国家自然科学基金(30471715)
- 作品数：27 被引量：105H指数：5
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- 相关机构：华中科技大学郑州大学第一附属医院河南省人民医院更多>>
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- NBD多肽对小鼠树突状细胞成熟状态的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察NBD多肽对脂多糖(LPS)刺激的小鼠骨髓源性树突状细胞(DC)生物学活性的影响。方法培养小鼠骨髓源性DC,分为对照组、LPS组及NBD组,对照组不予任何处理,LPS组加入终质量浓度为1 mg/L的LPS,NBD组于加入NBD50μmol/ml,4 h后给予1 mg/L LPS刺激,继续培养3 d。流式细胞术检测DC细胞表面CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子的变化,ELISA法检测各组DC分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-12(IL-12)的浓度,混合淋巴细胞培养检测T细胞增殖能力,免疫细胞化学及Western blot检测DC核因子-kB(NF-kB)的表达。结果LPS可促进DC高表达CD80、CD86及MHC-Ⅱ分子,促进Th1型细胞因子释放、NF-kB高表达并易位于核内,并诱导T细胞增殖,NBD多肽可阻断LPS的这些效应。结论NBD多肽可抑制DC成熟,增强同种未成熟DC的免疫耐受诱导作用,为进一步研究DC的临床应用奠定了基础。
- 苏刚孙宗全陈家军董念国刘超邓勇志王国华
- 关键词：树突状细胞多肽NF-KB脂多糖
- 改良“Cuff”技术联合缝合法建立小鼠颈部异位心脏移植模型被引量：1
- 2007年
- 目的探讨改良“Cuff”技术联合缝合法用于建立小鼠颈部异位心脏移植模型的可行性。方法供心头臂干与受体颈总脉采用端—端吻合法吻合,供心肺动脉与受体颈外静脉采用改良“Cuff”技术（“袖套法”血管吻合术）吻合,进行小鼠颈部异位心脏移植40次。结果供心术中缺血时间30-35 min,复跳率100%,小鼠7 d存活率97.50%。结论改良“Cuff”技术联合缝合法用于建立小鼠颈部异位心脏移植模型方法,简单实用,便于单人操作,小鼠存活率高。
- 苏刚孙宗全陈家军董念国刘超邓勇志王国华
- 关键词：心脏移植术血管吻合术小鼠
- NBD多肽预处理的树突状细胞延长移植心存活时间的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨NBD多肽预处理的供体源性树突状细胞(DC)在诱导心脏移植免疫耐受中的作用及可能机制。方法体外培养供体源性BALB/c小鼠骨髓树突状细胞并以NBD多肽预处理(NBD多肽-DC,在小鼠心脏移植前7 d,将NBD多肽-DC输至受者C57BL/6小鼠体内。应用Cu-T建立小鼠颈部异位心脏移植模型,观察心脏移植物存活时间,病理分析检测排斥反应程度,混合淋巴细胞反应(MLR)测定受者脾脏T细胞对供者同种抗原的反应性,并用ELISA方法测定受者血清Th1型细胞因子(IFN-γ和IL-12)和Th2型细胞因子(IL-4和IL-10)水平的变化。结果NBD多肽-DC可使移植心脏存活天数延长至(21.83±3.54)d,较PBS对照组的(6.66±1.21)d明显延长(P<0.01),降低排斥反应病理分级(Stanford 1～2级),能诱导受者脾脏T细胞的抗原特异性低反应性,使受者小鼠血清INF-γ和IL-12水平显著降低(P<0.01),而IL-4和IL-10水平明显升高(P<0.01)。结论NBD多肽预处理的供体源性DC能够诱导针对移植供者产生的特异性免疫耐受现象,其机制可能与诱导受者T细胞的抗原特异性低反应性及Th1/Th2免疫偏移有关。
