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国家科技重大专项(2006BAD04A05)

作品数：4 被引量：89H指数：4
相关作者：陈焕春吴波郭爱珍张书环赵波更多>>
相关机构：华中农业大学宜昌市夷陵区奶牛养殖技术服务中心湖南文理学院更多>>
发文基金：国家科技重大专项武汉市科技攻关计划项目国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域：农业科学更多>>

文献类型

  • 4篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 5篇农业科学

主题

  • 2篇牛结核
  • 2篇牛结核病
  • 2篇结核
  • 2篇杆菌
  • 2篇ESAT-6
  • 2篇MPB70
  • 1篇蛋白
  • 1篇药性分析
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇乳房炎
  • 1篇特性分析
  • 1篇体检
  • 1篇体外
  • 1篇体外释放
  • 1篇牛分枝杆菌
  • 1篇牛分支杆菌
  • 1篇牛结核病诊断
  • 1篇牛乳
  • 1篇牛乳房炎
  • 1篇免疫层析

机构

  • 5篇华中农业大学
  • 2篇宜昌市夷陵区...
  • 1篇湖南文理学院
  • 1篇武汉市结核病...

作者

  • 4篇郭爱珍
  • 4篇吴波
  • 4篇陈焕春
  • 3篇张书环
  • 2篇陈颖钰
  • 2篇邓铨涛
  • 2篇颜邦芬
  • 2篇晁彦杰
  • 2篇刘朝
  • 2篇赵波
  • 2篇曹莎
  • 2篇谭亚娣
  • 1篇詹枝华
  • 1篇余亚军
  • 1篇张成栋
  • 1篇凌洁玉
  • 1篇王京仁
  • 1篇杨俊兴
  • 1篇陈鑫
  • 1篇冯哲

