广东省自然科学基金(U0631006)
- 作品数：12 被引量：156H指数：6
- 相关作者：陈金顶赵明秋蒋红霞张小华汤电更多>>
- 相关机构：华南农业大学中山大学佛山科学技术学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 结核分枝杆菌与牛分枝杆菌全基因组比较分析被引量：3
- 2010年
- 本研究旨在揭示结核分枝杆菌与牛分枝杆菌全基因组的遗传差异,为结核分枝杆菌与牛分枝杆菌的鉴别诊断提供新的分子标志。利用结核分枝杆菌H37Rv和牛分枝杆菌AF2122/97的全基因组测序结果,通过在线比对,完成了两者的全基因组比对分析。结果显示AF2122/97相对H37Rv存在14处大片段缺失,大小范围为0.8～12.7kb,其中RD18、RD19及RD20等3处缺失为首次报道。此外,AF2122/97还存在6处基因内部小片段的缺失,大小范围为12～714bp,其中Mb1319及Mb3293c基因内部缺失为首次报道。H37Rv相对AF2122/97存在6处大片段缺失,大小范围为1.3～5.4kb。此外,H37Rv还存在5处基因内部小片段的缺失,大小范围为10～48bp,这些基因的内部缺失都为首次报道。通过结核分枝杆菌H37Rv和牛分枝杆菌AF2122/97的全基因组序列比对,揭示了这2种菌株间的遗传差异,阐述影响表型特征、寄主偏好性及毒力差异的关键性遗传基础。这些新的认识将有助于开发新的药物、诊断试剂和疫苗。
- 朱汝仪潘文赵明秋琚春梅易琳王佳莹胡永明陈金顶
- 关键词：结核分枝杆菌牛分枝杆菌
- 新型可视化LAMP检测布鲁氏菌方法的建立及初步应用
- 本研究针对布鲁氏菌种特异的omp25基因建立了一种布鲁氏菌的新型可视化环等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。应用该方法对布鲁氏菌S19株、S2株、M...
- 潘文李珊珊赵明秋琚春梅陈金顶
- 关键词：布鲁氏菌
- 文献传递
- 耐环丙沙星患病动物源沙门菌的多重耐药分子特征被引量：1
- 2012年
- 采用13株耐环丙沙星食品动物源沙门菌进行喹诺酮类作用靶位基因及质粒介导耐药基因的扩增测序、有机溶剂耐受试验、HeLa细胞侵袭试验,探讨其多重耐药的分子特征。结果显示,菌株均携带质粒介导的喹诺酮耐药基因,7株对环丙沙星敏感性降低或低水平耐药(最小抑菌浓度0.125～4μg/mL),靶位基因无突变或gyrA单位点突变及外排泵活性增强;5株对环丙沙星高水平耐药(最小抑菌浓度32～128μg/mL),均在gyrA和parC发生双位点突变及外排泵活性增强,其中4株携带β内酰胺酶blaCTX-M基因。对环丙沙星高水平耐药的沙门菌的侵袭力显著高于敏感菌株。表明患病食品动物源沙门菌中,无论外排能力增强与否,gyrA单位点突变或质粒介导的喹诺酮耐药基因阳性,仅导致沙门菌对环丙沙星的低水平耐药;而外排泵机制联同染色体靶位基因突变可导致菌株对环丙沙星的高水平耐药,往往同时携带blaCTX-M基因;临床分离沙门菌随着对环丙沙星耐药程度的增加侵袭力增强。
- 张小华李健任艳娜汪天露孙永学蒋红霞
- 关键词：沙门菌
- 新型可视化LAMP检测结核分枝杆菌与牛分枝杆菌方法的建立及初步应用
- 本研究基于rimM(编码16S rRNA-加工蛋白)基因建立了一种新型的可视化环等温扩增(loop-mediatedisothermal amplification,LAMP)方法,用于快速检测结核分枝杆菌及牛分枝杆菌。...
- 朱汝仪潘文王佳莹赵明秋琚春梅陈金顶
- 关键词：结核分枝杆菌牛分枝杆菌
- 文献传递
- 牛布鲁氏菌与牛分枝杆菌双重PCR方法的建立及应用
- 根据GenBank中已发表的流产布鲁氏菌种特异的omp25基因序列及牛分枝杆菌特异保守的16S rRNA加工蛋白rimM基因序列设计了2对特异性引物,通过对PCR条件的优化,建立了快速鉴别检测牛布鲁氏菌和牛分枝杆菌的双重...
- 潘文薛红赵明秋琚春梅乔进平陈金顶
- 关键词：牛分枝杆菌PCR
- 文献传递
- 结核分枝杆菌与牛分枝杆菌全基因组比较分析
- 本研究旨在揭示结核分枝杆菌与牛分枝杆菌全基因组的遗传差异,为结核分枝杆菌与牛分枝杆菌的鉴别诊断提供新的分子标志。利用结核分枝杆菌H37Rv和牛分枝杆菌AF2122/97的全基因组测序结果,通过在线比对,完成了两者的全基因...
