国家自然科学基金(30371526)
- 作品数：23 被引量：48H指数：5
- 相关作者：褚汉启崔永华黄孝文吴振恭熊浩更多>>
- 相关机构：华中科技大学北京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 耳蜗KCNQ1基因表达及其与耳聋的关系被引量：1
- 2006年
- 吴振恭褚汉启
- 关键词：KCNQ1基因基因表达耳聋耳蜗CORTI器
- 小鼠耳蜗侧壁α_2 Na,K-ATPase在听觉及年龄相关性听力下降中的作用被引量：2
- 2006年
- 目的探讨耳蜗侧壁α2Na,K-ATPase通道在听觉功能和年龄相关性听力减退中的作用。方法利用半拷贝基因的α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠作为试验平台,采用听性脑干反应(ABR)和耳蜗内电位(endoco-chlear potential,EP)检测方法,对α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠和α2Na,K-ATPase+/+野生型小鼠进行ABR和EP检测,并对各个鼠龄段的小鼠进行ABR检测。结果α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠的听力和EP值均低于α2Na,K-ATPase+/+野生型鼠;α2Na,K-ATPase+/-杂合子小鼠的听力随鼠龄增长而逐渐下降,高龄期小鼠的ABR阈值与其低龄时相比显著性升高(P<0.05)。结论耳蜗侧壁的α2Na,K-ATPase通道对听觉功能具有重要作用;携带半拷贝基因的αNa,K-ATPase+/-杂合子小鼠表现出轻度年龄相关性听力减退。
- 褚汉启黄孝文熊浩韩芳吴振恭周良强崔永华
- 关键词：耳蜗离子通道老年性聋
- 毛细胞PMCA2在小鼠内耳Ca^(2+)调节和听觉平衡中的作用被引量：1
- 2007年
- 目的:研究小鼠内耳毛细胞细胞膜Ca2+-ATP酶2型蛋白(PMCA2)在听觉平衡生理中的作用及意义。方法:利用不同基因型小鼠PMCA2-/-(突变纯合子)、PMCA2+/-(杂合子)和PMCA2+/+(野生型)为实验对象,采用听觉脑干反应(ABR)、畸变产物耳声发射(DPOAE)和耳蜗内电位(EP)检测等方法,分别检测不同基因型小鼠的内耳生理功能。结果:PMCA2+/+野生型鼠的听力正常,ABR的短声(click)阈值为(13.75±11.08)dB SPL;EP均值为(91.3±11.0)mV。PMCA2+/-杂合子小鼠听力低于同窝PMCA2+/+野生型鼠,ABR的短声阈值为(63.89±12.90)dB SPL,与PMCA2+/+小鼠比较差异显著(P<0.01);PMCA2+/-小鼠没有检测出DPOAE的高频区辐值,其EP均值为(80.7±9.0)mV。PMCA2-/-小鼠的ABR在100dB SPL无反应,表现出全聋和平衡功能失调,其EP均值为(56.6±13.0)mV;PMCA2-/-小鼠没有检测出DPOAEs。结论:PMCA2是内耳毛细胞纤毛丛上的重要Ca2+转运通道,对维持内耳的Ca2+代谢和听觉平衡功能有重要作用。
- 褚汉启周小琴周良强黄孝文甄宏韬黄红彦崔永华
- 关键词：迷路钙通道毛细胞
- 耳蜗血管纹钾钠氯化合物协同转运子对年龄相关性听力下降的影响被引量：2
- 2007年
- 目的 观察具有年龄相关性听力下降（age-related hearing loss，AHL）特点的不同周龄C57BL／6J鼠和钾钠氯化合物协同联合转运子-1（Na-K-2Cl cotransporter-1，NKCC1）基因敲除鼠年龄相关性听力改变与耳蜗血管纹NKCC1表达的情况，并检测不同龄的NKCC1^＋/-杂合子小鼠耳蜗NKCC1蛋白表达及耳蜗扫描电镜形态变化，研究血管纹NKCC1在老年性聋发病中的作用。方法 应用听性脑于反应（ABR）分别检测4、8、16、32、48、60周龄组C57BL／6J小鼠和两种基因型NKCC1小鼠的听力，采用免疫组化法观察其血管纹NKCC1表达的变化，同时采用免疫印迹杂交（Western Blot）检测不同周龄小鼠耳蜗的NKCC1蛋白的含量，扫描电镜观察不同周龄小鼠的耳蜗基底膜结构。结果 C57BL／6J小鼠随鼠龄增加而出现听力下降，自16周龄时ABR阈值出现显著性增高（P〈0．05）；血管纹NKCC1蛋白表达也呈现随鼠龄增加而逐步减低，其灰度值自16周龄时显著增高（P〈0．01）。NKCC1^＋/-杂合子鼠的听力随鼠龄增长而逐渐下降，老龄小鼠的ABR阈值与其低龄时相比，阈值显著性升高（P〈0．05）。老龄小鼠的耳蜗NKCC1蛋白含量低于低龄小鼠，老龄NKCC1^＋／-小鼠的耳蜗底回外毛细胞（OHC）出现散在性点状缺失。结论 AHL小鼠血管纹NKCC1蛋白表达随年龄增长而减少，显示与AHL相关，老年性聋的发病可能与血管纹NKCC1通道蛋白的遗传特性及功能有关。
