广东省科技攻关计划(A20403)
- 作品数：5 被引量：10H指数：1
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- 相关机构：华南农业大学河南农业大学中国科学院更多>>
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- AIV NP基因在噬菌体表面的展示及间接ELISA方法的建立被引量：1
- 2008年
- 利用DNA重组技术,将禽流感病毒(AIV)核蛋白基因片段克隆重组于溶菌酶缺陷噬菌体T4-z1,获得重组噬菌体T4-z1-NP。经SDS-PAGE和Western blot检测证实,AIV核蛋白成功地在T4噬菌体表面展示。以T4-z1-NP为抗原建立了检测禽流感抗体的酶联免疫吸附试验(T4-NP-ELISA)方法。其与琼脂免疫扩散试验(AGP)的相对灵敏度为100%,特异性为87.62%,T4-NP-ELISA的检测准确率为91.43%。T4-NP-ELISA可检测H5、H7和H9亚型AIV特异性抗体,而IBD、IB、MD、ND、EDS的阳性血清检测结果则为阴性。敏感性试验证实,当阳性血清以1∶640倍稀释时仍能检测到流感病毒抗体,说明该方法比较敏感。对192份血样的检测显示,T4-NP-ELISA与IDDEXX ELISA符合率为96.8%。这表明T4-NP-ELISA可检测AIV抗体,也为检测与诊断AI提供了一种技术选择。
- 王新卫毕英佐何宏轩王宪文詹爱军马静云
- 关键词：禽流感病毒核蛋白T4噬菌体
- 禽流感病毒的宿主特异性和致病性分子基础被引量：7
- 2006年
- 禽流感病毒可感染许多鸟类和哺乳动物,但是其自然宿主范围通常限于野生水禽,如野鸭、海鸥等。近年来出现新的特征,可以感染人类、猫、虎等动物,突破了宿主限制性,出现种间传播。这与其宿主特异性变化和致病力变异有关。为此,依据禽流感病毒的致病特性、抗原蛋白(血凝素蛋白HA)特性和宿主细胞受体特点,结合其它影响因素,阐述了流感病毒的宿主特异性和致病性分子基础,以进一步认识禽流感病毒。
- 王新卫詹爱军
- 关键词：流感病毒宿主特异性分子基础
- 禽流感病毒核蛋白在噬菌体表面的展示被引量：1
- 2008年
- 利用PCR技术,扩增禽流感病毒(AIV)核蛋白基因片段,将其克隆至pR质粒的T4噬菌体SOC基因C末端获得重组质粒pR-np,以此重组载体转化大肠杆菌Escherichia coli2(E2),用溶菌酶缺陷噬菌体T4-z1感染重组E2菌,重组载体与缺陷噬菌体T4-z1基因发生同源重组,将np基因整合到噬菌体基因组中,用PCR方法筛选重组噬菌体并命名为T4-z1-np。经Western blot免疫电镜与ELISA检测证实,T4-z1-np表达的NP融合蛋白具有免疫学活性。结果表明,AIV核蛋白成功地在T4噬菌体表面展示,为禽流感防治奠定了基础。
- 王新卫何宏轩毕英佐马静云王宪文詹爱军
- 关键词：禽流感病毒NP基因T4噬菌体
- 禽流感病毒NP蛋白与T4噬菌体SOC蛋白的融合表达被引量：1
- 2007年
- 利用PCR技术扩增禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)NP基因。将NP基因克隆至T4噬菌体表达质粒pSOC的SOC基因(T4噬菌体表面非结构蛋白基因)下游,构建成T4噬菌体SOC位点表达NP的表达载体pSOC-NP。将其转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后表达的目的蛋白SOC-NP进行SDS-PAGE与Western-blot方法检测。结果表明,表达的SOC-NP蛋白相对分子质量约58kD,表达量占菌体总蛋白量的20.34%,并具有与AIV特异性抗体反应的活性。
- 王新卫毕英佐马静云詹爱军曹永长
- 关键词：禽流感病毒核蛋白T4噬菌体
