国家自然科学基金(30471731) 作品数:8 被引量:17 H指数:3 相关作者: 吕家驹 张辉 张捷 高庆贞 马春燕 更多>> 相关机构: 山东省立医院 山东大学 济南市中心医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
米非司酮诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡过程中PKB/Akt激酶的调控作用 被引量:3 2011年 目的观察米非司酮在体外诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的作用机制以及Akt激酶在前列腺癌生长过程中的作用。方法采用Westernblot方法检测不同前列腺癌细胞株癌细胞以及米非司酮作用后PC-3细胞中Akt蛋白磷酸化后蛋白含量,以及相关蛋白的表达量。结果前列腺癌PC-3细胞中Akt磷酸化后蛋白即[p-Akt(Thr^308)和p-Akt(Ser^473)]的含量明显高于激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞中的蛋白表达量,其表达量分别为0.27±0.05和0.22±0.07;O.46±0.09和0.37±0.10(P〈0.05)。10μmol/L米非司酮作用于PC-3细胞后p-Akt(Thr^308)和p-Akt(Ser^473)磷酸化蛋白的含量均明显下降,但其中p-Akt(nr3。)蛋白表达量变化尤为显著,4~24h4个时间组蛋白含量分别为0.24±0.08、0.11±0.03、0.05±0.01和0.01±0.00;其蛋白表达量下降速度较p-Akt(Ser^473)快且显著,p-Akt(Serg7。)磷酸化蛋白4~24h4个时间组蛋白含量分别为0.56±0.17、0.42+0.11、0.28±0.09和0.12±0.05。米非司酮作用于PC-3细胞后使Caspase-9、Caspase-3被激活裂解出有活性的激活片段。结论Akt激酶在前列腺癌生长、发展以及激素依赖性向激素非依赖性的转变过程中起着重要作用。p-Akt(Thr^308)蛋白磷酸化水平在Akt磷酸化激活过程中占主导地位,是Akt激活的必要过程。米非司酮抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,诱导细胞凋亡,其可能是通过抑制Akt信号转导通路,从而激活Caspase。 张辉 牛志宏 张捷 马春燕 吕家驹关键词:前列腺癌 米非司酮 脱噬作用 前列腺癌中TSP-1表达与血管生成之间关系的探讨 被引量:3 2006年 目的:探讨前列腺癌中肿瘤血管生成与凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)表达的相关性。方法:采用免疫组织化学法检测22例前列腺癌中微血管密度(MVD)值和TSP-1的表达。结果:前列腺癌中TSP-1阳性表达率为72.7%(16/22),绝大多数表达位于肿瘤细胞的胞浆中,少数表达位于肿瘤细胞外基质。在22例前列腺癌组织中平均MVD为71.21±31.14/100倍视野,具有TSP-1强表达的肿瘤组织中显示MVD值较高,TSP-1的免疫活性与微血管密度间呈显著相关性(r=0.54,P=0.009)。结论:TSP-1在前列腺癌组织中呈高表达与前列腺癌的血管生成相关,有促进前列腺癌中血管生长的作用,并参与前列腺癌血管基因的表达。 张辉 吕家驹 刘莹 傅强关键词:凝血酶敏感蛋白-1 微血管密度 前列腺癌 米非司酮对前列腺癌PC-3细胞周期及其蛋白的影响 被引量:1 2006年 目的探讨米非司酮(MIF)对前列腺癌PC-3细胞周期及其调控蛋白的影响及其作用机制。方法MTT法检测1、10、50、100μmol/L MIF作用于PC-3细胞24-120 h的吸光度(A)值,流式细胞仪检测10、50μmol/L MIF作用PC-3细胞48 h后细胞周期的变化,免疫组化法和Western blot法检测10、50μmol/L MIF处理48 h后PC-3细胞cyclin D1、bax、bcl-2蛋白表达的变化情况。结果1μmol/L MIF作用24-120 h的A值与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);10、50、100μmol/L组A值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);MIF对PC-3细胞的抑制作用呈时间-剂量依赖性。MIF作用48 h后使PC-3细胞停滞于G1/G0期,并使此期细胞比例从对照组的27.4%增加到10μmol/L组的50.4%和50μmol/L组的59.2%,差异有统计学意义(P<0.05)。处理后PC-3细胞中bcl-2蛋白和cyclin D1蛋白表达量,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);而bax表达量显著增加。结论MIF以时间-剂量依赖性方式抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,可能通过下调cyclin D1蛋白表达,阻止PC-3细胞G1期向S期的转换,使其停留于G1/G0期;同时降低bcl-2蛋白的表达及激活bax蛋白的表达等抑制前列腺癌PC-3细胞增殖。 张辉 高庆贞 张捷 赵跃然 吕家驹关键词:米非司酮 雄激素非依赖性 前列腺肿瘤 细胞凋亡 米非司酮诱导雄激素非依赖性前列腺癌细胞凋亡的实验研究 被引量:5 2006年 目的探讨米非司酮在体外诱导雄激素非依赖性前列腺癌DU-145、PC-3细胞凋亡的作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝法检测1,10,50和100μmol/L米非司酮作用于前列腺癌DU-145、PC-3细胞24~120h的吸光度(A)值,用流式细胞仪检测10μmol/L米非司酮作用24和48h后DU.145、PC-3细胞凋亡率的变化;采用免疫组化法检测米非司酮作用DU-145、PC.3细胞后bax、bcl-2、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达的变化。结果1μmol/L米非司酮组的A值与对照组相比,差异无统计学意义(P〉0.05);10,50和100μmol/L米非司酮组的A值与对照组比较,差异有统计学意义(P〈0.01);米非司酮对前列腺癌DU-145、PC-3细胞的抑制作用呈时间-剂量依赖性。10μmol/L米非司酮作用前列腺癌DU-145细胞24和48h的凋亡率分别为15.3%和30.4%,PC-3细胞的凋亡率分别为22.2%和32.0%。经10μmol/L米非司酮作用后,DU-145、PC-3细胞中VEGF和bcl-2蛋白的表达明显减少,而bax的表达显著增加(P〈0.05)。