- 褚汉启熊浩崔永华黄孝文韩方吴振恭周良强孔维佳
- 关键词：耳蜗老年性聋
- NaKCC1基因缺陷小鼠的内耳组织形态学研究
- 2006年
- Na-K-2C1联合转运子-1（Na-K-2Cl cotransporter-1，NKCC1）是动物细胞中广泛分布的一类膜转运蛋白，其作用是将Na^＋、K^＋、Cl-按1：1：2的比例呈电中性跨膜转运。听觉信号的传导依赖于内耳的离子传递，而NKCCl被认为是由耳蜗血管纹的边缘细胞转运分泌K^＋的主要转运蛋白，NKCCl对维持耳蜗内淋巴的高K^＋状态和内耳的K^＋循环起着重要作用。NKCCl的缺乏不仅可以导致内淋巴高K^＋环境的改变，同时也可能导致内耳发育障碍和组织畸形，因此，NKCCl对内耳发育也起重要作用。NKCCl基因敲除小鼠（NKCCl^-/-，纯合子）和NKCCl基因半拷贝小鼠（NKCCl^＋/-，杂合子）均为NKCCl基因缺陷小鼠，是目前研究离子通道病的重要模型，由于各个NKCCl基因型小鼠的基因不同程度的缺陷而可能对内耳组织发育造成不同的影响。本研究利用NKCCl的基因缺陷小鼠模型，对其内耳组织形态进行比较分析，探讨NKCCl基因不同类型和程度的缺陷对小鼠内耳形态发育影响。
- 褚汉启
- 关键词：基因缺陷内耳发育膜转运蛋白耳蜗血管纹离子通道病
- 小鼠耳蜗血管纹Na-K-2Cl联合转运子1在顺铂耳毒性发生时的改变
- 2007年
- 目的研究顺铂(cis-dichlorodiammine platinum,Cisplatin)耳毒性发生后耳蜗血管纹Na-K-2Cl联合转运子1(NKCC1)的表达情况,并初步探讨其机制。方法选取健康CBA/CaJ小鼠20只,随机分为对照组和实验组各10只,实验组动物连续腹腔注射顺铂3.5mg.kg-1.d-1,建立顺铂耳毒性小鼠模型,对照组注射等量生理盐水。以听性脑干反应(ABR)阈值作为评价听功能的指标,检测给药前后小鼠听功能的改变,并采用免疫组织化学(SP法)结合免疫荧光实验技术,观察对照组和实验组小鼠腹腔注射顺铂前后耳蜗血管纹NKCC1表达的变化。结果NKCC1在小鼠耳蜗血管纹主要表达于边缘细胞,而顺铂作用后血管纹边缘细胞的NKCC1表达明显减弱,图像分析显示两组平均灰度值差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论小鼠顺铂耳毒性作用后血管纹边缘细胞NKCC1的表达量明显减弱,这可能是顺铂耳毒性发生机制中的一个重要环节。
- 吴振恭褚汉启黄孝文崔永华
- 关键词：耳蜗顺铂小鼠
- C57BL/6J小鼠耳蜗血管纹Na-K-2Cl联合转运子-1的年龄相关性变化被引量：7
- 2006年
- 目的观察不同周龄C57BL/6J(C57)小鼠听力及血管纹Na-K-2Cl联合转运子-1(Na-K-2Cl co-transporter-1,NKCC1)表达的情况。方法应用听性脑干反应(auditory brainstemresponse,ABR)分别检测4、8、16、32、48、64周龄组C57小鼠的听力;采用免疫组织化学染色法观察其血管纹NKCC1表达的变化。结果C57小鼠随年龄增大出现听力下降,自16周龄时ABR阈值出现显著性增高(P<0.05);血管纹NKCC1表达也出现年龄相关性减少,其灰度值自16周龄时显著增高(P<0.01)。结论C57小鼠血管纹NKCC1蛋白表达随年龄增长而减少,可能与年龄相关性听力损失具有一定相关性。
- 熊浩褚汉启韩芳吴振恭黄孝文张平崔永华
- 关键词：听性脑干反应年龄相关性听力损失
- 编码Na-K-2Cl的基因缺陷小鼠出现听觉和平衡功能障碍及内耳形态异常被引量：1
- 2007年
