国家自然科学基金(30471875)
- 作品数:8 被引量:46H指数:6
- 相关作者:赵素萍贺楚峰王承龙蔡鑫章唐瑶云更多>>
- 相关机构:中南大学第三军医大学西南医院中国人民解放军更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 诱导型一氧化氮合酶在鼻咽癌中的表达及意义被引量:15
- 2007年
- 背景与目的:诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在许多肿瘤中呈高表达,被认为与肿瘤的发生、发展、浸润及转移有关,但iNOS在鼻咽癌(NPC)肿瘤组织中的表达及其作用,国内尚未见报道,国外(PUBMED)也仅可查到两条与iNOS在NPC中表达有关的信息,然而这两项研究并未对iNOS表达与NPC的生物学行为进行探讨。本研究应用免疫组化法检测iNOS在鼻咽正常粘膜和NPC中的表达情况,探讨iNOS与NPC发生发展浸润和转移的关系。方法:选取鼻咽活检石蜡标本50例,其中低分化鳞癌40例,正常鼻咽粘膜标本10例作对照。石蜡切片免疫组织化学染色,光镜下观察iNOS的蛋白表达情况。结果:正常鼻咽组织中,iNOS蛋白无表达;在NPC组织中,iNOS免疫组化阳性者细胞胞质和胞核内出现棕黄色细颗粒,且胞核染色比胞质更强。在NPC组织中iNOS蛋白表达明显上调,其阳性表达率分别为67.5%(27/40),与正常鼻咽组织比较(0/10),差异具有显著性(P<0.05);有淋巴结转者iNOS的表达高于无淋巴结转移者(72.41%vs 54.55%),T3/4期NPC的iNOS表达高于T1/2期NPC(73.33%vs 50.00%),差异均具有显著性(P<0.05)。结论:①在NPC组织中,iNOS蛋白表达定位于细胞胞质和胞核,且胞核表达比胞质更强。②在NPC组织中,iNOS蛋白表达明显上调。iNOS的过度表达可能与NPC的发生、发展、侵袭和转移有关,选择性iNOS抑制剂可能有助于NPC的治疗。
- 刘阳云赵素萍刘庚勋李正贤孙正良江文
- 关键词:鼻咽癌诱导型一氧化氮合酶
- microRNA抑制鼻咽癌VEGF基因表达的实验研究被引量:7
- 2010年
- 目的:观察人工构建的microRNA对鼻咽癌CNE-2细胞VEGF基因表达的调控效应,探讨microR-NA在鼻咽癌基因治疗中的应用前景。方法:构建靶向VEGF基因的microRNA表达质粒,脂质体法转染鼻咽癌CNE-2细胞,RT-PCR检测转染细胞中VEGF基因的mRNA水平,Western Blotting法观察microRNA对VEGF蛋白表达水平的调控效应,CCK-8比色法检测靶向VEGF的人工构建microRNA对鼻咽癌细胞生长的抑制作用,皮下注射稳定转染microRNA质粒的CNE-2细胞,构建裸鼠移植瘤模型,观察肿瘤生长情况。结果:在mi-croRNA表达质粒转染CNE-2细胞后,VEGF的mRNA表达水平下调,蛋白表达水平降低,但是光镜和荧光显微镜下的初步观察显示CNE-2细胞生长未发生变化,以CCK-8比色法检测的细胞增殖抑制率也无明显改变,而在初步的裸鼠移植瘤实验中,发现调控VEGF表达的microRNA重组质粒能有效抑制肿瘤生长。结论:人工构建表达microRNA的质粒,可在鼻咽癌CNE-2细胞中有效下调VEGF基因的表达水平,抑制裸鼠移植瘤的生长,为鼻咽癌基因治疗研究奠定了一定的基础。
- 蔡鑫章危维赵素萍唐瑶云贺楚峰王承龙
- 关键词:鼻咽肿瘤血管内皮生长因子基因治疗MICRORNA
- 靶向hTERT基因的microRNA前体质粒抑制鼻咽癌细胞生长的体内实验研究被引量:2
- 2010年
