国家高技术研究发展计划(2012AA02A400) 作品数:5 被引量:16 H指数:2 相关作者: 张靖 李启明 梁宇 靳玉琴 陈实 更多>> 相关机构: 北京天坛生物制品股份有限公司 北京生物制品研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 北京市科委科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
人乳头瘤病毒疫苗研究历程 被引量:8 2012年 早在1907年,Ciuffo就曾报道,分离自人疣体的细胞超滤物可引起不同个体间皮肤疣的传播。直到1933年,Shop首先分离和鉴定了美洲兔乳头瘤病毒,随后,研究人员不断从人或动物体中分离出大量不同型别的乳头瘤病毒,人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)也逐渐被人们认识。20世纪80年代,德国科学家zurHausen和他的研究小组用HPV的分子流行病学调查数据揭示了HPV和宫颈癌的关系,并因此获得了2008年度诺贝尔生理医学奖。至今,已确证HPV可引起皮肤及生殖器疣等多种病症,能够诱发宫颈癌、肛门癌、阴道癌、阴茎癌、外阴癌、口咽癌(包括舌和扁桃体)。2006年,由Merck公司研发的“世界第一支癌症疫苗”——宫颈癌疫苗(商品名为Gardasil)成功上市,3年后,GSK公司的同类疫苗——Cervarix也相继问世。 李启明 张靖关键词:人乳头瘤病毒疫苗 分子流行病学调查 诺贝尔生理医学奖 宫颈癌疫苗 HPV 高效价腮腺炎病毒抗血清的制备及检定 被引量:1 2016年 目的制备高效价腮腺炎病毒抗血清,用于麻腮、麻腮风、麻腮风水痘联合疫苗的病毒滴定及鉴别试验等指标的检定。方法将腮腺炎病毒ME株接种于SPF鸡胚尿囊腔中,优化病毒制备工艺条件,收获高滴度病毒原液,制备免疫抗原;采用皮下多点注射法免疫SPF豚鼠,制备抗血清并对其进行中和效价、中和能力以及特异性干扰试验的检定。结果 ME株腮腺炎病毒以102倍稀释接种鸡胚尿囊腔,培养5 d经-20℃预冷1 h后,收获的尿囊液病毒滴度最高;以其免疫豚鼠所制备的抗血清平均中和效价达1∶3 276,高于鸡抗腮腺炎病毒血清;当豚鼠抗腮腺炎病毒血清稀释度为1∶320时,可完全中和1 000 CCID50/m L的腮腺炎病毒;豚鼠抗腮腺炎病毒血清对Vero细胞、RK-13细胞及2BS细胞的生长,均未见干扰及细胞毒性作用;豚鼠抗腮腺炎病毒血清对异种病毒(麻疹病毒、风疹病毒和水痘病毒)滴度的干扰试验显示,各病毒滴度其试验组与对照组的差值均<0.50 lg CCID50/m L,表明豚鼠抗腮腺炎病毒血清对麻疹病毒、风疹病毒和水痘病毒的滴度均无干扰;豚鼠抗腮腺炎病毒血清及鸡抗腮腺炎病毒血清对麻腮风水痘联合疫苗各病毒滴度均无干扰,且两种抗血清之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用优化后的病毒制备工艺条件及免疫方法,可获得较高效价的抗腮腺炎病毒血清,经检定和验证,均符合含腮腺炎成分疫苗检定抗血清使用要求。 张安宁 刘晓琳 李淑云 陈晓梅 于立芹 史晓莉关键词:腮腺炎病毒 免疫血清 联合疫苗 拟多形假丝酵母的双营养缺陷型工程化改造及鉴定 被引量:2 2012年 目的以拟多形假丝酵母菌(ATCC26012)为材料,构建遗传稳定性良好的尿嘧啶和亮氨酸双营养缺陷型工程化菌株。方法利用物化及基因工程等方法对拟多形假丝酵母菌株的染色体进行改造,将ura3基因和leu2基因进行定向诱变,以获得尿嘧啶和亮氨酸双营养缺陷型突变菌株,并对其进行生物学鉴定,包括菌株的遗传稳定性、基因序列及生理生化特征分析等。结果筛选得到尿嘧啶和亮氨酸双营养缺陷型突变菌株,鉴定结果显示该菌株遗传稳定性良好,标志基因均发生定向改变,生理生化结果显示该菌株能利用多种碳源和氮源,且生长状况良好。结论拟多形假丝酵母的双营养缺陷型工程化改造为进一步研究该菌株的遗传学奠定了基础,为多价蛋白组成类病毒颗粒的外源表达提供了工程化宿主。进而,为复杂疫苗抗原的重组表达和功能研究提供了技术手段。 