重庆市卫生局科研项目(99-1003)
- 作品数:1 被引量:6H指数:1
- 相关作者:陈雅棠王昌源唐霓李文桂张洪花更多>>
- 相关机构:重庆医科大学青岛市疾病预防控制中心山东大学更多>>
- 发文基金:重庆市卫生局科研项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 多房棘球绦虫ELP抗原在大肠埃希菌中的表达及其在免疫诊断中的初步应用被引量:6
- 2006年
- 目的实现多房棘球绦虫ELP蛋白在大肠埃希菌中的表达,制备高纯度、高特异性的重组抗原,为多房棘球绦虫感染的流行病学调查和临床诊断提供新的工具。方法在建立了多房棘球绦虫elp基因克隆的基础上,应用亚克隆方法将目的基因插入原核非融合表达载体pQE30(+)。经酶切鉴定,转化于大肠埃希菌,以IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE及Westernblot进行鉴定。亲和层析纯化ELP蛋白,用于ELISA检测患者血清特异性抗体。结果酶切鉴定、SDS-PAGE及Westernblot分析证实,成功地构建了pQ-ELP原核非融合表达载体,该载体转化大肠埃希菌在IPTG诱导下能高效表达ELP蛋白。ELP重组抗原用于ELISA检测18份包虫病人血清均阳性,10份华支睾吸虫病、27份乙肝病毒感染者和10份健康人血清均为阴性。结论多房棘球绦虫ELP抗原在大肠埃希菌中得到了高效非融合表达,初步实验结果显示该重组蛋白对包虫病具有较高的诊断价值。
- 王昌源张洪花陈雅棠李文桂唐霓
- 关键词:多房棘球绦虫非融合表达免疫诊断