国家自然科学基金(81201467)
- 作品数：10 被引量：28H指数：3
- 相关作者：李国菊姜笃银宋国栋靳小雷都乐更多>>
- 相关机构：北京协和医学院中国医学科学院山东大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金协和青年科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 角质细胞生长因子噬菌体活性肽的构建及其对表皮细胞增殖的作用被引量：1
- 2013年
- 目的构建展示角质细胞生长因子（KGF）噬菌体活性肽，检测其促表皮细胞增殖的作用。方法选择4个KGF序列，设计引物；用反转录．PCR法获得3个KGF序列（Pl、P2和P4），直接合成1个KGF序列（P3）；将KGF序列亚克隆至噬菌粒pComb3中；用噬菌体展示技术，将KGF基因片段展示于噬菌体表面；用四甲基偶氮唑盐（MTF）法检测KGF噬菌体活性肽促表皮细胞增殖的作用，测定其在570nm的吸光度（A）值，用免疫荧光法检测其细胞亲和力。结果获得4种KGF基因，构建在噬菌粒pComb3中；通过噬菌体展示技术将其表达于噬菌体的表面。MTr检测的吸光度（A）值结果显示阴性对照组（0．293±0．017）与KGF对照组（0．520±0．043）及4种KGF噬菌体活性肽组（P1～4）（0．469±0．057、0．441±0．048、0．438±0．035、0．446±0．037）间差异均有统计学意义（均P〈0．01），免疫荧光检测结果显示KGF和4种KGF噬菌体活性肽与表皮细胞具有较好的亲和力。结论构建展示的KGF噬菌体活性肽能够显著促进表皮细胞增殖。
- 宗宪磊姜笃银李国菊蔡景龙
- 关键词：细菌噬菌体肽库角质细胞生长因子表皮细胞
- 真皮支架材料的研究现状被引量：4
- 2015年
- 大面积的烧伤、创伤和皮肤溃疡等皮肤缺损性病变可导致皮肤功能障碍,严重时会危及患者生命.采取自体刃厚皮片移植修复创面是常用方法,但术后常发生增生性瘢痕和瘢痕挛缩,影响患者的外观和功能,原因是其缺乏真皮成分.皮肤组织工程学的出现为改善创面修复质量和解决皮源不足等问题提供了崭新的思路和方法,
- 徐静静蔡景龙李毅宗宪磊李国菊李国帅
- 关键词：皮肤溃疡修复创面增生性瘢痕
- 同位素标记相对和绝对定量技术在家族性瘢痕疙瘩蛋白质组学研究中的应用被引量：2
- 2017年
- 目的 通过比较家族聚集性瘢痕疙瘩（FK）和散发性瘢痕疙瘩（SK）、增生性瘢痕（HS）、正常皮肤（NS）组织样本间蛋白质组表达的差异,筛选出与FK关系密切的蛋白,以期找到其特异性标志物,探索相关发病机制.方法 应用同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）技术,对FK、SK、HS、NS 4组,每组6例样本,分别进行酶解、标记及串联质谱分析,进行分子生物学验证及生物信息学分析.并随机挑选2种差异蛋白以蛋白质印迹法进行验证.采用SPSS 16.O软件,用独立样本t检验对4组蛋白检测结果进行统计学分析,P＜0.05为差异有统计学意义,筛选出变化倍数在1.2倍以上的差异蛋白.结果 测定到蛋白质共2 450种,其中各组间差异蛋白数量及情况：与NS相比,FK特异性表达上调的蛋白共250种,下调的蛋白有281种;SK中特异性表达上调的蛋白共281种,下调的蛋白有232种;HS中特异性表达上调的蛋白共199种,下调的蛋白有233种.与SK相比,FK特异性表达上调的蛋白共64种,下调的蛋白有164种;HS特异性表达上调的蛋白共79种,下调的蛋白有169种;与HS相比,FK特异性表达上调的蛋白共124种,下调的蛋白有115种.这些差异蛋白在细胞外基质、细胞黏附及生物代谢等多条重要信号转导通路中集中分布.蛋白印迹法验证结果表明2种差异蛋白（P3H1和RCN-3）变化趋势与iTRAQ技术检测结果相同.结论 iTRAQ技术能较好地显示瘢痕疙瘩、增生性瘢痕与正常皮肤组织间的蛋白质表达差异,将有助于揭示其发病机制,找到其特异性标志物用于诊断和治疗.
