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金钗石斛多糖对大鼠混合培养皮层细胞炎症相关因子表达的抑制作用被引量：5: 2016年; 目的:探索金钗石斛多糖(NDP)对脂多糖(LPS)作用的新生大鼠大脑皮层胶质细胞-神经元混合培养体系的保护作用。方法:制备新生大鼠大脑皮层胶质细胞-神经元混合培养体系,NDP预处理后LPS刺激,观察细胞生长情况并采用Western blot法检测体系中炎症相关因子IL^(-1)β,TNF-α,COX-2和IL-6的蛋白表达及相关调控信号p-NF-κB,p-p38,p-JNK和p-ERK的水平。结果:NDP作用于LPS刺激的大鼠皮层胶质细胞-神经元混合培养体系后,较单用LPS的模型组相比炎症相关因子IL^(-1)β,TNF-α,COX-2和IL-6的蛋白表达及相关调控信号p-NF-κB,p-p38,p-JNK和p-ERK的水平明显降低。结论:NDP可抑制LPS诱导的新生大鼠皮层胶质细胞-神经元混合培养体系炎症相关因子的产生。; 林牧龚其海吴芹金凤石京山; 关键词：神经元小胶质细胞脂多糖星形胶质细胞

金钗石斛生物总碱对脂多糖激活星形胶质细胞产生炎症因子的影响被引量：27: 2011年; 目的观察金钗石斛生物总碱对外源性内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活大鼠大脑皮层星形胶质细胞(astrocyte)及诱导其产生和释放炎症介质的影响,探讨石斛生物总碱对星形胶质细胞的抗炎作用。方法通过MTS检测细胞存活率,ELISA法检测TNF-α炎性因子蛋白的表达,实时定量多聚酶链反应(real time RT-PCR)检测炎症相关基因TNF-α、IL-6 mRNA的表达。结果①LPS刺激星形胶质细胞后,MTS检测吸光度明显升高,与正常组比较差异有显著性;②金钗石斛生物总碱能够降低LPS所致的TNF-α蛋白的高表达(P<0.05);③金钗石斛生物总碱能够降低LPS诱导的星形胶质细胞吸光度的升高,同时明显抑制LPS所致的TNF-α、IL-6 mRNA的高表达。结论金钗石斛生物总碱能够拮抗LPS所引起的炎症反应,其作用与抑制星形胶质细胞的激活及其炎症因子的释放密切相关。; 张俊青吴芹龚其海张锋金凤聂晶石京山; 关键词：脂多糖星形胶质细胞炎症因子

安宫牛黄丸及朱砂和雄黄对脂多糖诱导的神经损伤的作用(英文)被引量：9: 2010年; 目的探讨朱砂和雄黄在安宫牛黄丸(AGNH)配方中对脂多糖(LPS)介导的神经损伤的保护作用及机制。方法制备大鼠中脑原代神经元-神经胶质细胞联合培养模型。实验分为正常对照组、LPS 10μg.L-1模型组、LPS +朱砂(4和40 mg.L-1)组、LPS +雄黄(4和40 mg.L-1)组和LPS +AGNH(40和400mg.L-1)组。药物与细胞作用30 min后加入LPS;7 d后进行实验指标检测。采用免疫组织化学染色法检测酪氨酸羟化酶阳性的细胞数量和形态学变化以及小神经胶质细胞的激活情况,实时RT-PCR检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)与Griess试剂分别检测细胞培养上清液中TNF-α和一氧化氮(NO)的含量。结果与正常对照组比较,LPS10μg.L-1作用于细胞,多巴胺能神经元的数量明显下降了40%(P<0.05);LPS显著诱导小神经胶质细胞的激活,TNF-αmRNA和iNOS mRNA的表达分别增加了9倍和2倍(P<0.05),同时神经元-胶质细胞联合培养上清液中TNF-α和NO的含量分别增加了20倍和30倍(P<0.05)。与LPS模型组比较,AGNH400mg.L-1和雄黄40 mg.L-1能明显拮抗LPS对多巴胺能神经元的毒性作用,多巴胺神经元数量分别上升了40%和30%(P<0.05);AGNH400 mg.L-1和雄黄40 mg.L-1能抑制小神经胶质细胞的激活,小胶质神经细胞中TNF-αmRNA分别下降了61%和52%(P<0.05)和iNOS mRNA的表达分别降低了58%和51%(P<0.05),而且神经元-神经胶质细胞联合培养上清液中TNF-α的含量分别降低了55%和43%(P<0.05)以及NO的含量分别下降了53%和34%(P<0.05)。而朱砂对LPS的作用无影响。结论 AGNH能改善LPS介导的神经元损伤,雄黄是其抗炎作用的有效成分之一,朱砂未见明显的神经保护作用。; 张锋刘杰石京山; 关键词：安宫牛黄丸朱砂雄黄神经损伤小神经胶质细胞

金钗石斛多糖对新生大鼠大脑皮质胶质细胞-神经元混合培养体系的作用被引量：1: 2017年; 目的探讨金钗石斛多糖(NDP)对新生大鼠大脑皮质胶质细胞-神经元混合培养体系的作用。方法制备新生大鼠大脑皮质胶质细胞-神经元混合培养体系,分别用NDP与脂多糖(LPS)刺激并观察细胞生长情况,采用Western blot检测体系中炎症相关因子IL-1β、TNF-α、COX-2、IL-6的蛋白表达及相关调控信号p-NF-κB、p-p38、p-JNK、p-ERK的水平。结果LPS作用于大鼠胶质细胞-神经元混合培养体系时,炎症相关因子IL-1β、TNF-α、COX-2、IL-6的蛋白表达及相关调控信号pNF-κB、p-p38、p-JNK、p-ERK的水平明显升高。然而,NDP明显抑制了LPS诱导的系列变化。结论 NDP可阻遏LPS诱导的新生大鼠皮质胶质细胞-神经元混合培养体系中小胶质细胞和星形胶质细胞激活,从而保护神经元。; 林牧吴芹龚其海周少玉石京山; 关键词：神经元小胶质细胞星形胶质细胞