- 目的构建并筛选靶向人端粒酶逆转录酶基因的microRNA前体(pre-microRNA)质粒,通过体内实验验证该质粒对鼻咽癌CNE-2细胞生长的抑制作用。方法设计3对针对hTERT基因不同位点的pre-microRNA(茎环结构的前体)片段,构建携带此序列的真核表达质粒(pre-miR-hTERT1~3)并测序鉴定。脂质体法瞬时转染重组质粒到鼻咽癌CNE-2细胞,采用Real-timeRT-PCR筛选出对hTERT基因表达抑制作用最强的质粒;在稳定转染的CNE-2细胞中,用软琼脂集落形成实验和Westernblot进一步确认该质粒作用;在裸鼠体内实验中,观察肿瘤生长情况,并以免疫组化检测肿瘤中hTERT的表达。结果重组质粒经测序证实构建成功。与PBS组相比,3种质粒分别使hTERT基因mRNA水平下降77.3%、15.1%和9.5%;筛选的出pre-miR-hTERT1在稳定转染的CNE-2细胞中,使细胞hTERT蛋白下调、细胞集落形成能力下降;建立了人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,发现pre-miR-hTERT1对裸鼠移植瘤生长抑制率为64.8%,并且使肿瘤内hTERT表达下降。结论成功构建并筛选出靶向hTERT基因的pre-microRNA真核表达质粒,通过体外和体内实验证实,该质粒对鼻咽癌CNE-2细胞内的hTERT基因表达具有明显抑制作用,并且有效抑制了肿瘤的生长。
- 蔡鑫章危维赵素萍唐瑶云贺楚峰王承龙张俊毅
- 关键词:人端粒酶逆转录酶鼻咽癌RNA干扰MICRORNA
- 小干扰RNA抑制鼻咽癌细胞hTERT基因表达的实验研究被引量:9
- 2006年
- 目的 观察鼻咽癌细胞中的RNA干扰效应,确定hTERT基因RNA干扰的有效作用位点,探讨RNA干扰在鼻咽癌基因治疗中的应用前景。方法 利用体外合成法合成针对hTERT基因的小干扰RNA(siRNA)序列,脂质体转染鼻咽癌CNE-2细胞,逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymemse chain reaction,RT-PCR)检测转染细胞中hTERT基因的mRNA水平,Western Blot观察siRNA干扰后hTERT蛋白表达水平,噻唑蓝法检测siRNA对细胞生长抑制作用,流式细胞学检测siRNA诱导细胞凋亡的作用。结果 在siRNA转染CNE-2细胞后,hTERT的mRNA表达水平分别下调10%~70%,蛋白表达水平不同程度降低,细胞周期在G0~G1期受阻,并不同程度诱导细胞凋亡。结论 siRNA可在鼻咽癌中有效发挥RNA干扰效应,下调hTERT基因mRNA及蛋白表达水平,降低端粒酶活性,抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导其凋亡,为鼻咽癌基因治疗研究奠定了一定的基础。
- 贺楚峰赵素萍肖健云王承龙唐瑶云徐婧蔡鑫章
- 关键词:鼻咽癌HTERT基因CNE-2
- 诱导型一氧化氮合酶与环氧合酶-2在鼻咽癌中表达的初步研究被引量:6
- 2007年
- 诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)与环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的表达在许多肿瘤中一致上调,两者间呈正相关。在鼻咽癌(NPC)中两种酶的表达及作用,国内未见报道。国外仅有的1篇报道中提到COX-2的表达与iNOS无关。为此,笔者应用免疫组化法对这两种酶在NPC组织中的表达情况进行了初步研究,现报道如下。
- 刘阳云赵素萍刘庚勋李正贤孙正良江文
- 关键词:诱导型一氧化氮合酶环氧合酶-2鼻咽癌NITRIC免疫组化法INOS