梁宇 靳玉琴 张靖 陈实 李启明关键词:营养缺陷型 配制麻疹-腮腺炎-风疹-水痘联合减毒活疫苗的各病毒原液最适滴度研究 被引量:1 2016年 目的研究配制麻疹-腮腺炎-风疹-水痘联合减毒活疫苗(measles-mumps-rubella-varicellacombined attenuated live vaccine,MMRV)的各病毒原液最适滴度。方法将麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒原液分别冻干,检测各冻干单价疫苗的滴度和热稳定性,观察病毒滴度的下降幅度。将4种病毒原液按不同配比配制MMRV,检测配制前后的各病毒滴度,摸索配制MMRV的最佳配比。按确认的最佳配比配制MMRV并冻干,检测冻干MMRV的各病毒滴度和热稳定性,确定配制MMRV的各病毒原液最适滴度。结果各病毒原液冻干后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒滴度分别下降约0.6、0.6、0.4 lgCCID50/ml和0.5lgPFU/ml;各冻干单价疫苗37℃放置1周后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒的滴度分别下降约0.6、0.5、0.5lg CCID50/ml和0.5lgPFU/ml。在配制MMRV过程中,仅腮腺炎病毒可能在一定程度上受到其他病毒的干扰。按确认的最佳配比配制的MMRV冻干后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒滴度分别下降约0.5、0.6、0.5lgCCID50/ml和0.6lgPFU/ml;冻干MMRV于37℃放置1周后,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒滴度分别下降约0.6、0.6、0.5lgCCIDsc,/ml和0.5lgPFU/ml。结论在按确认的最佳配比配制MMRV时,麻疹、腮腺炎、风疹和水痘病毒原液的滴度需分别≥6.0、≥6.5、≥6.0lgCCID50/ml和≥5.3lgPFU/ml。 陈晓梅 于立芹 史晓莉 李瓯 刘晓琳 李淑云 张建军 赵炜炜 张安宁关键词:麻疹-腮腺炎-风疹疫苗 水痘疫苗 冷冻干燥法 滴度 麻腮风水痘联合减毒活疫苗的稳定性观察 被引量:4 2016年 目的观察中试阶段制备的麻腮风水痘(measles,mumps,rubella and varicella,MMRV)联合减毒活疫苗的稳定性。方法将检定合格的3批中试阶段制备的MMRV联合减毒活疫苗分别置-20℃、2-8℃、室温(25℃)和37℃,定期对其病毒滴度进行检测;在0和18月进行鉴别试验、物理检查、水分检测、无菌检查、异常毒性检查、牛血清白蛋白残留量检测、抗生素残留量检测。结果 -20℃放置18个月,MMRV联合减毒活疫苗中麻疹、腮腺炎、风疹及水痘病毒滴度分别不低于4.55 lg CCID(50)/ml、5.05 lg CCID(50)/ml、3.80 lg CCID(50)/ml和4.65 lg PFU/ml;2-8℃放置18个月,MMRV联合减毒活疫苗中麻疹、腮腺炎、风疹及水痘病毒滴度分别不低于4.05 lg CCID(50)/ml、4.93 lg CCID(50)/ml、3.80 lg CCID(50)/ml和4.32 lg PFU/ml;25℃放置6周,MMRV联合减毒活疫苗中麻疹、腮腺炎、风疹及水痘病毒滴度分别不低于3.80 lg CCID(50)/ml、4.43 lg CCID(50)/ml、3.93 lg CCID(50)/ml和3.87 lg PFU/ml;37℃放置4周,MMRV联合减毒活疫苗中麻疹、腮腺炎、风疹及水痘病毒滴度分别不低于3.80 lg CCID(50)/ml、4.43 lg CCID(50)/ml、3.93 lg CCID(50)/ml和3.84 lg PFU/ml。其他各项指标检测结果均符合制造及检定规程要求。结论冻干MMRV联合减毒活疫苗稳定性良好。 张安宁 于立芹 陈晓梅 史晓莉 李瓯 李磊 张建军 付永其关键词:滴度 稳定性