“十五”国家科技攻关计划(2004BA718B03)
- 作品数：14 被引量：93H指数：4
- 相关作者：张永振李明慧徐葛林吴杰肖奇友更多>>
- 相关机构：武汉生物制品研究所石河子大学中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 武汉市啮齿动物中汉坦病毒分子流行病学研究被引量：1
- 2010年
- 目的研究湖北省武汉市啮齿动物中汉坦病毒(Hantavirus)流行情况及病毒型别。方法采用间接免疫荧光法(IFA)检测鼠肺中HV抗原;用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法扩增阳性样品中HV的部分S片段及部分M片段;构建系统发生树进行系统发生分析及分型。结果在武汉市肾综合征出血热(HFRS)疫区共捕获啮齿动物231只,在9份鼠肺样品中检测到HV抗原,其中5只为褐家鼠,2只为黄胸鼠,2只为小家鼠,病毒携带率为3.90%。用汉城型病毒(SEOV)特异性引物从7份HV抗原阳性样品中扩增出部分S片段(620～999nt)及部分M片段(2001～2301nt)并测定序列。对扩增出的部分S片段和M片段核苷酸序列分析表明,7株病毒与Genebank已提交的SEOV有很高的同源性,均为SEOV。但在用部分S片段及部分M片段核苷酸序列所构建的系统发生树上,7株病毒的聚集模式不同。结论武汉市啮齿动物携带S1和S4亚型汉坦病毒,表现出SEOV在同一地区的遗传多样性。
- 熊海萍李明慧朱莹段正秀田俊华陈化新张永振
- 关键词：汉坦病毒系统发生分析基因分型
- 吉林省汉城型汉坦病毒基因分型研究被引量：1
- 2010年
- 为了研究吉林省褐家鼠中汉城型汉坦病毒的基因亚型及其分布情况，采用间接免疫荧光法（IFA）检测鼠肺中HV抗原；用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）法扩增阳性样品中HV的部分S片段及部分M片段；构建系统发生树进行系统发生分析及分型。结果显示，在吉林省肾综合征出血热（HFRS）疫区共捕获啮齿动物120只，在9份鼠肺样品中检测到HV抗原，其中7只为褐家鼠，2只为小家鼠，病毒携带率为7．5％。用汉城型病毒（SEOV）特异性引物从7份HV抗原阳性样品中扩增出部分S片段（620—999nt）及部分M片段（2001—2301nt）并测定序列。对扩增出的部分S片段和M片段核苷酸序列分析表明，7株病毒与GenBank已提交的SEOV有很高的同源性，均为SEOV。但在用部分S片段及部分M片段核苷酸序列所构建的系统发生树上，7株病毒的聚集模式不同。结论为吉林省褐家鼠携带S3亚型汉坦病毒。
- 熊海萍李明慧段正秀陈化新张永振
- 关键词：汉坦病毒系统发生分析基因分型地理分布
- 巴彦淖尔市肾综合征出血热疫情分析
- 2008年
- 目的调查1999年后巴彦淖尔市及周围区域流行性出血热疫情呈逐年上升趋势的原因。方法对2005年春末在巴彦淖尔市临河区有HFRS病人的居民区捕获褐家鼠119只、小家鼠21只、获得鼠血条126份、9份病人血清和2份正常人血清样本。以间接免疫荧光和RT-PCR等流行病学检测技术,综合全市人文地理特征分析。结果恢复期病人及病人密切接触者的IgG均显示对SEO型L99株抗原的反应滴度高于HTN型76-118株,从褐家鼠筛选出9个阳性标本,对其部分S和部分M核苷酸序列进行系统发生分析,均为SEOⅠ亚型。结论汉城病毒为巴彦淖尔市流行性出血热暴发的主要病原体。褐家鼠为优势鼠种,有很高的感染率和带病毒率,是主要传染源和储存宿主。
- 高娜马超杨鹏飞李明慧张永振
- 关键词：汉坦病毒系统进化
- 河南省两株狂犬病毒核蛋白和糖蛋白基因的序列分析被引量：11
- 2007年