- 诱导型一氧化氮合酶与环氧合酶-2在肿瘤组织中的共表达被引量:9
- 2007年
- 诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)均与肿瘤发生、生长、血管形成及转移有关。在正常生理条件下,两者在多数组织内均检测不到,但在受到各种病理因素的刺激后,两者均能被迅速诱导表达。在许多恶性肿瘤组织中,两者的表达一致上调,呈正相关,其联合表达与肿瘤的生物学行为密切相关。研究发现iNOS与COX-2有可能通过Wnt-β-catenin信号实现了信息交流和相互调控,并通过这种机制,共同在肿瘤的各种生物学行为中发挥作用。
- 刘阳云赵素萍
- 关键词:诱导型一氧化氮合酶环氧合酶-2肿瘤
- 鼻窦炎鼻内窥镜围手术期的中西医结合治疗临床分析被引量:1
- 2013年
- 目的:观察中西医结合疗法在鼻窦炎鼻内窥镜围手术期的临床疗效。方法:按随机数字表法将符合标准的108例患者分为观察组和对照组,观察组58例,对照组50例。对照组采用常规西医处理,观察组在对照组基础上加用鼻渊舒口服液治疗。结果:观察组术中出血量少于对照组,2组比较,出血量≤50 mL差异有显著性意义(P<0.05)。观察组痊愈30例,痊愈率51.72%,总有效率91.38%。对照组痊愈14例,痊愈率28.00%,总有效率78.00%。2组比较,痊愈率和总有效率差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:鼻窦炎鼻内窥镜围手术期采取中西医结合治疗疗效优于单纯西医治疗。
- 钟伦坤孙永东胡文健陈隆晖张学渊
- 关键词:鼻窦炎鼻内窥镜手术围手术期鼻渊舒口服液
- 诱导型一氧化氮合酶在指导晚期鼻咽癌治疗方案选择中的价值被引量:6
- 2007年
- 背景与目的:同期放化疗被认为是目前治疗晚期鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)的最佳方案,但对于同期放化疗对哪一类患者最有效,哪种化疗药物与放疗联合疗效最佳等问题尚没有一致的结论。有学者推荐将顺铂(cisplatin,DDP)同期放化疗方案作为治疗晚期NPC的标准方案。由于顺铂能增加诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达,使杀肿瘤的一氧化氮(NO)合成增加而抗瘤,因此我们考虑是否可以通过检测治疗前NPC组织中的iNOS的表达来对这种同期放化疗的疗效进行预测,并根据预测结果选择相应的治疗方案。本研究旨在探讨NPC肿瘤组织中诱导型iNOS的表达与DDP同期放化疗后鼻咽局部肿瘤全消与残留的关系,以便选择最合适的治疗方案,最大限度地提高鼻咽局部肿块全消率。方法:应用免疫组化法检测DDP同期放化疗后30例鼻咽局部肿块全消和30例鼻咽局部肿块残留的鼻咽部低分化鳞状细胞癌患者在接受治疗前的肿瘤组织中iNOS的蛋白表达情况。结果:iNOS阳性表达定位于NPC细胞的胞质和胞核内,且胞核染色比胞质更强。iNOS在NPC中总的阳性表达率为71.67%(43/60)。在30例肿块全消和30例肿块残留的NPC组织中,iNOS阳性表达率为分别为86.67%、53.33%,差异具有显著性(χ2=6.748,P=0.034)。两组间iNOS弱阳性及中等阳性表达差异无显著性,而强阳性表达全消组低于残留组,差异有显著性(χ2=4.246,P=0.039)。结论:治疗前检测iNOS在NPC组织中的表达,对预测DDP同期放化疗疗效有一定的价值,可根据其表达情况,选择相对合理的同期放化疗方案。
- 刘阳云赵素萍刘庚勋李正贤孙正良江文
- 关键词:诱导型一氧化氮合酶鼻咽癌同期放化疗顺铂