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广东省科技计划工业攻关项目(2005b10401022)

作品数:1 被引量:2H指数:1
相关作者:李爱民罗荣城陆慧琦钱新宇韩焕兴更多>>
相关机构:第二军医大学南方医科大学南方医院更多>>
发文基金:广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇单克隆
  • 1篇单克隆抗体
  • 1篇源性
  • 1篇人源
  • 1篇人源性
  • 1篇噬菌体
  • 1篇噬菌体展示
  • 1篇噬菌体展示肽...
  • 1篇片段
  • 1篇肽库
  • 1篇菌体
  • 1篇抗核
  • 1篇抗核抗体
  • 1篇抗体
  • 1篇克隆
  • 1篇FAB片段

机构

  • 1篇第二军医大学
  • 1篇南方医科大学...

作者

  • 1篇韩焕兴
  • 1篇钱新宇
  • 1篇陆慧琦
  • 1篇罗荣城
  • 1篇李爱民

传媒

  • 1篇第二军医大学...

年份

  • 1篇2008
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
人源性抗核抗体Fab片段的筛选及鉴定被引量:2
2008年
目的:制备人源性抗核抗体Fab片段。方法:通过4轮淘筛,富集已构建的人源性抗核抗体Fab片段噬菌体抗体库,间接ELISA法鉴定4轮淘筛后抗核抗体Fab片段噬菌体抗体;提取阳性克隆的噬菌粒DNA,切除gⅢ基因片段,自连接后转化大肠杆菌XL1-Blue,以IPTG诱导表达可溶性人源性抗核抗体Fab片段;应用间接ELISA法及荧光免疫法对表达上清进行鉴定。结果:第4轮洗脱的噬菌体滴度较第1轮增加200余倍,从抗核抗体Fab片段噬菌体库中筛选出2株阳性克隆,切除gⅢ基因后自连的噬菌粒DNA经XhoⅠ单酶切证实连接成功。间接ELISA法检测结果显示:制备的可溶性人源性抗核抗体Fab片段均呈现抗dsDNA阳性,具有抗原特异性;免疫荧光法结果显示:Hep2细胞和猴肝脏组织细胞核显示均质型荧光,绿蝇短膜虫的动基体显示均质型荧光。结论:成功制备具有抗原特异性的可溶性、人源性抗核抗体Fab片段,为高亲和力抗核抗体Fab片段的制备奠定了基础。
陆慧琦钱新宇李爱民罗荣城韩焕兴
关键词:抗核抗体单克隆抗体噬菌体展示肽库
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