国家自然科学基金(20805024) 作品数:20 被引量:92 H指数:6 相关作者: 干宁 李天华 杨欣 王峰 郑磊 更多>> 相关机构: 宁波大学 宁波出入境检验检疫局 南方医科大学南方医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省自然科学基金 宁波市自然科学基金 更多>> 相关领域: 理学 自动化与计算机技术 化学工程 农业科学 更多>>
基于一维DNA组装磁性纳米探针的夹心型安培免疫传感器研究 被引量:4 2011年 采用Fe3O4/ZrO2(壳)纳米磁珠(zMPs)标记待测物识别抗体,并用HRP酶封闭和DNA链接,建立了一类新型的“珠链状”一维磁性纳米探针制备方法。将甲胎蛋白(AFP)一抗固定于纳米金修饰的玻碳电极表面,构建了免疫电极(GCElAFPAb。)。基于该电极和上述合成探针,通过双抗体夹心法测定免疫产物上HRP酶对过氧化脲(CP)氧化对苯二酚反应的催化电流,研制了一类基于一维纳米结构组装的夹心型安培免疫传感器。研究表明:此一维纳米结构探针不仅大大增加了酶在电极表面的富集量,成倍扩增了催化电流,显著提高了传感器的灵敏度,而且易于通过外磁场与背景液可控分离,简化了分析步骤,并提高了结果的重复性。此传感器对AFP检测的线性范围为0.01~25μg/L;检出限达4ng/L(3σ),并被用于人血清中痕量AFP的测定,结果满意。 巫远招 干宁 胡富陶 李天华 曹玉廷 郑磊关键词:脱氧核糖核酸 甲胎蛋白 小麦粉中过氧化苯甲酰现场测定的肌红蛋白凝胶膜生物传感器研究 被引量:5 2009年 基于肌红蛋白-硅酸铝(Mb-AlSiO4)凝胶膜修饰电极,制备了一种非媒介体型的过氧化苯甲酰(BPO)生物传感器,并用于小麦粉中BPO的直接快速检测。用扫描电子显微镜(SEM)、X-光电子能谱(XPS)和原子力显微镜(AFM)对AlSiO4凝胶修饰电极进行了表征。电极表面的Mb-AlSiO4凝胶膜有均匀的多孔结构,能长时间保持肌红蛋白活性。该传感器对BPO的电化学还原表现出良好的催化活性,BOP还原峰电流与其浓度在1×10^-6~4×10^-4mol/L的范围内有良好的线性关系,相关系数为0.997,检测限是5×10^-7mol/L。具有灵敏、稳定、易于制备的优点,适合于样品的现场快速测定,此技术平台可推广到粮油食品中其它添加剂的检测。 李榕生 王峰 干宁关键词:肌红蛋白 过氧化苯甲酰 生物传感器 基于包被包膜糖蛋白抗体纳米金磁性微粒的无试剂安培免疫传感器 被引量:1 2009年 在玻碳电极(GCE)表面固定对H2O2有催化还原活性的富马酸二甲酯联吡啶铜(GCE|CuL);再在GCE|CuL表面修饰一层金磁微粒-壳聚糖复合膜(nanoAu/Fe3O4/Chit),进而固定艾滋病毒(HIV)诊断标志物——包膜糖蛋白(gp160)抗体(antigp160),由此构建了一类快速检测gp160的无试剂安培免疫传感器。当该传感器在含gp160溶液中37℃下温育30min后,传感器表面生成的免疫复合物随gp160浓度的增大而增加,导致CuL对H2O2电催化还原效果降低,催化电流呈现下降趋势。在PBS溶液(pH7.0)和-300mV下,催化电流的降低值ΔIo与gp160浓度在1~400μg/L呈线性关系;检出限为0.5μg/L(3σ)。研制的免疫传感器检测gp160时,一步免疫反应即可得结果,较相同条件下包被gp160抗体的纳米金单分子层修饰电极灵敏度更高,检测范围更宽,有望用于艾滋病人血清标志物gp160快速筛测。 于宁 王鲁雁 李天华 郑磊 王峰关键词:纳米金 艾滋病毒 包膜糖蛋白 采用抗体包被金磁纳米微粒修饰电极的HIV p24/gp36安培联检芯片 被引量:5 2009年 研制了以聚碳酸酯为基底的双通道安培检测微流控免疫芯片,在其中分别集成了修饰有HIV核心抗原p24/gp36的单克隆一级抗体的纳米金修饰电极,并应用于人血清中p24和gp36抗原的同时分析.