- 赵竟伊靳小雷宗宪磊蔡景龙祁佐良
- 关键词：瘢痕疙瘩增生性瘢痕蛋白质组学
- 动物瘢痕模型的相关研究进展被引量：2
- 2022年
- 皮肤损伤后的异常愈合会导致病理性瘢痕的产生。病理性瘢痕的出现不仅影响美观,严重时还会造成心理和生理功能障碍。病理性瘢痕的机制研究对于瘢痕治疗有极为重要的意义。其中,动物瘢痕模型是目前研究病理性瘢痕的重要模型手段之一。理想的动物瘢痕模型应该在组织学、细胞学等层面尽可能接近于人类的病理性瘢痕。该文分别从传统技术动物瘢痕中的啮齿类动物模型、兔耳模型和猪模型,以及新技术动物瘢痕模型这两个方面,结合近年来在瘢痕领域应用较多的研究,进行了相应系统的阐述。
- 李宇博祁佐良靳小雷宋国栋宗宪磊
- 关键词：瘢痕疙瘩肉芽组织伤口愈合
- 曲安奈德联合得宝松注射治疗瘢痕疙瘩的效果被引量：11
- 2016年
- 目的 探讨曲安奈德联合得宝松注射治疗瘢痕疙瘩的效果。方法 选取2013年5月-2014年12月中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院收治的瘢痕疙瘩患者150例,所有患者随机分为曲安奈德组、得宝松组和曲安奈德联合得宝松组,每组各50例。观察三组患者的临床疗效、不良反应及复发率。结果 曲安奈德联合得宝松组患者总有效率为94.00%,明显高于曲安奈德组的70.00%,得宝松组的72.00%,差异有统计学意义（P〈0.05）。曲安奈德联合得宝松组患者的不良反应发生率为6.00%,明显低于曲安奈德组的14.00%及得宝松组的16.00%,差异有统计学意义（P〈0.05）。曲安奈德联合得宝松组患者6、12个月复发率明显低于曲安奈德组和得宝松组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 曲安奈德联合得宝松注射治疗瘢痕疙瘩的临床效果显著,值得临床推广应用。
- 宗宪磊宋国栋都乐靳小雷
- 关键词：曲安奈德得宝松瘢痕疙瘩复发
- 聚集蛋白多糖在瘢痕疙瘩中的表达研究被引量：1
- 2017年
- 目的：探讨聚集蛋白多糖（Aggrecan）在瘢痕疙瘩中的表达和意义。方法：临床收集瘢痕疙瘩及正常皮肤组织标本各10例,采用免疫组织化学技术及蛋白印迹方法检测其中Aggrecan的表达,并对结果进行统计学分析。结果：Aggrecan在瘢痕疙瘩及正常皮肤组织中皆有表达,但在瘢痕疙瘩中表达明显增高,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：聚集蛋白多糖在瘢痕疙瘩组织中表达增高,提示其可能参与瘢痕疙瘩形成过程。
- 赵竟伊靳小雷宗宪磊杨晓楠都乐宋国栋蔡景龙祁佐良
- 关键词：瘢痕疙瘩细胞外基质
- 角质细胞生长因子活性短肽促进糖尿病大鼠创面愈合的实验研究被引量：1
- 2018年
- 目的探讨角质细胞生长因子(KGF)活性多肽对糖尿病大鼠创面愈合的促进作用。方法选择24只健康雌性SD大鼠,腹腔注射链脲佐菌素酸(STZ),制备糖尿病大鼠模型。将24只大鼠随机分成4组,即阴性对照组、KGF阳性对照组、KGF活性短肽1组、KGF活性短肽2组,每组6只。分别于大鼠背部制备直径2 cm的圆形创面,并定期对创面局部注射各组药物。伤后14 d进行拍照,记录创面未愈合面积,计算创面愈合率。采用HE染色观察创面愈合情况。结果成功制备糖尿病大鼠慢性创面模型。伤后14 d,KGF阳性对照组、KGF活性短肽1组和KGF活性短肽2组的创面愈合率与阴性对照组比较,显著升高,差异有高度统计学意义(P <0.01);KGF活性短肽1组和KGF活性短肽2组的创面愈合率与KGF阳性对照组比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。阴性对照组创面皮肤全层缺失,毛囊、汗腺和皮脂腺等皮肤附件缺失,组织结构均匀致密、无层次,炎症细胞浸润明显。除阴性对照组外,其余各组均创面上皮化良好,深层组织层次清楚、结构疏松,炎症细胞浸润较少,并可见再生的毛囊、汗腺和皮脂腺等皮肤附件。结论 KGF活性短肽可促进糖尿病大鼠的创面愈合及皮肤附件的再生。
- 宗宪磊曹春艳宋国栋赖晨智余泮熹靳小雷姜笃银
- 关键词：角质细胞生长因子糖尿病大鼠创面愈合
- 合成角质细胞生长因子活性短肽促进表皮细胞增殖的实验研究被引量：2
