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国家杰出青年科学基金(30400314)
作品数:
1
被引量:1
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王诚
宋岳强
左正宏
陈奕欣
吕良炬
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厦门大学学报...
年份
1篇
2006
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小鼠OB基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达
被引量:1
2006年
利用RT-PCR技术从小鼠脂肪组织中扩增了OB基因,并利用定向克隆技术克隆至原核表达载体pTO-T7.将构建好的质粒导入表达型大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行Western-blot检测.表达产物利用亲和层析技术进行纯化.结果显示:表达的带有his标签的小鼠leptin融合蛋白,分子量约为20 ku.0.5 mmol/L的IPTG在37℃诱导2.5 h时,leptin融合蛋白的表达量达到最大,达菌体总蛋白50%以上.表达产物经过纯化,纯度可达90%以上.Western-blot杂交显示,小鼠leptin融合蛋白有很强的抗原特异性.
宋岳强
左正宏
王诚
吕良炬
陈奕欣
关键词:
OB基因
克隆
原核表达
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