福建省自然科学基金(B0610027)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
- 相关作者：施碧红李强蔡容华张建军吴伟斌更多>>
- 相关机构：福建师范大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- DNA-蛋白质相互作用研究的方法及其新进展被引量：9
- 2009年
- DNA与蛋白质的相互作用参与生命体内的许多生物学过程,关于二者相互作用的研究是人们了解基因表达机制、揭开生命奥秘的关键所在。该文简要阐述了传统研究DNA-蛋白质相互作用的常用方法及其优缺点,并综述了近年来该领域所采用的新技术及其新进展。
- 蔡容华李强张建军邢佩佩施碧红
- 关键词：相互作用DNA蛋白质
- 扩展青霉FS1884脂肪酶基因的定点诱变及其活性分析被引量：4
- 2009年
- 为提高扩展青霉FS1884脂肪酶活性,采用一步突变法对脂肪酶(PEL)的基因进行体外M220V定点诱变,然后将其连接到表达载体pPIC3.5K中,构建重组表达载体pPIC3.5K-M220V-PEL,电转化毕赤酵母GS115中,经甲醇诱导后脂肪酶成功分泌表达.重组脂肪酶的活性分析表明:突变体在毕赤酵母中得到活性表达,获得脂肪酶表达产物PEL-M220V-GS,在35℃下具有最高酶活为3099U/mg,比野生型提高了5%.
- 李强张建军蔡容华吴伟斌施碧红施巧琴
- 关键词：扩展青霉碱性脂肪酶毕赤酵母
- 基于易错PCR定向进化扩展青霉Penicillium expansum FS1884碱性脂肪酶被引量：3
- 2011年
- 为改善扩展青霉FS1884碱性脂肪酶的活性及酶学性质,利用连续两轮易错PCR对扩展青霉FS1884脂肪酶基因PEL进行随机突变,在大肠杆菌JM109中构建突变文库。含突变脂肪酶基因的重组质粒电击转化巴斯德毕赤酵母GS115,经过YPOM板初筛和橄榄油检验板复筛,获得一株酶活性提高的脂肪酶突变体:PEL-ep25-GS。与野生型脂肪酶PEL-GS相比,在最适温度40℃、pH9.4时突变体的酶活力是野生型酶的1.3倍。测序结果表明:该突变体第253位氨基酸发生了突变,由赖氨酸变成蛋氨酸。
- 施碧红陈明翟妙仙严蕾陈文静
- 关键词：易错PCR脂肪酶酶活
- 易错PCR技术改造扩展青霉脂肪酶被引量：1
- 2011年
- 利用易错PCR技术,建立脂肪酶基因随机突变文库,将随机突变脂肪酶基因转化毕赤酵母GS115,初步筛选了4000株突变菌株,对300株较优突变株进行酶的活力、耐热性、耐酸性的摇管复筛,进一步摇瓶复筛后获得优良突变株ep3,所产突变脂肪酶(ep3-GS)的适宜pH为9.4,适宜作用温度为35℃,与野生重组脂肪酶(PEL-GS)一致,该温度下酶的比活为3440 U/mg,比野生型脂肪酶提高17%。
- 施碧红李强陈明吴伟斌施巧琴吴松刚
- 关键词：易错PCR扩展青霉脂肪酶
