国家自然科学基金(41271340)
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
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- 相关领域：理学轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 邻苯二甲酸二丁酯人工抗原的制备及免疫鉴定被引量：2
- 2016年
- 【目的】制备并鉴定1种新型邻苯二甲酸二丁酯人工抗原。【方法】以4-硝基邻苯二甲酸为原料,经过酯化、还原生成4-氨基邻苯二甲酸二丁酯(DBAP),DBAP再与戊二酸酐反应,衍生生成4-戊二酸单酰邻苯二甲酸二丁酯(DBCP)。将合成的半抗原衍生物DBCP通过活性酯法与牛血清蛋白(BSA)或卵清蛋白(OVA)偶联,得到人工抗原。通过免疫新西兰大白兔获得抗血清,经间接竞争酶联免疫法(ic ELISA)检测抗体特异性。【结果】经质谱、氢核磁共振谱图鉴定,半抗原衍生物合成成功,经紫外光谱、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫试验证实偶联成功,并计算得出DBCP与载体蛋白BSA和OVA的结合比分别为11∶1和17∶1。经ic ELISA法检测,兔1和兔2的血清效价均达到1∶128 000,IC50分别为301和308 ng·m L-1,反应特异性较好。【结论】半抗原衍生物的合成是方便、安全的。邻苯二甲酸人工抗原的成功制备使获得DBP多克隆抗体以及建立DBP免疫分析方法成为可能。
- 郑盛武赖丹赵肃清
- 关键词：邻苯二甲酸二丁酯人工抗原光谱
- 4种邻苯二甲酸酯塑化剂人工抗原的合成及免疫检测被引量：5
- 2016年
- 以4-硝基邻苯二甲酸为原料,衍生合成4种结构类似物,并分别通过重氮化法和活泼酯法与载体蛋白牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)偶联制得人工抗原。利用紫外光谱扫描和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electroporesis,SDS-PAGE)检测鉴定人工抗原,并用4种与BSA偶联的人工抗原作免疫原免疫新西兰大白兔。利用酶联免疫吸附实验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测抗体灵敏度和特异性。经紫外光谱和SDS-PAGE证实人工抗原偶联成功,经免疫分析法检测抗体效价,4-氨基邻苯二甲酸二丁酯-BSA(dibutyl 4-aminophthalate-BSA,DBAP-BSA)抗体效价达到1∶64 000,4-戊二单酰邻苯二甲酸二丁酯-BSA(dibutyl 4-carboxylphthalte-BSA,DBCP-BSA)、4-氨基邻苯二甲酸二异丁酯-BSA(diisobutyl 4-aminophthalate-BSA,Di BAP-BSA)和4-氨基邻苯二甲酸二环己酯-BSA(dicyclohexyl 4-aminophthalate-BSA,DCHAP-BSA)抗体效价均达到1∶128 000。DBAP-BSA、DBCP-BSA、Di BAP-BSA和DCHAP-BSA分别对邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)、DBP、邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate,Di BP)和邻苯二甲酸二环己酯(dicyclohexyl phthalate,DCHP)4种抗体的IC50值为0.305、0.268、0.104、0.247μg/m L。四者之间交叉反应率低,反应特异性较好。
