国家自然科学基金(30371237)
- 作品数：13 被引量：55H指数：6
- 相关作者：赵仲堂刘运喜杨丽萍王显军李忠更多>>
- 相关机构：山东大学军事医学科学院山东省疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金山东省科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 北方秋冬型恙虫病新疫区儿童恙虫病临床特点及其流行因素被引量：6
- 2008年
- 目的探讨北方秋冬型恙虫病新疫区儿童秋冬型恙虫病临床特点及流行因素。方法1993年9月至2004年1月在秋冬型恙虫病新疫区山东费县5所乡镇医院共收治儿童恙虫病患儿56例，对所获临床资料统计分析，同时调查当地疫源地，并进行恙虫病东方体（Orientia tsutsugamushi，Ot）分离与鉴定。结果男性患儿多见（占82％）；均为农村患儿，都有野外暴露史；9—11月为发病季节，高峰在10月中、下旬；有特异性皮肤焦痂或溃疡者占96％（54／56），100％患儿高热，98％的患儿有皮疹（55／56），86％的患儿有淋巴结肿大（48／56）；间接免疫荧光法检测抗体阳性占94．12％；常伴有脏器损害（75％）。小盾纤恙螨是该地恙虫病主要传播媒介，黑线姬鼠是当地野外Ot最重要的宿主。结论儿童秋冬型恙虫病是北方恙虫病新疫区一种常见的自然疫源性疾病，流行区野外暴露史、皮肤特异性焦痂或溃疡、间接免疫荧光法检测抗体阳性是该病重要诊断依据。
- 刘运喜赵仲堂丰佩田马淑彬闵静思秦德太袁云娥魏华索继江邢玉斌贾宁高岩
- 关键词：丛林斑疹伤寒儿童流行病学因素
- 山东地区不同季节优势恙螨自然感染恙虫病东方体的分子流行病学调查被引量：10
- 2006年
- 目的从分子水平探讨山东地区不同季节优势恙螨自然感染恙虫病东方体(Ot)情况及其作为恙虫病传播媒介的可能性。方法根据Ot-Sta56 kDa外膜蛋白基因部分序列设计Ot种和型特异性引物,对标本提取的DNA先采用种特异性引物扩增,然后再采用型特异性引物扩增分型,并对部分标本进行序列测定。结果从不同季节优势恙螨幼虫共得到11株Ot分离株和16份恙螨匀浆,从这27份标本提取的DNA经首轮PCR扩增后,18份标本有预期的目的带。对首轮PCR产物采用nested PCR扩增分型,结果17份为Kawasaki型,1份(LHGM2株)为Karp型。序列同源性分析结果证实了nested PCR分型结果:XDM2株首轮PCR产物碱基序列与。Kawasaki型相应DNA片段的碱基序列同源性最高,为97．00％,在系统发育树上与Kawasaki株位于同一分支,应属于Kawasaki型; LHGM2株首轮PCR产物碱基序列与Karp型相应DNA片段的碱基序列同源性最高,为96．45％,在系统发育树上与Karp株位于同一分支,应属于Karp型。结论山东地区不同季节优势恙螨中存在Ot自然感染,Ot主要基因型为Kawasaki型。
- 张倩刘运喜高媛赵仲堂张景兰杨占清薛健曹务春
- 关键词：恙虫病恙螨恙虫病东方体
- 山东部分地区小兽类寄生恙螨的群落结构被引量：3
- 2004年
- 用鼠笼捕捉活鼠 ,收集体外恙螨 ,分类计数 ,定量分析小兽类体外寄生恙螨的群落结构。探讨山东小兽类体外寄生恙螨群落结构及其与疾病的关系。结果表明 ,当地 5种小兽类体外共有 6种寄生恙螨。黑线姬鼠、大仓鼠体外寄生螨种较丰富 ,各有 5种寄生螨。小盾纤恙螨宿主范围广 ,在 4种小兽的体外均有发现。大仓鼠体外太平洋无前恙螨的带螨率和带螨指数最高 ( 72 73 %、5 2 0 0 ) ,临淮岗纤恙螨、泰山纤恙螨、须纤恙螨普遍寄生于黑线姬鼠、大仓鼠体外。黑线姬鼠与大仓鼠寄生螨群落多样性指数相对较高。黑线姬鼠寄生螨群落与大仓鼠的相似系数最大 ( 3 9 2 )。黑线姬鼠体外恙螨群落结构随季节变化而发生变化 ,恙螨群落的丰富度和多样性指数以冬季 ( 1 2～ 2月 )最低 ,春。
- 刘运喜赵仲堂吴钦永孟祥瑞薛健杨占清
- 关键词：恙螨群落
- 应用分子生物学方法对黑线姬鼠体内恙虫病东方体基因型分析被引量：1
- 2003年
- 刘运喜赵仲堂高媛张景兰杨占清步秀萍苏静静
- 关键词：分子生物学方法黑线姬鼠恙虫病
- 山东地区秋冬型恙虫病传播媒介的调查研究被引量：5
- 2004年