传媒

  • 2篇中国人兽共患...
  • 1篇动物医学进展
  • 1篇中国奶牛

年份

  • 1篇2009
  • 4篇2007
共 4 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
人IFN-γ体外释放检测法的建立及其在结核病诊断中的应用
本研究旨在建立人IFN-γ体外释放检测法,用于人结核病的特异性诊断。克隆表达了人IFNγ7基因,利用纯化的重组IFN-γ免疫小鼠,获得两株高效价的单克隆抗体。用所获得的单克隆抗体及兔抗IFN-γ多克隆抗体建立了检测人IF...
陈颖钰邓铨涛詹枝华郭爱珍项杰陈军周金海曾庆志杜义祥魏武童庆伟晁彦杰匡有吉陈焕春
关键词：结核病IFN-ΓELISA
文献传递
湖北地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定与耐药性分析被引量：52
2007年
本研究旨在分离鉴定湖北地区致奶牛乳房炎的病原菌,鉴定细菌的耐药特征,为奶牛乳房炎防治提供理论依据。从湖北两个主要奶牛小区的9个不同规模的奶牛场采集牛奶样本200份,经检测,其中3份为临床乳房炎样本,49份为隐性乳房炎。两地区隐性乳房炎的检出率分别为36.4%(20/55)与20%(29/145)。两地区乳房炎牛奶的细菌种类分布也各不同。其中武汉东西湖地区停乳链球菌的分离率最高,占33.3%(8/24),而宜昌夷陵区以金黄色葡萄球菌分离率最高,占29%(9/31),其次为无乳链球菌,占25.8%(8/31)。从乳房炎牛奶中共分离到7种细菌共55株,其中金黄色葡萄球菌11株,表皮葡萄球菌10株,无乳链球菌10株,停乳链球菌14株,乳房链球菌2株,大肠埃希氏菌4株,克雷伯氏菌4株。分别对所有分离株进行12种药物的敏感性试验,结果表明所有菌株对先锋V、氧氟沙星均高度敏感,对临床常用的青霉素、链霉素具有较高的耐药性。
刘朝王京仁张成栋吴波韩永佩赵波余亚军王建华刘友斌程贵宝冯哲田地陈焕春郭爱珍
关键词：奶牛乳房炎抗药性
牛结核病抗体胶体金快速检测技术的建立和应用被引量：28
2007年
为了建立一种快速检测牛分支杆菌抗体的新方法用于诊断牛结核病,利用胶体金免疫层析技术原理,用原核诱导表达的牛分支杆菌抗原蛋白MPB83和MPB70分别作为胶体金标记抗原和检测线上的捕获抗原,制备牛结核抗体检测试纸条。结果表明,粒径为40 nm的胶体金制备的试纸条敏感性最高,胶体金最佳标记pH为6.0,MPB83抗原最适标记量为每毫升胶体金6.5μg,MPB70抗原的最适包被浓度为3.0 mg/mL,抗MPB83蛋白IgG的最佳包被浓度为2.5 mg/mL,交叉试验证明试纸条不与牛的其他非相关疾病的阳性血清反应,具有较高的特异性。比较试验证明其敏感性显著高于韩国进口试纸条。在上述试验条件下生产了一批胶体金试纸条进行临床样品检测,并与细菌分离培养、结核菌素皮内变态反应(TST)和韩国试纸条比较。本试纸条与牛分支杆菌分离培养的符合率为85%,与TST的符合率为79.73%,与韩国试纸条的符合率为98.75%。快速检测牛结核抗体的免疫层析试纸条具有敏感、特异、简便、快速的特点,适用于对牛结核病进行普查和检疫,也可作为TST的辅助诊断方法,在牛结核病根除计划中具有良好的应用前景。
张书环杨俊兴晁彦杰颜邦芬吴波曹莎陈颖钰谭亚娣陈焕春郭爱珍
关键词：免疫层析牛分支杆菌牛结核抗体检测
牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83、CFP-10和ESAT-6的融合表达及相关特性分析被引量：5
2007年
目的牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83、CFP-10和ESAT-6的融合表达及相关特性分析。方法应用PCR方法从牛分枝杆菌临床分离株基因组中扩增获得mpb70、mpb83、cfp-10和esat-6四个目的基因片段。采用重叠延伸剪接技术(splicing by overlap extension,SOE)获得融合基因cfp10-esat6和mpb83-cfp10-esat6,将mpb70和mpb83-cfp10-esat6串连于载体pUC19-Linker上,再将mpb70-mpb83-cfp10-esat6连于表达载体pET28a(+)中得到重组质粒pET70-83-C10-E6。转化BL21(DE3)感受态细胞后,经IPTG诱导获得以可溶形式表达的融合蛋白。用Ni2+亲合层析法纯化该融合蛋白。结果经ELISA验证该融合蛋白能分别与抗原蛋白MPB70、MPB83和CE(cfp10-esat6)的多抗反应,说明该融合蛋白具有四个抗原蛋白的免疫学活性。Western blot分析显示:该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生特异性反应,而与牛其它疾病的阳性血清不反应。热稳定性试验证明该融合蛋白属于热稳定性蛋白。结论融合表达了牛分枝杆菌的四种特异性抗原蛋白,该蛋白具有单个蛋白的免疫原性和稳定性,作为一种新型的诊断抗原具有良好的应用前景。
张书环吴波颜邦芬曹莎陈颖钰晁彦杰凌洁玉谭亚娣陈焕春郭爱珍
关键词：牛分枝杆菌结核
牛分枝杆菌特异性四联融合蛋白在牛结核病诊断中的临床应用被引量：5
2007年
目的以原核表达的MPB70-MPB83-CFP10-ESAT-6融合蛋白作为诊断抗原,建立牛结核病抗体检测间接ELISA(iELISA)。方法用iELISA检测90份健康牛血清,确定样本阴阳性临界值(S/P)为0.17。iELISA与商品化胶体金试剂条(ICG)平行检测150份临床奶牛血清样本;以结核菌素皮内试验(TST)为参考方法,检测了华中地区四个奶牛场的560头中国黑白花奶牛和90份进口奶牛结核阴性血清;对其中22头奶牛进行鼻拭子分菌检验,4头分菌阳性奶牛的血清抗体检测也为阳性。结果iELISA与ICG的符合率为93.33%(140/150),与TST的总符合率为87.32%(489/560),与细菌培养的总符合率为77.27%(17/22)。以TST为参考方法,iELISA的敏感性和特异性分别为72.37%和89.67%。结论该方法具有较高的灵敏度与特异性,与其它方法有较高的符合率。
吴波张书环邓铨涛项杰陈军刘朝陈鑫韩永佩赵波陈焕春郭爱珍
关键词：IELISA融合蛋白牛结核病MPB70CFP10ESAT-6
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