安徽高校省级自然科学研究基金(KJ2011A154)
- 作品数：2 被引量：79H指数：2
- 相关作者：马泰孙国平李家斌李媛媛仲飞更多>>
- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：安徽高校省级自然科学研究基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 细胞自噬的研究方法被引量：71
- 2012年
- 细胞自噬的研究是目前生物医学领域热点之一,广泛参与各种生理和病理过程.目前普遍采用的自噬检测方法包括电镜、免疫荧光、蛋白质印迹等方法检测自噬体及其标志蛋白.研究的深入对自噬的检测方法也提出了更高的要求,自噬功能障碍包括自噬体形成和降解障碍,因此,准确全面地评估自噬不仅包括自噬体的检测,还包括动态观察整个自噬性降解的过程是否顺畅(即自噬潮分析).另外,通过药物或基因干预技术来人为地调控自噬以观察其在体内体外模型中的作用也是自噬分析的重要内容.需要注意的是,任何一种方法单独应用均不能作为自噬的依据,对任何方法得到的结果进行解释时必须慎重,特别是不能将自噬体的增多减少或自噬相关蛋白表达的高低等同于自噬的增强或减弱.
- 马泰孙国平李家斌
- 关键词：细胞自噬自噬体
- 奥沙利铂诱导的人肝癌细胞株HepG2自噬潮增加及其对细胞生存率的影响被引量：8
- 2013年
- 目的:研究奥沙利铂(oxaliplatin,Oxa)对人肝癌HepG2细胞自噬功能的影响,并初步探讨自噬在Oxa诱导细胞死亡中的作用。方法:体外常规培养的人肝癌细胞HepG2,分别以Oxa单药和Oxa+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)或氯喹(chloroquine,CQ)联合作用后,采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测细胞活力的变化;透射电子显微镜下观察Oxa作用后HepG2细胞内自噬体的形成;蛋白印迹法检测自噬标志蛋白LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ的转变。结果:Oxa可引起HepG2细胞死亡并呈现出剂量依赖关系,当与3-MA或CQ联用时均能对HepG2细胞的生长产生明显的抑制作用;Oxa作用后可诱导HepG2细胞内自噬小体的形成,并出现自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达的增多,CQ抑制自噬降解通路后LC3-Ⅱ蛋白则明显增加(自噬潮增加);3-MA则可以抑制HepG2细胞自噬体的形成。结论:Oxa可以增强HepG2细胞的自噬功能,诱导自噬体形成增加;不同靶点的自噬抑制剂3-MA或CQ均可明显增加Oxa对肝癌细胞的生长抑制作用,增强Oxa的肿瘤杀伤作用。
- 李媛媛马泰仲飞范璐璐孙国平
- 关键词：肝肿瘤自噬奥沙利铂细胞增殖
