教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-08-0654) 作品数:10 被引量:22 H指数:4 相关作者: 张树彪 王冰 崔韶晖 赵轶男 丁会芹 更多>> 相关机构: 大连民族学院 中国医科大学 辽宁师范大学 更多>> 发文基金: 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 生物学 环境科学与工程 更多>>
多肽型阳离子脂质体的研究进展 被引量:6 2010年 多肽型阳离子脂质体作为一种重要的非病毒基因载体,克服了其他阳离子脂质体转染效率低、具有一定细胞毒性的缺点,在基因转运方面具有广阔的应用前景。在近年来多肽型阳离子脂质体研究的基础上,论述了多肽型阳离子脂质体在类脂的结构设计、脂质体制备及其在基因转运方面应用的研究现状,展望了多肽型阳离子脂质体的发展方向。 赵轶男 张树彪 崔韶晖 王胜男 孙杨关键词:多肽 阳离子脂质体 非病毒载体 基因转运载体的原子力显微镜研究 2010年 通过原子力显微镜观测阳离子脂质体及其与DNA复合物的结构。将一定量的阳离子脂质体以及阳离子脂质体/DAN复合物滴加到新解理的云母片上,干燥后用原子力显微镜观测。结果表明,阳离子脂质体在云母片上形成的颗粒为球形或椭圆形,粒径分布较为均匀;阳离子脂质体/DNA复合物在云母片上的颗粒形状不规则,粒径分布不均且比空白脂质体的粒径大。通过原子力显微镜可以快速有效地观测脂质体以及脂质体/DNA复合物的粒径、表面形态等,为分析脂质体的物理化学性质与基因转运效率的关系提供了一种研究方法。 郝晓敏 张树彪 王冰 崔韶晖 赵轶男 杨宝灵 金梅关键词:阳离子脂质体 原子力显微镜 阳离子脂质体运载基因的跨膜机制 被引量:4 2011年 阳离子脂质体等非病毒载体以其制备简单、低毒性、低免疫原性、可生物降解等优点,成为近年来基因转运中的常用载体。理解阳离子脂质体运载基因的机制对阳离子脂质体的研究具有重要意义。从跨膜机制和信号调控的角度,介绍了脂质体/DNA复合体以特定构象避免细胞外基质中核酸酶的降解,跨越细胞膜进入细胞的过程;阐明了DNA在信号调控的作用下,逃离溶酶体并安全释放的机制;讨论了基因穿过核被膜进入到细胞核的方式,为进一步阐明阳离子脂质体运载基因的分子机制奠定基础。 丁会芹 崔韶辉 王冰 洪洋 张树彪关键词:基因转染 阳离子脂质体 相结构 内吞作用 信号调控 壳聚糖/Fe_3O_4复合纳米颗粒的制备 被引量:1 2012年 以柠檬酸为改性剂,制备水基Fe3O4磁性纳米粒子,基于静电自组装作用,使壳聚糖分子在水溶液中包覆Fe3O4纳米晶粒,获得壳聚糖/Fe3O4复合纳米颗粒液溶胶。扫描电子显微镜(SEM)分析结果表明,复合纳米颗粒平均粒径为49.0 nm,标准差为11.0 nm。X射线衍射(XRD)和红外光谱(FT-IR)分析结果表明,复合纳米颗粒由壳聚糖分子和Fe3O4晶体粒子构成。 石浩明 张树彪 陈会英 赵轶男 崔韶晖 那立艳 华瑞年关键词:壳聚糖 四氧化三铁 静电自组装 复合纳米颗粒 壳寡糖季铵盐型基因载体制备的新方法研究 2011年 首次以甲醇/水为溶剂合成壳寡糖季铵盐型基因载体,并采用1 H NMR表征技术对合成条件进行了研究。结果表明,反应溶剂、NaOH浓度、CH3I用量、反应时间、一步法/两步法合成步骤等都会影响壳寡糖季铵盐的合成。甲醇/水溶剂比NMP溶剂更有利于壳寡糖季铵盐产品的控制、减少副反应的发生;适量的NaOH浓度,有利于壳寡糖季铵盐的合成,NaOH浓度过低,不利于季铵盐的生成,NaOH浓度过高,易发生壳寡糖3,6位-OH的甲醚化副反应;足够量的CH3I和反应时间及两步法合成步骤有利于壳寡糖季铵盐的合成。本研究为具有潜在临床应用价值的壳寡糖季铵盐基因载体提供了一种低碳、绿色、经济、环境友好的合成新方法。 陈会英 赵轶男 丁雪 边庆龙 支德福 张树彪关键词:壳寡糖 1H-NMR 蔗糖酯型阳离子类脂的设计合成及其基因转运研究 基因治疗已用于治疗癌症等疾病,其中基因载体的开发是关键。阳离子脂质体作为基因载体,具有制备简便、重复性好、生物降解性好和易于商品化等优点,目前已经越来越受到科研人员的关注。