- 目的分析河南省2株狂犬病毒核蛋白及糖蛋白的基因序列，了解狂犬病毒街毒株与人用及兽用狂犬病疫苗株间的差异。方法以免疫荧光法检测2004年采自河南省的100只犬脑标本，取阳性犬脑组织悬液接种鼠脑分离病毒。以RT-PCR法扩增病毒核蛋白及糖蛋白全基因，克隆测序后进行遗传学分析。结果分离到2株狂犬病毒，分别命名为Henan Hb1与Henan Sq1，序列分析表明2株病毒均为基因1型狂犬病毒，2株病毒的N基因与G基因核苷酸的同源性分别为99．3％和98．9％，氨基酸的同源性分别为98．7％和98．4％。2株病毒与CTN疫苗株同源性较高，N基因与G基因的核苷酸同源性分别为89．1％和85．6％～85．7％，氨基酸同源性分别为97．6％～98．0％和92．3％。与已知的基因1型狂犬病毒相比，2株病毒与印度尼西亚从犬中分离到的2株病毒同源性最高，N基因与G基因核苷酸同源性分别为92．1％～93．2％和91．9％～92．1％，氨基酸同源性分别为97．5％～98．6％和96．0％～96．2％。Henan Sq1株病毒在糖蛋白关键的毒力位点333位由W替换了R。系统发育分析表明Henan Hb1与Henan Sq1与印度尼西亚株、疫苗株CTN、中国分离株，以及泰国与马来西亚分离株进化关系最近，而与疫苗株3aG、PV、ERA及攻击毒CVS株等进化关系较远。结论2株狂犬病毒是基因1型狂犬病毒，但无论是N基因还是G基因的核苷酸序列，以及推导出来的氨基酸序列与已知的1型狂犬病毒株及疫苗株均有一定的差异。
- 熊成龙郝宗宇卢思奇李明慧王海峰孙建伟张彦平Zhen F. Fu张永振
- 关键词：狂犬病毒N基因G基因
- 中国狂犬病的流行病学特征及防制建议被引量：51
- 2007年
- 狂犬病是一种由狂犬病毒引起的人兽共患传染病。几乎所有的温血动物对狂犬病毒易感，但犬类是本病的主要宿主，在携带和传播狂犬病过程中起主要作用。人狂犬病通常由患病动物咬伤或黏膜接触后唾液中的狂犬病毒侵入体内而发生感染。狂犬病是迄今为止人类病死率最高的急性传染病，一旦发病，死亡率高达100％。全世界每年约有35000～50000人死于狂犬病，主要分布在亚洲、非洲和拉丁美洲等发展中国家。
- 张永振俞永新董关木Zhen F Fu
- 关键词：狂犬病毒流行病学特征人兽共患传染病防制动物咬伤人狂犬病
- 湖南3县(市)狂犬病病毒分子生物学研究
- 2007年
- 目的研究湖南省狂犬病高发区和无病例区动物携带狂犬病的分子生物学特征。方法用直接免疫荧光法检测犬唾液及犬、猫脑标本,以RT-PCR法复核阳性进行遗传学分析。结果武冈市和洞口县送检的82只和17只犬中,分别有12只和1只检测到狂犬病毒抗原与核苷酸阳性,阳性率分别为14.63%和5.88%。凤凰县67份犬脑标本未检测出病毒。28份猫脑组织标本也未检测出狂犬病毒。用RT-PCR法扩增阳性犬脑组织(编号为Wg13,Dk13)的狂犬病毒N基因,两株病毒之间核苷酸与氨基酸的同源性分别为99.4%及99.1%;Wg13株与中国疫苗株CTN株和aG株的核苷酸同源性(氨基酸)分别为89.4%(98.2%)、86.1%(95.1%);Dk13株与中国疫苗株CTN株和aG株的核苷酸同源性分别为89.1%(98.0%)、86.1%(94.9%)。与其他国家分离到的狂犬病毒相比,两株病毒与印度尼西亚的同源性最大,分别为92.8%、93.2%,而与印度、日本及斯里兰卡等其他国家同源性相对较小。结论两株狂犬病毒均为Ⅰ型狂犬病毒,其N基因的核苷酸序列与当前使用的疫苗株相比,两株病毒与CTN疫苗株分在同一组,同源性较大。
- 肖奇友吕伟罗述斌钟群熊成龙王祥迪杨安宝张永振
- 关键词：狂犬病病毒分子生物学
- 新分离5株狂犬病病毒街毒株N和G基因的序列分析被引量：4
- 2007年