- 2016年
- 目的应用噬菌体随机7肽库筛选角质细胞生长因子(Keratinocyte growth factor,KGF)的关键序列,进行KGF活性短肽的调整和合成,并研究其对表皮细胞增殖的作用。方法以KGF单克隆抗体为靶,筛选噬菌体随机7肽库,获得KGF的特异性序列,并进行序列调整。用免疫荧光法检测KGF活性短肽的表皮细胞亲和力。用CCK-8法检测KGF活性短肽对表皮细胞增殖的影响。用RT-PCR法和Western-blot法检测表皮细胞上特异性受体KGFR的表达水平。结果筛选噬菌体随机7肽库,获得2个与KGF相似的特异性序列,合成获得2个KGF活性短肽,并纯化至98%纯度,短肽的C端进行氨基化封闭,N端进行罗丹明激光染料标记。免疫荧光检测结果显示,2个KGF活性短肽均能够与表皮细胞相结合。CCK-8检测结果显示,与阴性对照组相比,2个KGF活性短肽能够促进表皮细胞增殖,并呈浓度依赖性。RT-PCR和Western-blot检测结果显示,2个KGF活性短肽组中表皮细胞表达KGFR增强。结论从噬菌体随机7肽库中筛选到2个KGF的关键序列,合成的2个KGF活性短肽能够与KGFR相结合,并增强KGFR的表达,从而促进表皮细胞增殖,有望应用于促进创面愈合。
- 宗宪磊陆海滨祁佐良李国菊宋国栋都乐靳小雷姜笃银
- 关键词：角质细胞生长因子表皮细胞创面愈合
- 真皮支架材料血管化研究进展
- 2021年
- 应用真皮支架材料覆盖创面可加快创面的修复愈合,而快速血管化是真皮支架材料发挥功能的基础,也是植入物在体内存活的必要条件。该文对近年来真皮支架材料血管化的最新研究进展进行了分类综述,从血管生成过程、调控血管生成的细胞因子、各类型材料血管化及三维打印材料血管化几个方面作出阐述,探寻解决真皮支架材料血管化不足的思路和方法。
- 赖晨智靳小雷宋国栋宗宪磊
- 关键词：脱细胞真皮创面愈合新生血管
- 人瘢痕组织脱细胞真皮基质的组织结构和生物力学性能被引量：4
- 2015年
- 目的 观察人瘢痕组织脱细胞真皮基质（ADM）的组织结构和生物力学性能.方法 取8例人成熟瘢痕、8例人增生性瘢痕和4例人正常皮肤,分别将其真皮层用鼓式取皮刀制备成约0.5 mm厚皮片,用2.5 g/L胰蛋白酶及体积分数0.5％ Triton X-100脱细胞处理制造出ADM;然后通过大体、组织学HE染色、扫描电镜观察其组织结构的差别,并分别进行离体接种人表皮干细胞培养,观察其细胞黏附生长情况的不同;最后通过检测每种ADM的应力-应变关系、应力松弛、蠕变和最大拉伸应力,分析其生物力学性能的差异.结果 制备的ADM均呈瓷白色,正常皮肤和成熟瘢痕的ADM质地柔软、有弹性,而增生性瘢痕的ADM质地稍差;光学显微镜和扫描电镜下可见各种ADM均无细胞存在,正常皮肤ADM胶原纤维均匀、排列规则有序,成熟瘢痕ADM胶原纤维粗细不等、排列稍紊乱,增生性瘢痕ADM胶原纤维排列较为致密紊乱;离体接种人表皮干细胞2周后三种ADM上均有表皮干细胞黏附生长,在正常皮肤和成熟瘢痕ADM组织表面和内部呈聚集生长,在增生性瘢痕ADM组织表面呈黏附生长;增生性瘢痕、成熟瘢痕、正常皮肤三种ADM的应力-应变参数β值（3.024±0.413、2.595±0.443、2.590±0.366）、蠕变斜率（0.018±0.003、0.019 ±0.009、0.023 ±0.010）和最大拉伸应力（8.971 ±2.434、11.011±1.492、15.567±2.931）差异均无统计学意义（均P＞0.05）;成熟瘢痕与正常皮肤ADM的应力-应变伸长比（0.238±0.083与0.291±0.048）、松弛斜率（-0.041±0.009与-0.047±0.008）、松弛量（0.775±0.194与0.968±0.211）、蠕变量（0.033±0.022与0.049±0.020）差异均无统计学意义（均P＞0.05）,而增生性瘢痕ADM的上述指标（0.188 ±0.036、-0.033 ±0.006、0.481 ±0.058、0.020±0.005）均显著低于正常皮肤ADM（均P＜0.05）.结论 成熟瘢痕ADM的组织结构、生物力学性能与正常皮肤ADM近似,其生物力学性能优于�
- 徐静静蔡景龙王黔李毅焦虎宗宪磊
- 关键词：瘢痕脱细胞真皮基质组织学生物力学
