学发光的影响。结果发现,Triton X-100对检测低浓度三联吡啶钌(Ru(bpy)23+)有增强作用,而且Triton X-100的引入可以改变流动注射电化学发光分析系统中Ru(bpy)23+-三正丙胺(TPA)反应电极电位。在检测电位1.35V,进样量100μL,进样速度50μL/s条件下,对Ru(bpy)23+进行检测,检出限(S/N=3)达1.0×10-10 mol/L,较添加Triton X-100前灵敏度提高50倍。; 石鑫王捷刘仲明; 关键词：流动注射电化学发光三联吡啶钌聚乙二醇辛基苯基醚

CYP3A5基因多态性对中国肾移植受者他克莫司血药浓度和疗效的影响被引量：14: 2011年; 目的研究CYP3A5基因多态性对肾移植受者他克莫司(FK506)血药浓度/剂量比(blood drug concentration/dose,C/D),术后急性排斥反应(AR)及不良反应发生率的影响。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测肾移植受者CYP3A5基因型,并以直接测序法进行验证。比较不同基因型患者之间的FK506C/D值,AR、不良反应的发生率。结果肾移植术后3个月内,*3/*3基因型患者FK506的C/D值为149±59,明显高于*1/*1基因型和*1/*3基因型患者的78±24和90±42(均为P<0.05);移植术后3个月内*1/*1基因型患者的AR发生率与*1/*3基因型和*3/*3基因型患者的AR发生率比较差异无统计学意义。与*1/*1基因型和*1/*3基因型患者比较,*3/*3基因型患者术后肝功能异常、药物肾毒性不良反应的发生率较高(均为P<0.05)。结论 CYP3A5基因多态性对服用FK506肾移植患者的C/D值、肝功能异常、药物肾毒性有一定影响。CYP3A5*3/*3基因型患者的FK506的C/D值、肝功能异常和药物肾毒性不良反应的发生率较高。; 张海燕张小明吴小丽陈钰王捷; 关键词：肾移植他克莫司细胞色素P450 基因多态性血药浓度

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广东省自然科学基金(10451001002004935)