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上海市自然科学基金(08ZR1402100)
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邱志兵
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构建表达IL-10的重组乳酸杆菌
2011年
目的构建表达IL-10的重组乳酸杆菌。方法人工合成信号肽系列后与IL-10基因连接后克隆到干酪乳酸杆菌(Lactobacillus casei,L.casei)整合型表达载体pIlac的lac启动子下游,得到重组质粒pIlac-sp-IL10,电穿孔转化L.caseiCECT 5276。挑选转化后的耐药菌落在含红霉素的培养基中培养,抽提染色体DNA,PCR及测序鉴定证实IL-10基因是否整合到L.casei的基因组中,Western blot检测重组蛋白表达。结果 IL-10基因整合到干酪乳酸杆菌的基因组中;重组L.casei产生的目的蛋白部分分泌进入培养上清。结论 IL-10在L.caseiCECT 5276中得到了分泌表达。
邱志兵
钟良
陈佳婕
戎兰
陈坚
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IL-10
信号肽
重组质粒
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