检测原理是:基于夹心免疫分析法,在电压驱动下,一次性加入含有p24和gp36样品及HRP酶标记的p24和gp36二级抗体溶液,与电极表面的一级抗体生成夹心免疫复合物;接着在体系中加入H2O2,以方波溶出伏安法检测免疫复合物上HRP催化H2O2的还原电流.在pH为6.2的磷酸缓冲液中,对HIV p24和gp36的检测时间均少于2 min,线性范围为0.5-400μg/L,检测限为0.25μg/L.该芯片集成了加样、分离和检测系统,检测时间短,灵敏度明显高于传统的酶联免疫吸附分析法,可应用于对艾滋病的早期诊断和大范围筛查. 干宁 李榕生 陈亚东 杨欣 李天华关键词:方波溶出伏安法 小麦粉中黄曲霉毒素B1现场检测用纳米修饰传感器 被引量:4 2009年 在印刷电极表面涂覆一层壳聚糖(Chit)膜,在膜上同时固定四羧基酞菁铁(Ⅲ)(FePc)和HRP酶标黄曲霉毒素B1抗体(HRP-Ab-AFB1)包被纳米金,制备了可用于小麦粉中黄曲霉素B1(AFB1)快速检测的新型安培免疫传感器(SPCE|Chit/FePc/Au/HRP-Ab-AFB1)。FePc对H2O2的还原具有催化作用,可作为HRP酶与电极之间电子传递媒介体。当该传感器在含AFB1样品的30℃溶液中温育8 min后,AFB1与Ab-AFB1的免疫结合导致HRP的活性中心与FePc之间的电子传递被部分阻碍,使HRP对H2O2电催化氧化电流Io降低。ΔIo与AFB1浓度在1.0-200μg/L成线性关系,标准样品的组内和组间变异系数〈3.5%;回收率97%-104%,检测限为0.3μg/L。该传感器检测AFB1温育时间短,一步测定免分离,为小麦粉中的AFB1现场分析提供了新技术。 干宁 谢东华 李榕生 李天华 闻伟刚关键词:黄曲霉毒素B1 小麦粉 基于复合纳米微粒修饰和磁性分离富集的一次性有机磷农药酶传感器 被引量:19 2009年 在Fe3O4/Au微粒上固定乙酰胆碱酯酶(AChE),制得磁性复合粒子Fe3O4/Au/AChE。通过磁力将其吸附于涂覆了碳纳米管(CNTs)/纳米ZrO2/普鲁士蓝(PB)/Nation(Nf)复合膜的丝网印刷碳电极(SPCEs)表面,制得一次性有机磷农药(OPs)酶传感器。采用扫描电镜(SEM)、X射线荧光光谱(XRFS)表征传感器的制备过程,采用循环伏安法(CV)和示差脉冲伏安法(DPV)研究了传感器的电化学性质。利用OPs对AChE的抑制作用,以硫代乙酰胆碱(ATCh)为底物,对乐果进行了检测。在pH=7.5的0.1mol/L硝酸钾溶液中,乐果浓度的对数与酶电极的抑制率(A)在1.0×10^-6~1.0×10^-2mg/L间呈良好的线性关系,检测限为5.6×10~mg/L,用于实际样品白菜检测时的添加回收率在88%~105%之间,与气相色谱法(GC)所得结果一致。该传感器采用复合纳米粒子修饰电极表面,具有较高的比表面活性,响应迅速,检测限低;ZrO2可特异性地富集样品中的OPs,磁性纳米颗粒包被AChE可实现磁场分离和电极表面更新,且具有高灵敏度、低样品量、一次使用可抛弃、便携式等特点,可用于蔬菜等农产品中痕量OPs的快速、简便、准确检测。 杨欣 巫远招 谢东华 闻伟刚 干宁关键词:碳纳米管 纳米ZRO2 乙酰胆碱酯酶 有机磷农药 基于磁性碳纳米管修饰印刷电极的无酶型HIV p24安培免疫传感器 被引量:5 2010年 在多壁碳纳米管(MWNTs)表面固定Fe3O4(核)/Au(壳)纳米微粒(GMP),使其具有超顺磁性,包被p24抗体(anti p24),制得检测探针(MWNTs-GMP/anti p24);在磁场作用下将此探针吸附于N,N'-双(2-羟基苯亚甲基)邻苯二胺合铜(CuRb)修饰的碳基丝网印刷电极(SPCE|CuRb)表面,制得了免疫传感电极(SPCE|CuRb/MWNTs-GMP/anti p24)。