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湖南省自然科学基金(06JJ4108)

作品数:5 被引量:9H指数:2
相关作者:万艳平朱翠明李金丽余敏君蔡恒玲更多>>
相关机构:南华大学更多>>
发文基金:湖南省自然科学基金湖南省卫生厅资助项目湖南省教育厅科研基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生

主题

  • 4篇蛋白
  • 2篇乙型肝炎病毒
  • 2篇肝炎病毒
  • 2篇X蛋白
  • 2篇HDAXX
  • 1篇凋亡
  • 1篇亚细胞
  • 1篇亚细胞定位
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇乙型肝炎病毒...
  • 1篇应激
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇上调
  • 1篇转位
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞定位

机构

  • 5篇南华大学

作者

  • 5篇万艳平
  • 3篇李金丽
  • 3篇朱翠明
  • 2篇蔡恒玲
  • 2篇余敏君
  • 2篇尹卫国
  • 1篇王鑫
  • 1篇陈苏芳
  • 1篇蒋永林
  • 1篇周艺
  • 1篇陈春莲
  • 1篇彭俊
  • 1篇王静

传媒

  • 2篇南华大学学报...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇中国肿瘤
  • 1篇癌症

年份

  • 1篇2009
  • 2篇2008
  • 2篇2007
5 条 记 录,以下是 1-5
排序方式:
hDaxx与乙型肝炎病毒X蛋白的相互作用被引量:1
2008年
目的采用酵母双杂交法研究HBVX蛋白与hDaxx蛋白的相互作用,为探讨HBVX蛋白的致癌机制奠定实验基础。方法构建pGBKT7-hDaxx和pGADT7-HBX重组质粒,分四组转化酵母AHl09,A组为pGADT7和pGBKT7,B组为pGBKT7-hDaxx和pGADT7-HBX,C组为pGADT7-T和pG-BKT7-Lam,D组为pGADT7-T和pGBKT7-p53。将转化菌落接种于SD/-Tip-ku(二缺)固体平板,长出克隆后再接种于SD/-Tip-Leu-His(三缺)和SD/-Tip-Leu-His-Ade(四缺)平板,30℃培养36~72h。裂解酵母菌,提取蛋白,经SDS-PAGE、Western blot检测hDaxx和X蛋白在酵母中的表达。结果仅有共转化pGBKT7-hDaxx和pGADT7-HBx的AHl09可以在三缺及四缺平板上生长。Western blot检测到hDaxx和X蛋白均能在酵母中表达。结论HBV X蛋白与hDaxx能在酵母细胞内发生相互作用。
周艺李金丽万艳平
关键词:HDAXX乙型肝炎病毒X蛋白酵母双杂交
GFP-HPV18 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定被引量:1
2007年
目的构建人乳头瘤病毒18型早期蛋白2(HPV18 E2)删除突变体N端(TAD)、C端(DBD)与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的真核表达载体,为研究HPV18 E2基因与宫颈癌发生的关系提供实验基础。方法用PCR扩增HPV18 E2 TAD、DBD基因序列,用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pEGFP-C1载体与TAD、DBD基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定。结果阳性克隆质粒经双酶切后,琼脂糖凝胶电泳可见4.7 kb6、18 bp和243 bp附近的片段。DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒分别含有618 bp与243 bp的目的基因片段,无碱基错配和移码突变,读码框完全正确。结论成功地构建了GFP-HPV18 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体pEGFP-C1/TAD与pEGFP-C1/DBD。
陈春莲彭俊余敏君尹卫国朱翠明万艳平
关键词:E2基因绿色荧光蛋白真核表达
Daxx亚细胞定位研究进展被引量:5
2009年
死亡域相关蛋白(death domain-associated protein,Daxx)是一种高度保守的核蛋白,在转录调控、致癌、抵抗病毒感染等方面有重要作用。Daxx可定位于早幼粒细胞白血病蛋白核体、核质、核仁、胞浆和异染色质。Daxx通过修饰或与其他蛋白相互作用后能在亚细胞区室之间发生转位。应激条件下,Daxx与多种分子相互作用并发生转位,进而影响下游信号通路。本文综述了Daxx在不同条件下的亚细胞定位及在各亚细胞区室之间的转位。
陈苏芳朱翠明万艳平
关键词:DAXX亚细胞定位转位应激
HBV X蛋白即时高表达上调巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β被引量:2
2007年
目的:将乙型肝炎病毒(HBV)X蛋白真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx转染巨噬细胞,观察X蛋白即时高表达对巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α、IL-1β的影响,为进一步研究HBVX蛋白的致病机制奠定实验基础。方法:将真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx通过SuperFectTM脂转染试剂转染巨噬细胞24小时后,用LPS刺激巨噬细胞,利用Westernblot鉴定X蛋白在巨噬细胞中的表达,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测pcDNA3.1(+)-HBx转染的巨噬细胞不同时间(12、24、48小时)培养上清液中细胞因子TNF-α、IL-1β的含量,统计软件SPSS13.0分析所得数据。结果:将真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx转染巨噬细胞,Westernblot结果显示pcDNA3.1(+)-HBx能在巨噬细胞中表达约17kD的目的蛋白,即X蛋白;ELISA法测定细胞上清液中TNF-α、IL-1β的含量,LPS刺激组及pcDNA3.1(+)组与空白对照组有显著性差异(P<0.01),pcDNA3.1(+)-HBx组与LPS刺激组及pcDNA3.1(+)组有显著性差异(P<0.01),而LPS刺激组与pcDNA3.1(+)组无显著性差异(P>0.05),即LPS可活化巨噬细胞分泌细胞因子,且X蛋白即时高表达可引起LPS诱导的巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β明显增加。结论:乙型肝炎病毒X蛋白即时高表达上调LPS刺激的巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β。
王静蒋永林余敏君蔡恒玲李金丽万艳平
关键词:X蛋白巨噬细胞TNF-ΑIL-1Β
hDaxx即时高表达增强HBVX蛋白对HepG2凋亡的抑制作用被引量:1
2008年
[目的]研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与hDaxx的相互作用及对HepG2细胞凋亡的影响。[方法]构建pGBKT7-hDaxx和pGADT7-HBx酵母表达载体,利用酵母双杂交系统检测HBx与hDaxx的相互作用。将HBV X基因转染HepG2细胞,建立稳定表达HBx的HepG2X细胞株;pcDNA3.1-hDaxx转染HepG2X,5-Fu诱导凋亡,流式细胞术检测凋亡。[结果]共转pG-BKT7-hDaxx和pGADT7-HBx酵母质粒的酵母菌能在SD/-Trp-Leu-His(三缺)和SD/-Trp-Leu-His-Ade(四缺)的平板上生长,且Western blot检测到hDaxx和HBx在同一株酵母菌中的表达;稳定转染HBV X基因的HepG2细胞组凋亡率明显低于HepG2细胞组(P<0.01);且转染pcD-NA3.1-hDaxx后,细胞凋亡率进一步降低,与pcDNA3.1-hDaxx没有剂量依赖关系。[结论]HBx与hDaxx在酵母细胞内存在相互作用;hDaxx的即时高表达可增强HBx对5-Fu诱导的HepG2凋亡作用,HBx可能通过与hDaxx相互作用而抑制HepG2凋亡。
李金丽万艳平朱翠明王鑫尹卫国蔡恒玲
关键词:乙型肝炎病毒X蛋白HDAXX凋亡
共1页<1>
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