- 苏刚赵文增陈家军徐静乔晨晖刘超孙宗全
- 关键词：NBD多肽心脏移植排斥反应
- 缺氧／复氧对小鼠骨髓树突状细胞表型及生物学活性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨缺氧／复氧对小鼠骨髓树突状细胞（DC）表型及生物学活性的影响。方法培养小鼠骨髓源性DC，分为对照组及缺氧／复氧组，对照组在正常培养条件下培养，缺氧／复氧组给予缺氧气体培养4h，然后在正常培养条件下继续培养1d。应用流式细胞仪检测DC表面CD80、CD86、MHCⅡ分子的变化，ELISA法检测DC分泌TNF-α、IFN-γ和IL-12的浓度，混合淋巴细胞培养检测T细胞增殖能力，免疫细胞化学检测DC核因子-κB（NF—κB）的表达。结果缺氧／复氧可促进DC高表达CD80、CD86、MHCⅡ分子，促进Th1型细胞因子释放、NF—κB高表达及核移位，并诱导T细胞增殖。结论缺氧／复氧可刺激DC高表达表面分子，具有明显的免疫刺激活性。
- 陈家军吴宏妍孙宗全胡桂清吴平肖跃勤张合玲
- 关键词：树突状细胞缺血-再灌注损伤
- 体外循环术后患者Toll样受体变化及其意义被引量：2
- 2006年
- 全身炎症反应综合症（SIRS）是体外循环术后常见及严重的并发症，单核细胞在CPB早期即参与了其中的炎症反应。本研究旨在观察体外循环（CPB）围术期外周血单核细胞TLR4和CD14的变化规律。寻求新的抗炎途径。
- 陈新忠孙宗全杜心灵向道康刘超刘金平陈家军
- 关键词：体外循环术后TOLL样受体术后患者全身炎症反应综合症外周血单核细胞CD14
- 负载滋养层细胞抗原对小鼠树突状细胞表型及功能的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究负载滋养层细胞抗原对小鼠髓源性树突状细胞(DC)分化成熟过程的影响,获得致耐受性DC。方法体外使用粒细胞巨细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导小鼠骨髓细胞定向分化、经LPS刺激获得成熟DC;通过外胎盘锥组织块培养法获得滋养层细胞,制备可溶性抗原,加入DC培养体系。流式细胞术检测DC表面共刺激分子及MHC-Ⅱ的表达,ELISA法检测DC分泌IL-10和IL-12的浓度,混合淋巴细胞培养评估DC刺激同种T细胞增殖、活化的功能。结果成熟DC表型为CD40highCD80highCD86highMHC-Ⅱhigh,分泌大量的IL-12和极少量的IL-10,体外能有效刺激T细胞的增殖;负载滋养层细胞抗原的DC表型为CD40midCD80lowCD86lowMHC-Ⅱlow,在分泌大量IL-12的同时IL-10也明显升高,不能有效刺激T细胞增殖,并使T细胞分泌细胞因子呈现明显Th2偏倚。结论负载滋养层细胞抗原后的DC表面共刺激分子及MHC-Ⅱ表达降低,刺激T细胞增殖能力下降;其自分泌和促使T细胞旁分泌的细胞因子呈现Th2偏倚,是一种耐受性DC。
- 刘超孙宗全陈家军苏刚史嘉玮刘金平邓勇志
- 关键词：树突状细胞滋养层细胞共刺激分子
- 体外培养的未成熟树突状细胞对延长小鼠同种异体移植心存活时间的影响被引量：2
- 2005年