金钗石斛多糖减轻脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退及机制研究被引量：2: 2016年; 目的:观察金钗石斛多糖(Dendrobium nobile polysaccharides,DNP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠学习记忆减退及神经炎症的改善作用。方法:DNP(40、80、160 mg·kg-1·d-1)预防性给药7 d,侧脑室注射20μg LPS制备大鼠学习记忆减退模型。制模后d 5开始,Morris水迷宫法检测大鼠的空间辨别学习记忆能力。行为学检测结束后,HE染色观察大鼠海马神经元的细胞形态改变,RT-PCR及Western Blot分别检测大鼠海马组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素1β(interleukine-1β,IL-1β)、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的m RNA及蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠在定位航行实验中逃避潜伏期明显延长,在空间探索实验中其校正潜伏期明显缩短;大鼠海马神经元排列散乱,部分神经元丢失,出现核固缩,嗜伊红染色;大鼠海马组织中TNF-α、IL-1β、TGF-β1 m RNA及其蛋白的表达量明显增加。DNP(40、80、160 mg·kg-1·d-1)给药组能改善大鼠学习记忆能力,对抗LPS引起的大鼠海马CA1区神经元损伤,并降低大鼠海马组织中TNF-α、IL-1β、TGF-β1的m RNA及蛋白表达。结论:DNP可减轻LPS诱导的大鼠学习记忆减退及神经元损伤,抑制其海马的炎症反应。; 王丽娜龚其海李菲吴芹石京山; 关键词：脂多糖学习记忆炎症因子

石斛多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠学习记忆损伤的保护作用(英文)被引量：6: 2012年; 目的:研究石斛多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠学习记忆损伤的保护作用。方法:通过每天皮下注射(sc)D-半乳糖120 mg·kg-160 d诱导小鼠学习记忆损伤模型。观察石斛多糖(80,160,320 mg·kg-1)灌胃(ig)60 d后对小鼠学习记忆功能的影响。结果:Morris水迷宫实验、跳台实验(step-down test)和避暗实验(step-through test)显示石斛多糖能够明显改善D-半乳糖诱导的小鼠学习记忆损伤。此外,石斛多糖能够降低脑组织和血浆中丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量以及升高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-PX)和Na+-K+-ATP酶的活力。结论:石斛多糖能够保护D-半乳糖诱导的衰老损伤,其作用机制可能与石斛多糖的抗氧化损伤有关。; 王令仪黄彬余丽梅吴芹张锋石京山; 关键词：石斛多糖 D-半乳糖学习记忆损伤抗氧化损伤

雄黄是安宫牛黄丸抗细菌脂多糖诱导神经胶质细胞致炎作用的有效成分被引量：23: 2010年; 目的:观察安宫牛黄丸及其所含的雄黄和朱砂对细菌脂多糖(LPS)所致大鼠神经胶质细胞/神经元炎症的保护作用。方法:采用大鼠原代中脑神经元-胶质细胞联合培养,利用LPS激活小胶质细胞引起炎症反应。通过[3H]多巴胺掺入法检测多巴胺能神经元的功能;采用荧光探针检测细胞内超氧化自由基的水平;通过实时反转录聚合酶链反应(Real-timeRT-PCR)检测细胞中炎症因子mRNA的表达,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)和蛋白免疫印记试验(Western blot)检测炎症因子蛋白含量的变化。结果:LPS(10μg.L-1)处理大鼠神经元-胶质细胞联合培养7 d后明显减少多巴胺能神经元对多巴胺的摄取。安宫牛黄丸(400 mg.L-1)和雄黄(40 mg.L-1)能明显拮抗LPS对多巴胺能神经元的毒性作用,而朱砂单用无效。LPS激活神经小胶质细胞,促进其释放超氧化自由基,此作用可被安宫牛黄丸和雄黄抑制。LPS诱导炎症因子的过度表达,大幅上调TNF-α,iNOS,IL-1β,COX-2 mRNA的表达以及蛋白质的水平,安宫牛黄丸和其所含雄黄明显抑制这些炎症因子的过度产生,而单用朱砂无效。结论:安宫牛黄丸能拮抗LPS引起的脑内炎症反应,而雄黄是其抗炎作用的有效成分之一。; 张锋陆远富刘杰石京山; 关键词：安宫牛黄丸雄黄细菌脂多糖

金钗石斛多糖对脂多糖作用大鼠皮层胶质细胞-神经元体系的保护作用被引量：9: 2016年; 目的观察金钗石斛多糖(NDP)对脂多糖(LPS)作用的新生大鼠大脑皮层胶质细胞-神经元混合培养体系的保护作用。方法原代制备新生大鼠大脑皮层胶质细胞-神经元混合培养体系,NDP作用于LPS刺激的胶质细胞-神经元混合培养体系,观察细胞生长情况,并采用Real time PCR法检测体系中炎症相关因子IL-1β、TNF-α、COX-2的基因表达。结果 NDP作用于LPS刺激的大鼠皮层胶质细胞-神经元混合培养体系后,胶质细胞激活减少、神经元损伤减轻,较单用LPS作用的模型组相比,炎症相关因子IL-1β、TNF-α、COX-2的基因表达明显降低。结论 NDP能抑制LPS对小胶质细胞和星形胶质细胞的激活,减少炎性因子的生成。; 林牧龚其海吴芹张锋石京山; 关键词：神经元小胶质细胞脂多糖星形胶质细胞

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国家自然科学基金(30960447)

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