- 赖丹郑盛武赵肃清
- 关键词：邻苯二甲酸酯人工抗原抗体
- 光谱法研究pH值对纳米银及其与赖氨酸相互作用的影响被引量：2
- 2016年
- 利用化学方法合成纳米银,调节pH值,加入赖氨酸溶液,通过紫外光谱和动态光散射法研究pH对纳米银及纳米银-赖氨酸体系稳定性的影响,利用表面增强拉曼光谱考察赖氨酸与纳米银的相互作用方式。紫外光谱显示纳米银和纳米银-赖氨酸体系在pH值为5~10时,均具有较强的吸收峰;应用动态光散射测定了不同pH的纳米银及其赖氨酸体系的粒径及强度自相关函数,在pH值为5~10时,粒径分布均匀,DLS自相关曲线平滑,说明纳米银和纳米银-赖氨酸体系稳定性良好;SERS研究了pH为4、7、10时,赖氨酸在银粒子表面的吸附作用,体系出现比较明显的赖氨酸特征峰,当pH为4时,为δ(NH3+)的1444cm^(-1)谱峰和δ(COO-)的1576cm^(-1),此时赖氨酸通过氨根和羧酸根共同与银纳米粒子发生相互作用,当pH为10时,NH_3^+发生去质子化,此时赖氨酸只出现COO-的伸缩振动在1576cm^(-1)处,说明此条件下赖氨酸以羧酸根吸附在银粒子表面。
- 张磊姬文晋宋巍陈志舜赵肃清
- 关键词：纳米银赖氨酸PH值表面增强拉曼光谱动态光散射
- 邻苯二甲酸酯类塑化剂免疫分析方法的研究
- 由于塑化剂能对人体的生殖系统等造成危害,该类物质受到越来越多的关注,塑化剂的分析和检测也成为近年来的研究热点。当前许多传统的仪器分析方法已经成功应用在塑化剂的检测方面,但是快速、高效、简便的检测方法还相对较少。免疫分析方...
- 郑盛武赖丹赵肃清
- 关键词：邻苯二甲酸酯类生殖毒性免疫分析
- 文献传递
- 采用GC-MS和ELISA试剂盒法对比分析白酒中的塑化剂被引量：5
- 2015年
- 使用GC-MS和ELISA试剂盒法对白酒中的塑化剂进行测定,考察了GC-MS的精确度及回收率,ELISA试剂盒法的标准曲线,并比较了两种方法的不同前处理对测定结果的影响。结果表明：GC-MS的精密度标准偏差在-6.0%~6.3%,回收率在87%~113%,ELISA试剂盒法线性良好,两种方法对样品的测定结果接近,表明两种方法都可以对白酒中的塑化剂进行定性定量分析。ELISA试剂盒法前处理比GC-MS简便,但有一定的损失,可以进行快速的定性定量分析,如需更准确的测定塑化剂含量,可以配合GC-MS法进行验证检测。
- 彭维李双祁刘飞赵肃清曹庸
- 关键词：白酒塑化剂GC-MSELISA
- 基于基质辅助激光解吸-电离质谱的磷脂分析和成像的基质体系与制样方法被引量：2
- 2014年
- 由于磷脂在神经传递和生物膜功能方面的重要作用,磷脂分析已成为目前脂质组学研究的热点,而基质辅助激光解吸-电离成像质谱(MALDI-IMS)是磷脂分析和成像的先进技术。针对磷脂特点,优化基质溶液组成并建立合适的基质制样与覆盖方法是最关键的环节。为了建立具有高真空稳定性(稳定存在2h以上)、耐高频率激光辐射、无基质峰干扰、分布均匀且不引起分析物位移、能全面解吸-电离不同结构与浓度的磷脂,并准确表征其空间分布情况的基质体系,不少研究者进行了大量的研究。本工作从基质类型变化出发,综述了近10年来MALDI-IMS用于生物组织磷脂分析和成像的基质体系及制样方法,并对其发展前景进行了展望。
- 周丽华陈安珣赵肃清于会娟
- 关键词：磷脂基质成像制样
- 邻苯二甲酸二丁酯多克隆抗体的制备及其免疫分析研究
- 邻苯二甲酸二丁酯(DBP)(Fig.1)是一种重要的环境荷尔蒙物质,是塑化剂的一种,能使男性精子数量减少,生殖能力下降,影响婴幼儿健康成长,导致儿童性早熟。它主要用于塑料、橡胶、化妆品以及香料、印染、涂料等行业。由于国家...
- 赖丹郑盛武赵肃清
- 关键词：邻苯二甲酸二丁酯人工抗原抗体免疫酶联免疫法
- 文献传递