当此电极在含p24样本中于室温下温育15min后,随p24浓度的增加在电极表面生成的免疫复合物增加,导致CuRb对H2O2的催化还原电流下降。在含5mmol/L H2O2的PBS(pH7.0)中和-300mV下,催化还原电流降低值ΔIo与p24浓度在0.6~160μg/L呈线性关系;检出限为0.32μg/L(3σ)。将其用于实际样品检测,结果与标准EILSA方法一致。由于MWNTs-GMP/anti p24具有超顺磁性,并可以显著提高电极比表面积及anti p24负载量,而CuRb代替易失活的HRP酶,使得该传感器灵敏度和稳定性俱佳,电极表面可更新,可用于艾滋病人血清中p24筛测。 干宁 罗乃兴 李天华 郑磊 倪敏君关键词:碳纳米管 铜铁试剂萃取流动注射-氢化物发生原子吸收光谱法测定纯铜中微量锡 被引量:2 2008年 建立了铜铁试剂萃取流动注射-氢化物发生原子吸收光谱法测定纯铜中微量锡的方法。利用铜铁试剂萃取实现了铜与锡的有效分离,样品液中锡与NaBH4生成氢化物,而后经由密闭的流动系统传送至原子化器中,采用原子吸收光谱法加以检测。试验了铜铁试剂的最佳萃取条件,选择锡的测定波长为286.3nm。该方法的检出限为0.25ng/mL,测定锡的线性范围为1.0~13.0ng/mL。方法应用于铜有证参考样品中锡的测定,结果与认定值基本相符,加标回收率为90.0%~97.0%,相对标准偏差为3.2%。 干宁 杨欣 王峰 李天华 徐伟民关键词:铜铁试剂 新型氟代三苯胺衍生物的合成和光谱特性研究 被引量:3 2011年 设计和合成了一种新型氟代三苯胺衍生物——N,N,N′,N′-四苯基-[2′,2″,3′,3″,5′,5″,6′,6″-八氟对四联苯]-4,4″′-二胺(OFTPA)。通过元素分析、熔点测定、红外光谱和1 H NMR谱等手段对OFTPA的分子结构进行了表征,并对其主要的红外光谱吸收峰和1 H NMR谱带进行了归属分析。利用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱和循环伏安法(CV)对OFTPA的电子能级结构和发光性能进行了研究。紫外-可见吸收光谱测定结果表明,OFTPA薄膜的最大吸收峰波长为355nm,光学带隙(Eg)为3.09eV。荧光光谱测定结果表明,OFTPA薄膜在365nm紫外光的激发下,产生发光峰波长在448nm附近、半峰宽(FWHM)为68nm的蓝光发射,色纯度高,有望成为优良的蓝光发射材料。循环伏安法测定结果表明,OFTPA的最高占有轨道(HOMO)能级为-5.41eV,最低空轨道(LUMO)能级为-2.32eV,具有良好的空穴传输性能。研究结果为进一步研究其在有机光电器件中的应用提供了参考。 徐清 熊威 王清琪 干宁关键词:三苯胺 光谱 基于纳米磁珠修饰印刷电极的牛奶中三聚氰胺检测安培免疫传感器 被引量:18 2009年 共固定氯代邻菲啰啉双核铜配合物(Cu2(phen)2Cl2(μ-Cl)2,简称Cu2L)和包被三聚氰胺抗体(antiMA)的Fe3O4/Au胶(简称纳米磁珠)于丝网印刷电极(SPCE)表面,构建了一种测定牛奶中三聚氰胺(简称MA)含量的安培免疫传感器。当该传感器在含MA溶液中温育时,MA和同时加入的HRP标MA二抗(HRP-antiMAII),与电极表面的antiMA形成三元免疫复合物。该复合物上的HRP能催化H2O2还原,并经过Cu2L传导在电极表面形成电流,电流强度I与MA浓度在0.5~40和60~100ng/mL范围内呈线性关系,检测限为0.25ng/mL。在pH6.2的PBS底液中,该传感器制作简单、可抛弃,对MA检测时间小于20min,灵敏度为1μA.ng-1mL,明显高于酶联免疫吸附(ELISA)法;可实现牛奶中MA免分离现场分析。 干宁 王峰 王鲁雁 李天华 杨欣关键词:电化学免疫传感器