霍英东青年教师基金(91034) 作品数:20 被引量:47 H指数:4 相关作者: 宋铭忻 路义鑫 李冬梅 花丽茹 韩彩霞 更多>> 相关机构: 东北农业大学 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 辽宁农业职业技术学院 更多>> 发文基金: 霍英东青年教师基金 中国博士后科学基金 “十一五”国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
旋毛虫Ts43基因真核表达载体的构建及其在Vero E6细胞中的表达 2007年 利用RT-PCR技术从黑龙江省猪源旋毛虫获得了Ts43基因,并克隆入pcDNA3.1-CT-GFP真核表达载体中构建重组质粒,用该重组质粒在脂质体介导下转染Vero E6细胞,GFP标签证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,通过Western-blot分析,细胞裂解液样品中有1条约66 ku的条带,可被小鼠旋毛虫阳性血清所识别,与预计大小一致,说明,真核表达载体pcDNA3.1-CT-GFP中的Ts43基因在VeroE6细胞中获得了表达,表达产物具有抗原性。 王君 路义鑫 姜曰晓 朱江威 朱艳梅 袁金钱 宋铭忻关键词:旋毛虫 克隆 真核表达 旋毛虫P53ES抗原基因的克隆及真核表达 被引量:4 2009年 应用RT-PCR方法扩增旋毛虫ES抗原P53基因,构建P53基因绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-N1-P53,利用脂质体法将其转染哺乳动物细胞COS-7。于转染24h后在荧光显微镜下观察到发绿色荧光的转染细胞;同时通过westen blot分析证实了P53基因表达产物的抗原性。结果表明,P53基因在COS-7细胞中表达获得了表达,而且其融合蛋白具有免疫原性。 朱艳梅 韩彩霞 路义鑫 宋铭忻关键词:旋毛虫 P53基因 克隆 真核表达 胃肠道线虫的黏膜免疫 被引量:1 2006年 从机体抗胃肠道线虫的黏膜免疫、胃肠道黏膜的抗原加工与递呈、胃肠道黏膜抵御寄生虫的效应机制等几方面论述了胃肠道线虫的免疫机理和免疫学研究的进展,旨在进一步阐明用免疫介入方法防治胃肠道线虫的理论基础,以解决胃肠道线虫治疗过程中的药物残留以及寄生虫的抗药性问题。 韩周 路义鑫 宋铭忻关键词:胃肠道线虫 寄生虫 黏膜 免疫 正视寄生虫病的危害,保障畜牧业健康发展 被引量:1 2007年 针对目前我国寄生虫病的流行现状和对人畜的危害,根据多年来的防治工作实践,对新世纪的畜禽寄生虫病提出了新的防治措施和管理思路,着重阐述了畜禽寄生虫病的控制对策,为促进我国畜牧业健康发展和保障人民身体健康提供一定的参考。 宋铭忻 路义鑫 韩彩霞关键词:寄生虫病 畜牧业 旋毛虫不同隔离种成囊前期幼虫49ku ES抗原基因的克隆与序列分析 被引量:2 2007年 根据Gen Bank中已发表的序列(M64242)为参考设计引物,用RT-PCR方法从6个旋毛虫隔离种的成囊前期幼虫中扩增出了49 ku ES抗原基因,将目的基因定向克隆入pMD18-T载体,转化大肠杆菌TG1。用PCR、限制性内切酶EcoR I和BamHI进行单、双酶切鉴定,阳性质粒测序。成功克隆了6个旋毛虫隔离种成囊前期幼虫49 ku ES抗原基因,序列分析结果显示:49 kuES抗原基因的大小为948 bp,基因的保守性很强,序列同源性比较高,不同隔离种之间的差异很小。 路义鑫 宋铭忻 王洪斌关键词:旋毛虫 成囊前期幼虫 克隆 猪旋毛虫不同发育时期虫体49ku ES抗原基因的克隆与序列分析 被引量:4 2006年 根据GenBank中已登录的猪旋毛虫49 ku ES抗原基因序列设计了1对引物,用SDS裂解液配合蛋白酶K方法从猪旋毛虫不同发育时期(成囊前期幼虫、肌幼虫、成虫)虫体中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增49 ku ES抗原基因,将目的基因定向克隆入pMD18-T载体,转化大肠埃希氏菌TG1。用PCR、限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ进行单、双酶切鉴定,阳性质粒的测序结果表明,成功克隆了猪旋毛虫不同发育时期虫体49 ku ES抗原基因。序列分析结果显示:49 kuES抗原基因大小为948 bp,基因的保守性很强,序列同源性比较高,不同发育时期之间的差异很小。 路义鑫 宋铭忻 王洪斌关键词:旋毛虫 KU 本地毛形线虫49kuES蛋白结构基因在昆虫细胞中的表达 2008年 根据BAC-TO-BAC杆状病毒表达系统的供体质粒,设计表达引物,从克隆质粒上扩增本地毛形线虫(Trichinella nativa)49kuES结构蛋白基因TNPG,酶切后与供体质粒连接,在大肠杆菌中克隆,将克隆有外源基因的供体质粒转化DH10Bac感受态菌,该菌含有杆状病毒穿梭载体,供体质粒中的外源基因在辅助质粒编码的转座酶作用下,通过转座而插入杆状病毒基因组中,筛选含有重组质粒的Bacmid DNA,用脂质体介导法转染昆虫细胞获得重组病毒。SDS-PAGE电泳显示表达蛋白为36ku的融合蛋白,Western blot检测表明表达的融合蛋白能够被小鼠旋毛虫的阳性血清识别。实验结果表明,本地毛形线虫的ES融合蛋白的制备将在诊断方法的建立和免疫研究方面具有很好的应用前景。 李冬梅 王秀荣 路义鑫 马广鹏 花丽茹 宋铭忻关键词:本地毛形线虫 杆状病毒表达 黑龙江省旋毛虫分类研究进展 2007年 近年来,随着遗传学、生物学和分子生物技术的发展及其在寄生虫学方面的应用,国内学者认为黑龙江省旋毛虫有2个种和1个分类地位尚未定的基因型。文章根据黑龙江省旋毛虫形态学、生物学、遗传学、分子生物学等方面表现的不同特性,对其分类学方面的研究加以综述。 姜曰晓 宋铭忻 路义鑫关键词:旋毛虫 人兽共患病 旋毛虫排泄/分泌(ES)抗原致鼠胸腺淋巴细胞凋亡的研究 2007年 本试验首次以体外培养的小鼠胸腺淋巴细胞为实验对象,加入旋毛虫(Trichinella spiralis)肌幼虫ES抗原做刺激物,通过对鼠胸腺淋巴细胞DNA损伤、凋亡水平的检测,进而证明旋毛虫肌幼虫ES抗原能够诱导鼠胸腺淋巴细胞发生调亡。掌握这种免疫细胞凋亡(apoptosis)发生的过程,对分析免疫应答的特点和调控,以及探索旋毛虫病(Trichinosis)的发病机制和提供防治对策都具有重要意义。 花丽茹 董晓波 李冬梅 韩周 宋铭忻关键词:寄生虫感染 旋毛虫感染 猪犬旋毛虫在豚鼠体内的低温耐受性试验 被引量:6 2007年 路义鑫 韩彩霞 马广鹏 宋铭忻 邹丽关键词:犬旋毛虫 猪肉 旋毛虫病