- 目的观察术前输注用低剂量粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)培养的小鼠骨髓源性未成熟树突状细胞(DC)对小鼠同种异体移植心存活时间的影响。方法分别用常规剂量和低剂量GM-CSF培养小鼠骨髓源性成熟DC和未成熟DC,采用流式细胞术检测细胞表型,比较其在体外刺激同种异体T细胞增殖的能力,并将培养的未成熟DC约1.0×106个于术前7d输注受者体内,观察同种异体移植心存活的时间。结果与常规剂量GM-CSF下培养出的成熟DC不同,低剂量GM-CSF培养出的DC为较单纯的未成熟DC,表型为CD11c+,CD80-,CD86-,MHCⅡlow,在体外不能有效刺激同种异体T细胞活化增殖,将其于术前输注受者体内,移植心的存活时间由6.3±1.2d延长至14.3±1.9d(P<0.01)。结论用低剂量GM-CSF可培养出表型和功能均未成熟的小鼠骨髓源性DC,将其在术前7d输注受者体内,可明显延长移植心的存活时间。
- 冯剑锷孙宗全高开柱史嘉玮
- 关键词：树突状细胞粒细胞巨噬细胞集落刺激因子免疫耐受
- “袖套”法小鼠颈部异位心脏移植模型的改进被引量：8
- 2006年
- 目的探讨小鼠颈部异位心脏移植模型的建立和手术方法的改进。方法采用“袖套”法血管吻合术(cuff技术),进行50次小鼠颈部异位心脏移植。结果该方法使供心术中缺血时间<30 min,7 d存活率可达到94.00%。结论改进后的模型简单实用,便于单人操作,提高了小鼠颈部心脏移植存活率,效果满意,值得推广。
- 苏刚孙宗全董念国陈家军刘超高开柱
- 关键词：小鼠
- 单核细胞Toll样受体4可能介导热休克蛋白70信号的转导被引量：24
- 2005年
- 目的寻找Toll样受体4(TLR4)新的配体,探讨热休克蛋白70(HSP70)与TLR4的相互关系。方法收集人单核细胞体外培养,加入终浓度5 0μg/mlHSP70,分别于加入后0、30、60、120min中止刺激,免疫组化检测核因子κB(NF κB);加入不同浓度TLR4阻断剂孵育后,予HSP70刺激, 120min后检测NF κB。用流式细胞术检测HSP70刺激后单核细胞膜TLR4受体数目的变化。同时用ELISA法检测加不同浓度TLR4阻断剂后上清液肿瘤坏死因子α(TNF α)的浓度。结果HSP70可刺激单核细胞NF κB核移位,TLR4阻断剂可阻断HSP70这一效应。HSP70的刺激可导致单核细胞膜TLR4受体数目显著下调。HSP70刺激单核细胞引起上清液TNF α浓度增加,加入TLR4阻断剂可显著降低TNF α浓度。结论HSP70可通过细胞膜TLR4转导信号,是TLR4的内源性配体。
- 陈新忠孙宗全杜心灵柳祎吴龙刘超陈家军
- 关键词：单核细胞转导TOLL样受体4介导
- 重组HSP60蛋白体外对小鼠骨髓树突状细胞功能的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:观察重组热休克蛋白60(HSP60)对小鼠骨髓树突状细胞(DC)功能的影响,探讨其可能的作用机制。方法:培养小鼠骨髓源性DC,分为对照组及HSP60组,对照组在正常条件下培养,HSP60组加入终浓度为10μg/ml的HSP60。流式细胞术检测DC细胞表面CD80、CD86、MHCⅡ分子、CD14及TLR4的变化,ELISA法检测DC分泌TNF-α、IFN-γ和IL-12的浓度,免疫细胞化学检测DC MyD88、核因子-κB(NF-κB)的表达,混合淋巴细胞培养检测T细胞增殖能力。结果:HSP60可促进DC高表达CD80、CD86、MHCⅡ分子、CD14及TLR4,促进Th1型细胞因子TNF-α、IFN-γ及IL-12释放、MyD88高表达及NF-κB核移位,并诱导T细胞增殖。结论:HSP60可促进DC成熟,其作用机制可能与激活了TLR4信号通路有关。
- 吴宏妍陈家军孙宗全贺斌张增旺吴平
- 关键词：树突状细胞热休克蛋白60TOLL样受体细胞因子