- 目的:培育突变型纯合子NKCC1-/-、杂合子NKCC1+/-及野生型NKCC1+/+小鼠,将这3种基因型小鼠作为实验平台,研究NKCC1离子通道(Na-K-2Cl,co-transporter)在耳蜗听觉平衡功能中的作用,并观察不同基因型小鼠的内耳形态特征。方法:利用同窝生各个基因型小鼠NKCC1-/-(突变纯合子)、NKCC1+/-(杂合子)和NKCC1+/+(野生型)为实验对象,采用听觉脑干反应(ABR)和耳蜗内电位(EP)检测技术,对各基因型小鼠的听觉功能和EP进行检测;同时利用光学显微镜观察不同基因型小鼠的内耳形态变化。结果:NKCC1+/+野生型小鼠听力正常,ABR检测的click短音阈值为[(23.13±3.78)dB,SPL];EP为(98±16)mV。NKCC1+/-杂合子小鼠听力低于同窝生的NKCC1+/+野生型小鼠,ABR检测其Click短音阈值为[(38.49±12.29)dB,SPL],EP为(78±7)mV。NKCC1+/+和NKCC1+/-小鼠ABR的阈值均值在各个频率的差异显著(P<0.01);两者EP的均值差异也显著(P<0.05)。NKCC1-/-突变型纯合子小鼠呈现全聋,ABR各个频率在100dB均无反应,其EP接近消失(4mV±6mV)。NKCC1-/-突变型纯合子小鼠表现出听觉功能丧失和旋转为主的平衡失调。光镜下NKCC1+/+野生型小鼠和NKCC1+/-杂合子小鼠的耳蜗解剖结构无明显异常;NKCC1-/-突变纯合子小鼠的耳蜗出现前庭膜塌陷、内淋巴腔缩小而致中阶完全消失,并有血管纹萎缩、Corti器缺失、螺旋神经节萎缩;且球囊和椭圆囊膜迷路失去正常结构并出现塌陷等病理改变。结论:NKCC1离子通道在内耳K+循环和维系内耳正常听觉平衡功能中起重要作用。NKCC1通道的缺失或功能受限,均可导致耳蜗内淋巴K+负荷水平,进而影响耳蜗的听觉平衡功能。
- 褚汉启熊浩韩芳吴振恭黄孝文崔永华
- 关键词：NKCC1基因敲除耳蜗耳蜗内电位
- 半拷贝基因NKCC1杂合小鼠与年龄相关性听力下降的关系被引量：4
- 2006年
- 目的培育杂合子NKCCl+／-和野生型NKCCl+／+小鼠,观察携带不同拷贝基因的NKCCl小鼠的年龄相关性听力表现,研究NKCCl基因及其离子通道在年龄相关性听力下降(age- related hearing loss,AHL)中的作用,并初步探讨其可能发生的机制。方法运用NKCCl+／-杂合子小鼠和NKCCl+／+野生型小鼠为平台,于小鼠生长过程中的各个年龄段分别检测小鼠的听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)和耳蜗内电位(endocochlear potential,EP);同时采用扫描电镜进行耳蜗形态学观察和免疫印迹杂交检测不同鼠龄小鼠耳蜗的NKCCl通道蛋白的含量。结果NKCCl+／-杂合子小鼠与NKCCl+／+野生型小鼠相比较,其ABR检测短声阈值在每一年龄组的各测试频率均升高,各年龄组相比较差异有统计学意义(P值均<0．05)。NKCCl+／-杂合子半拷贝基因鼠的听力随年龄增长而逐渐下降,与低龄鼠相比,老龄鼠的ABR阈值显著性升高(P值均< 0．05)。NKCCl+／-小鼠的EP也随年龄增长而呈下降趋势,老龄小鼠的EP值与其低龄鼠相比明显降低(P<0．05)。老龄小鼠的耳蜗NKCCl蛋白含量低于低龄鼠。与老龄NKCCl+／+鼠相比较,老龄NKCCI+／-鼠的耳蜗底回外毛细胞出现散在的点状缺失。结论当NKCCl基因呈现半拷贝复制时小鼠可呈现AHL,NKCCl基因可能在AHL的发病中起一定的作用。AHL的发病可能与NKCCl通道蛋白的遗传特性及功能有关,还可能与NKCCl+／-鼠出现的耳蜗底回外毛细胞缺失有关。
- 褚汉启熊浩韩芳吴振恭黄孝文崔永华
- 关键词：离子通道年龄因素膜蛋白质类
- ABR和DPOAE检测研究NKCC1在不同基因型小鼠耳蜗听觉中的作用被引量：5
- 2008年
- 目的应用听性脑干反应(ABR)和畸变产物耳声发射(DPOAE)技术检测不同基因型NKCC1小鼠的听觉功能,研究NKCC1在耳蜗听觉功能中的作用。方法利用ABR和DPOAE实验检测不同基因型NKCC1小鼠的听觉功能。结果NKCC1+/+野生型小鼠听力正常,ABR检测的短声(click)阈值为(23.13±3.78)dBSPL;NKCC1+/-杂合子小鼠听力低于NKCC1+/+野生型小鼠,其短声阈值为(38.49±12.29)dBSPL。NKCC1+/+和NKCC1+/-小鼠ABR的阈值均值在各个频率的差异有极显著性意义(均P<0.01);NKCC1-/-突变纯合子鼠的ABR的各个频率在100dB均无反应,呈现全聋。与NKCC1+/+小鼠比较,NKCC1-/-小鼠没有DPOAE的检出。结论耳蜗NKCC1在小鼠的听觉生理中有重要作用,NKCC1缺失或是功能受限均可影响耳蜗的听觉功能。
- 褚汉启周良强王春芳黄孝文黄红彦崔永华孔维佳
- 关键词：NKCC1听性脑干反应畸变产物耳声发射