- 朱汝仪潘文赵明秋琚春梅易琳王佳莹胡永明陈金顶
- 关键词：结核分枝杆菌牛分枝杆菌
- 文献传递
- 新型可视化LAMP检测布鲁氏菌方法的建立及初步应用
- 本研究针对布鲁氏菌种特异的omp25基因建立了一种布鲁氏菌的新型可视化环等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。应用该方法对布鲁氏菌S19株、S2株、M...
- 潘文李珊珊赵明秋琚春梅陈金顶
- 关键词：布鲁氏菌
- 文献传递
- 广东地区鱼源大肠埃希菌ESBLs和PMQR流行分布调查被引量：7
- 2012年
- 从广东地区食用鱼肠道分离鉴定了218株大肠埃希菌,用琼脂稀释法测定218株大肠埃希菌对17种抗菌药物的敏感性,并用PCR方法调查ESBLs和PMQR基因的流行分布情况.对10株β-内酰胺酶(包括ESBLs)和/或PMQR阳性菌株进行了接合转移试验,探讨ESBLs和PMQR基因的传播机制.敏感性测定结果显示:218株大肠埃希菌对17种抗菌药物的耐药率为0.5%～72.5%.在112株氨苄西林耐药菌株中,检测出2种ESBLs基因,分别为blaCTX-M-79和blaCTX-M-14,2株菌中还检测到β-内酰胺酶基因blaLEN-4和blaLEN-17.在80株环丙沙星耐药菌株中,检测到59株为PMQR阳性,分别为qnrB(33株),qnrD(5株),qnrS(21株),aac(6')-Ib-cr(6株).接合转移试验结果表明,ESBLs和/或PMQR基因可同时存在于一个质粒上进行转移.
- 汤电张小华付晓平王丽华郭玉芳李健纪雪薇蒋红霞
- 关键词：耐药性ESBLSPMQR
- 大肠杆菌外排泵系统基因表达及ELISA检测方法建立
- 2008年
- 【目的】对大肠杆菌AcrAB外排泵系统acrA、acrB基因进行原核表达,获得的表达产物AcrA、AcrB蛋白分别免疫兔,制备相应的抗体,建立大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法。【方法】扩增AcrAB外排泵系统acrA、acrB基因片段,扩增片段分别与原核表达载体pET-41a(+)连接构建重组质粒,于BL21(DE3)中进行诱导表达。表达产物AcrA、AcrB纯化后分别免疫新西兰大白兔,获得抗AcrA、AcrB抗血清,并用Western blot方法对表达产物进行鉴定分析。纯化的AcrA、AcrB蛋白分别按不同的浓度包被酶标板,与不同稀释倍数的抗血清反应,通过ELISA检测确定最佳抗原包被浓度及抗体稀释度,初步建立大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法。【结果】成功克隆和表达了acrA、acrB基因片段,经SDS-PAGE检测表明两种表达产物AcrA、AcrB均以可溶性蛋白形式存在。AcrA、AcrB抗原蛋白最佳包被浓度分别为1.0μg.ml-1和0.5μg.ml-1,抗AcrA、AcrB血清的最佳稀释度分别为1﹕800和1﹕400。用初步建立的ELISA方法检测8株大肠杆菌多重耐药菌株外排泵表达水平,结果表明分别用两种蛋白作包被抗体检测外排泵表达水平的结果一致。【结论】本研究通过原核表达的方法获得大肠杆菌AcrAB外排泵系统AcrA、AcrB蛋白并制备了相应的抗体,分别用两种抗体包被酶标板,并建立了大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法,对8株多重耐药菌株的检测结果表明该方法可行、可靠。
- 吕殿红蒋红霞曾振灵陈杖榴
- 关键词：大肠杆菌外排泵原核表达ELISA方法
- 广东地区患病食品动物源大肠杆菌ESBLs和AmpC酶流行分布调查被引量：19
- 2012年
- 质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶广泛传播和扩散,导致全球范围内肠杆菌科细菌对超广谱头孢菌素类的耐药性发展迅速,引起人们高度重视。食品动物源大肠杆菌可作为耐药基因储库,对细菌耐药性在动物、环境和人之间的传播起着非常重要的作用。本研究从2009年患病的食品动物,包括鸡、鸭、鹅和猪,分离鉴定了315株大肠杆菌,调查ESBLs和AmpC酶在患病食品动物中的流行分布。经双纸片协同扩散实验筛选出61株ESBL阳性菌株,PCR检测共检测出8种blaCTX-M基因,分别为blaCTX-M-14/14b、blaCTX-M-79、blaCTX-M-65、blaCTX-M-27、blaCTX-M-15、blaCTX-M-24、blaCTX-M-98和blaCTX-M-13,其中检出率最高的为blaCTX-M-79,其次为blaCTX-M-14/14b。本研究还检测出1株新的SHV型酶,命名为SHV-135;PCR共检测出5株大肠杆菌携带质粒源CMY-型AmpC酶,其中2株鹅源大肠杆菌携带1个新型CMY酶,命名为CMY-64。本研究表明患病动物分离的大肠杆菌中ESBLs和AmpC酶存在复杂性和多样性,而且新型β-内酰胺酶检出日益增多,提示兽医临床应慎用β-内酰胺类抗生素。
- 汤电张浩吉纪雪薇刘继郭玉芳王丽华付晓平张小华孙永学蒋红霞
- 关键词：耐药性ESBLSAMPC酶质粒