但现有阳离子脂质体还存在转染效率较低和一定的细胞... 支德福关键词:三氯蔗糖 非病毒基因载体 细胞毒性 生物降解性 文献传递 脂质体介导RNAi的研究 被引量:4 2012年 本文选用阳离子脂质体Lipofectamine 2000为基因载体,使用沉默荧光素酶基因的小干扰RNA(siRNA)进行体外RNA干扰(RNAi),对阳离子脂质体转运siRNA的效率进行研究。首先以阳离子脂质体运载质粒DNA转染细胞,并以延滞实验对阳离子脂质体与siRNA的结合能力进行检测;然后通过基因载体将荧光素酶基因载入细胞,转运不同浓度的siRNA对其进行沉默,应用酶标仪对荧光素酶基因的表达进行分析,并用MTT法对转染后细胞存活率进行检测。结果表明:阳离子脂质体Lipofectamine 2000可以高效转运质粒DNA,并可与siRNA很好地结合。在较低的siRNA浓度下,对荧光素酶基因的沉默率达到较高的水平,转运siRNA转染细胞对细胞活性的影响很小,但细胞存活率随着siRNA浓度的增加而逐渐降低。通过优化实验条件,阳离子脂质体转运较低浓度的siRNA即可高效沉默目的基因。 张旭 丁会芹 王冰 崔韶晖 赵轶男 金文实 张树彪 金梅关键词:RNA干扰 阳离子脂质体 小干扰RNA LIPOFECTAMINE 壳聚糖脂质体复合载体的核酸递送 2012年 目的构建一种由脂质体Lipofectamine2000、低分子质量壳聚糖、pDNA组成的三元新型复合载体用于核酸递送能力研究。方法复合物形态采用原子力显微镜轻敲模式下表征、载体与核酸结合能力采用凝胶延滞法表征,Hep-2细胞报告基因表达利用倒置荧光显微镜检测。细胞毒性研究采用3-甲基-2-噻唑硫酮(MTT)法。结果复合载体与pDNA结合能力强,可完全延滞pDNA。脂质体/壳聚糖/pDNA复合载体形态呈现出未完全压缩的球形,短棒状和不规则的聚集块。新型载体转染Hep-2细胞提高了绿色荧光蛋白报告基因的表达效率。与脂质体对照载体比较,基因转染效率提高了2~4倍,对照壳聚糖载体无明显转染效果。细胞毒性表明壳聚糖降低了脂质体的细胞毒性。结论基于脂质体的壳聚糖新型复合载体具有核酸递送潜力。 王冰 崔韶晖 杨宝灵 赵轶男 赵不凋 周集体 张树彪关键词:壳聚糖 脂质体 表面活性剂对斜生栅藻的生态毒性研究 被引量:5 2011年 以斜生栅藻(Scenedesmus obliquus)为受试生物,采用藻类急性毒标准方法研究十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、十二烷基苯磺酸钠(LAS)和辛基苯基聚氧乙烯醚(TX-100)3种较常用的表面活性剂对藻类的生态毒性。通过斜生栅藻的密度及过氧化物酶活性的测定对其作用机制进行探讨。结果表明,在EC_(50)附近,表面活性剂浓度越大其毒性越强,不同离子型表面活性剂对斜生栅藻毒性从大到小为阳离子(CTAB)、阴离子(LAS)、非离子(TX-100)。表面活性剂毒性作用机制主要是被吸附在藻细胞的磷脂双分子膜结构表面,从而引起膜结构的破坏和功能的丧失,进而导致细胞死亡。 申琼 王冰 杨宝灵 王塔娜 杨阳 姜长阳 张树彪关键词:斜生栅藻 毒性机理 CTAB LAS TX-100 多肽中间体氨基酸活泼酯的合成 2012年 多肽合成中,氨基酸的保护及氨基酸活化反应对多肽合成的产率及纯度具有重要影响,所以对氨基酸保护及活化反应进行研究,是多肤合成的一个重要环节。采用四氢呋喃作为反应溶剂,以9-芴甲氧羰基为保护基团保护组氨酸氨基,以2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N、N,N′,N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)为缩合试剂,活化组氨酸形成活泼酯。建立了芴甲氧羰基-组氨酸活泼酯的合成方法,优化了氨基酸活泼酯的制备条件。结果表明:溶剂和活化试剂对活泼酯的产率影响显著;活泼酯制备的最佳反应条件为n(Fmoc-His):n(HATU)=1:1.1,溶剂为THF,反应温度为25℃,产率为68.20%。此方法节省原料,并大大简化了实验操作。 赵轶男 张树彪 崔韶晖 王冰 陈会英 张淑芬关键词:氨基酸 缩合剂