结论米非司酮以时间.剂量依赖性方式抑制激素非依赖性前列腺癌DU-145和Pc-3细胞的增殖,其作用可能是通过降低VEGF蛋白的表达。从而下调bcl-2、激活bax蛋白的表达来实现。 张辉 吕家驹 高庆贞 张捷关键词:米非司酮 前列腺肿瘤 脱噬作用 米非司酮诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡机制的实验研究 被引量:1 2006年 吕家驹 张辉 高庆贞 张捷 高聆关键词:细胞凋亡机制 前列腺癌 米非司酮 PC-3 类固醇激素 肿瘤细胞凋亡 米非司酮抑制前列腺癌PC-3细胞血管内皮生长因子表达过程中糖皮质激素受体的作用 被引量:4 2011年 目的:探讨米非司酮抑制前列腺癌PC-3细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达过程中糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)信号通路的作用。方法:采用免疫细胞化学法检测前列腺癌PC-3细胞中GR的表达情况,然后采用RT-PCR法检测不同浓度米非司酮作用48h后PC-3细胞中GR mRNA的表达变化,并用ELISA法检测不同浓度米非司酮作用不同时间以及不同激素作用后PC-3细胞中VEGF蛋白表达的变化。结果:免疫细胞化学检测证实了前列腺癌PC-3细胞中存在GR的表达。进一步用RT-PCR法检测发现,5、10和50μmol/L米非司酮作用PC-3细胞48h后GR mRNA的表达呈逐渐降低趋势,其中5μmol/L米非司酮组与未处理对照组差异无统计学意义(P>0.05),而10和50μmol/L米非司酮组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。不同浓度的米非司酮作用PC-3细胞48h后,其VEGF的分泌量随着米非司酮浓度的增加而逐渐减少,其中≥10μmol/L的米非司酮组VEGF分泌量比对照组下降≥48.29%;而10μmol/L米非司酮作用PC-3细胞24~96h后,其VEGF的分泌量随着作用时间延长而呈递减趋势,其中48h后的VEGF分泌量比对照组下降超过48.23%,差异有统计学意义(P<0.01)。不同激素作用PC-3细胞后,除米非司酮可减少VEGF的表达(P<0.01)外,孕激素可使VEGF蛋白的表达水平略有升高,而其他激素对VEGF蛋白的表达无影响;同时,地塞米松可以部分阻断米非司酮对PC-3细胞中VEGF蛋白的抑制作用。结论:米非司酮抑制前列腺癌细胞分泌VEGF蛋白,可能是通过GR信号通路发挥作用的。 张辉 王玉秋 张捷 马春燕 吕家驹关键词:前列腺肿瘤 米非司酮 受体 糖皮质激素 血管内皮生长因子类 孕酮和米非司酮对前列腺癌PC-3细胞作用机理的研究 被引量:2 2006年 目的探讨孕酮和米非司酮促进前列腺癌PC-3细胞增殖作用的机理。方法细胞培养观察孕酮和米非司酮对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响。RT-PCR检测PC-3细胞孕激素受体mRNA的表达。Westernblot检测孕酮对PC-3细胞细胞外信号调节激酶ERK1/2活性的影响,并观察米非司酮对孕酮的阻断效果。结果细胞培养7d,孕酮(100nmol/L)组细胞数量为(3.2±0.3)×105,明显高于正常培养组[(1.9±0.2)×105](P<0.05);米非司酮(10μmol/L)组为(1.3±0.2)×105,明显低于正常培养组(P<0.05)。PC-3细胞有孕激素受体mRNA的表达。孕酮可以激活ERK1/2,而米非司酮阻断孕酮对ERK1/2的激活,孕酮组与孕酮+米非司酮组p-ERK1/2条带强度差异有统计学意义(吸光度A值分别为70752±16377和12493±3478,P<0.05)。结论孕酮对PC-3细胞的促进增殖作用与激活细胞ERK1/2有关;米非司酮阻断孕酮对PC-3细胞ERK1/2的活化,从而抑制细胞增殖。 高庆贞 吕家驹 尉立京 张辉 丁克家关键词:米非司酮 孕酮 前列腺肿瘤 细胞外信号调节激酶 Expression of Thrombospondin-1 is Correlated with Microvessel Density in Prostate Cancer 2006年 OBJECTIVE To observe the expression of thrombospondin-1 ( TSP-1) in prostate cancer, and examine its expression in relation to angiogenesis. METHODS The expression of TSP-1 and microvessel density (MVD) were studied in 22 prostate cancer patients by using immunohistochemistry. RESULTS Positive expression of the TSP-1 protein was detected in 16 (72.7%)of the 22 cases. Most of the positive staining for TSP-1 was seen in the cytoplasm of the cancer cells, but some was in the extracellular matrix. The mean MVD in the 22 prostate cancer cases was 71.21±31.14 vessels per 100 high field of vision. Tumors with an elevated expression of TSP-1 showed a high MVD resulting in a correlation between TSP-1 immunopositivity and microvessel density that was highly significant (r= 0.54, P=0.009). CONCLUSION TSP-1 is strongly expressed in most prostate cancers and is associated with neovascularization. Therefore TSP-1 is a likely contributor to the extensive neovascularization in prostate cancer and increased TSP-1 expression might participate in an angiogenic phenotype. Hui Zhang Jiaju Lu Ying Liu Qiang Fu