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重组结核抗原痘苗病毒免疫次数和免疫途径对免疫原性的影响: 2008年; 卡介苗（BCG）是目前用于预防结核病的惟一疫苗，但其对成年人结核病的预防效果不理想。本研究前期工作已构建了5种不同类型的表达结核杆菌特异抗原的重组痘苗病毒，其免疫小鼠2次后均可激发针对结核杆菌抗原的特异性细胞免疫。然而，重组安卡拉痘苗病毒（MVA）是一活的病毒载体，此重组病毒是否能多次免疫动物以及多次免疫动物后能否产生更有效的免疫反应尚不清楚。此外，用重组MVA经不同途径免疫小鼠，; 楼觉人张群朱琳; 关键词：重组痘苗病毒免疫原性免疫途径免疫次数结核抗原特异性细胞免疫

重组结核抗原痘苗病毒Ankara株的构建及其免疫原性研究被引量：5: 2008年; 目的构建5种不同类型的表达结核杆菌特异抗原的重组痘苗病毒，并研究其特异免疫原性。方法运用同源重组技术将含结核分泌抗原Ag85A和ESAT-6的基因片段插入痘苗病毒表达质粒p18中。重组质粒导入痘苗病毒Ankara（MVA）后构建重组痘苗病毒，经筛选和Western blot鉴定，得到5个种类的带有结核抗原基因的重组病毒。用构建的5种重组病毒免疫小鼠，MTT法检测免疫后小鼠脾淋巴细胞对特异结核抗原的增殖反应；ELISA检测小鼠脾淋巴细胞培养上清液中IFN-γ的含量；结核菌素纯蛋白衍化物（PPD）皮内试验以检测重组病毒引发的针对结核抗原的特异细胞免疫应答。结果构建的5种重组病毒介导的细胞表达产物经Western blot鉴定确认相对分子质量与结核抗原一致。免疫小鼠两次后，5种重组病毒免疫组脾淋巴细胞体外与Ag85A—ESAT-6融合蛋白共培养后表现出明显的增殖活性（P〈0．01），培养上清液中IFN-γ的浓度均较同组细胞经生理盐水刺激明显增高（P〈0．05）；与空痘苗病毒或生理盐水免疫后小鼠相比，5种重组MVA免疫组脾淋巴细胞与Ag85A-ESAT-6融合蛋白共培养后同样表现出明显的增殖活性（P〈0．01），与Ag85A—ESAT-6融合蛋白共培养的细胞上清液中IFN-γ的浓度均升高（P〈0．01）。与空痘苗病毒或生理盐水免疫后小鼠相比，5种重组MVA免疫组小鼠对PPD都表现出显著的迟发型超敏反应应答（P〈0．05）。结论成功构建了5种不同类型的表达结核杆菌抗原的重组痘苗病毒疫苗，其免疫小鼠后可激发针对结核杆菌抗原的特异性细胞免疫。; 楼觉人张群朱琳; 关键词：结核免疫原性

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上海市浦江人才计划项目(PJ200601219)

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