- 目的分析我国新分离的5株狂犬病病毒(RV)街毒株基因序列及分子流行病学状况。方法采用RT-PCR法从疑似狂犬的犬脑组织内获得N和G基因cDNA的全序列并进行测序,将所得结果与已发表的国内外代表性毒株相应基因进行核苷酸和推导氨基酸序列比较。结果5株均含有完整N基因序列,3株含有完整G基因序列。与国内外发表的部分毒株比较,5株街毒N基因的核苷酸同源性在98.1%～99.9%之间,推导氨基酸同源性在99.5%～100%之间。将5株街毒与人用疫苗株3aG、PV株的N基因进行比较,核苷酸同源性在86.2%～86.7%之间,氨基酸同源性在95.1%～95.5%之间;而与人用疫苗株CTN比较,核苷酸同源性在89.4%～89.6%之间,氨基酸同源性在98.2%～98.6%之间。3株街毒G基因的核苷酸同源性在98.5%～99.4%之间,推导氨基酸同源性在99.6%～100%之间。将3株街毒与人用疫苗株aG、PV和兽用疫苗株ERA的G基因进行比较,核苷酸同源性在82.8%～83.1%之间,氨基酸同源性在88.0%～90.1%之间;而与人用疫苗株CTN比较,核苷酸同源性在86.7%～87.1%之间,氨基酸同源性均为92.0%。结论新分离街毒株基因未发生较大变异,与CTN的同源性高于与aG株和PV株。
- 明平刚徐葛林严家新吴杰明贺田周敦金肖奇友杨晓明
- 关键词：狂犬病N基因G基因
- 中国狂犬病毒疫苗株CTN-1-V三个代次的GP基因序列分析被引量：8
- 2006年
- 目的分析三个代次CTN-1-V病毒株糖蛋白(GP)基因部分序列,并与代表性街毒株进行比较。方法利用RTPCR反应,从感染了CTN-1-V病毒的小鼠脑内获得GPcDNA的部分片段,并进行序列测定。结果三个代次的CTN-1-V病毒株GPcDNA序列的690个核苷酸与代表性狂犬病毒GP核苷酸相应序列同源性为83.2%～96.8%,氨基酸序列同源性为90.0%～97.4%。CTN1V株三代之间的核苷酸序列几乎相同。结论CTN1V株在传代过程中GP基因结构基本稳定,与中国流行的代表性街毒株的同源性高于aG株和PV株。
- 明平刚孙文徐葛林吴杰杨晓明严家新
- 关键词：狂犬病毒传代基因序列
- CTN株疫苗对中国狂犬病病毒街毒代表株的保护性被引量：3
- 2008年
- 目的研究人用狂犬病病毒CTN株疫苗对中国狂犬病病毒街毒代表株的保护性,为评估该疫苗的适用性提供依据。方法用CTN株疫苗免疫昆明小鼠,用3株具有代表性的街毒株CQ92、HN06、J和标准攻击毒株CVS经脑内和肌肉攻击,以未免疫小鼠进行脑内和肌肉攻击为对照,观察CTN株疫苗的保护效果。结果原倍和5倍稀释的疫苗免疫的小鼠经3株街毒肌肉攻击后,均得到100%的保护,与对照组比较,差异均有极显著意义;经3株街毒脑内攻击后,原倍疫苗免疫的小鼠均得到100%的保护,5倍稀释的疫苗免疫的小鼠对3株街毒CQ92、HN06、J的保护率分别为85%、75%和77.8%,与对照组比较,差异均有极显著意义。结论CTN株疫苗总体上能有效预防我国目前狂犬病的流行。
- 程满荣吴杰孟胜利徐葛林
- 关键词：狂犬病疫苗
- 北京市1株人狂犬病病毒分离鉴定及其分子特征被引量：1
- 2009年
- 目的研究北京市一株人狂犬病病毒的N、G基因的分子特征,比较与全国流行株以及疫苗株之间的差异。方法以直接免疫荧光技术检测病人脑组织,昆明乳鼠颅内接种法分离病毒株。以RT-PCR方法扩增病毒的核蛋白及糖蛋白基因,克隆测序后进行遗传学分析。结果直接免疫荧光检测到病人脑组织中的病毒颗粒,用乳鼠颅内接种法分离到了毒株,命名为Beijing(H)株。遗传分析表明Beijing(H)株与目前我国的主要流行株N基因和G基因的核苷酸序列同源性分别是97.6%～99.1%和97.5%～99.7%,推导的氨基酸序列同源性分别是97.6%～99.2%和97.7%～99.8%。结论Beijing(H)株为基因1型狂犬病毒,属于我国目前的流行株,其与目前国内所使用的疫苗株存在一定的差异。
- 谭有将于翔翔祝建波李明慧张永振
- 关键词：狂犬病毒遗传学分析核蛋白基因糖蛋白基因