- 目的 :探讨山东地区恙虫病传播媒介。方法 :1 995年 5月～ 2 0 0 2年 4月在山东恙虫病疫区捕鼠。观察鼠体外恙螨季节消长 ,分离恙虫病东方体 (Ot)。结果 :室内外共捕捉到的 5 2 7只活鼠 (黑线姬鼠 335只 ,大仓鼠 1 1 9只 ,黑线仓鼠 6只 ,小麝鼠句 2只 ,褐家鼠 6 3只 ,小家鼠 2只 ) ,从活鼠体外共检获 1 5 4 6 7只恙螨 ,其中太平洋无前恙螨最多 5 72 0只 ,其它螨数量依次为小盾纤恙螨 4 1 75只 ,临淮岗纤恙螨 30 90只 ,须纤恙螨 1 6 87只 ,泰山纤恙螨 4 6 6只 ,脆弱无前恙螨 32 9只。恙螨季节变化 :小盾纤恙螨主要出现在 9～ 1 2月 ,高峰在 1 1月 ,是秋季鼠体外绝对优势种 ;须纤恙螨出现在 1 0～翌年 4月 ,高峰在 1 2月 ,为冬季优势螨种 ,临淮岗纤恙螨 5月出现 ,1 1月消失 ,高峰在 8月 ,为夏季优势种 ;泰山纤恙螨主要出现在6～ 1 0月 ,数量较少 ,且起伏较大 ;太平洋无前恙螨、脆弱无前恙螨全部采自仓鼠 ,主要出现在 4～ 1 2月 ,高峰期在 7月。Ot分离 :小盾纤恙螨共接种 1 1批 ,分离到 5株 Ot;须纤恙螨、临淮岗纤恙螨和太平洋无前恙螨分别接种 4批 ,分离到 4株、 2株和 2株 Ot。小盾纤恙螨是恙虫病发病季节疫区鼠体外优势螨种 ,季节消长与当地人群恙虫病季节分布基本一致 ;能自然感染。
- 刘运喜赵仲堂吴钦永杨占清张景兰徐建江彭佐林苗仲水
- 关键词：恙螨恙虫病东方体传播媒介疫区接种
- 山东地区恙虫病东方体Sta56基因片段扩增与分型研究被引量：8
- 2004年
- 目的 鉴定山东地区恙虫病东方体(Ot)基因型别。方法 采用巢式聚合酶链反应技术对23株恙虫病东方体山东株、2份采自黑线姬鼠体外的小盾纤恙螨匀浆及10份恙虫病患者全血中提取的Ot目的基因进行分析研究,并与Gilliam、Karp、Kato国际参考株进行比较。将群引物扩增产物用双向测序法进行序列测定。结果 35份标本中33份属于Kawasaki型,2份(FXS4 and LHGM2株)属于Karp型。从这33份中选出B-16、FXS2株进行碱基序列测定,结果B-16、FXS2株Sta56基因片段序列与Kawasaki型同源性最高,分别为94.22％、95.21％,而与其他6株Ot同源性均<75.87％.应属于Kawasaki型;FXS4和HGM2株Sta56基因片段序列与Karp型同源性最高,分别为83.03％、96.45％,应属于Karp型。结论 山东地区恙虫病东方体流行株以Kawasaki型为主,但同时存在Karp型。
- 刘运喜高媛赵仲堂张景兰杨占清步秀萍苏静静
- 关键词：恙虫病基因分型
- PCR/SSCP在恙虫病东方体基因分型中的应用被引量：4
- 2004年
- 目的 采用优化聚合酶链反应 /单链构象多态性分析 (PCR/SSCP)方法分析恙虫病东方体 (Orientiatsut sugamushi,Ot)基因型的各项条件。 方法 对恙虫病东方体山东分离株、小盾纤恙螨匀浆及恙虫病人全血中提取的Ot-Sta5 6基因进行分析。采用PCR/SSCP检测 ,并与NestedPCR基因分型的结果进行比较。结果 山东地区 35份标本提取的Ot -DNA群引物扩增产物呈现出 2种不同的单链构象图谱 ,其中 33份与国际参考株Gilliam ,Karp ,Kato均不相同 ,应属这 3型以外的一种基因型 ,经NestedPCR分型证实为Kawasaki型 ;2份与Karp株相同。表明山东地区恙虫病东方体至少存在 2种型别。检测结果与Nested -PCR基因分型结果相符。条件优化以 8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,常温下 ,2 0 0V电泳 3h获得的电泳结果较为理想 ,并易于操作。结论 PCR/SSCP条件优化后可用于快速分析恙虫病东方体基因型 ,且操作简便 ,结果准确。
- 刘运喜赵仲堂高媛张景兰杨占清步秀萍苏静静
- 关键词：恙虫病东方体基因型分析
- 秋冬型恙虫病病人、恙螨、鼠东方体基因型研究被引量：3
- 2004年
- 目的 了解秋冬型恙虫病流行季节黑线姬鼠、小盾纤恙螨、病人体内恙虫病东方体 (Orientiatsutsuga mushi,Ot)基因型的一致性。方法 采用NestedPCR结合限制性内切酶片段长度多态分析 (RFLP)技术对山东地区恙虫病流行季节病人、野外优势鼠种黑线姬鼠、鼠体外优势螨种小盾纤恙螨标本中Ot-Sta5 6基因型进行分析。结果 应用PCR/RFLP分析了 12株分离自山东秋冬型恙虫病流行季节病人、黑线姬鼠、小盾纤恙螨体内的Ot,2份采自黑线姬鼠体外的小盾纤恙螨匀浆及 10份恙虫病人全血中的Ot-sta5 6目的基因 ,2 4份标本酶切图谱经与已知序列的Ot内切酶图谱相比 ,与日本地方株 -Kawasaki株具有相似的酶切图谱 ,但缺乏HhaI的酶切位点 ;2 4份标本提取的Ot-DNA扩增产物分别经型引物扩增 ,均出现相应分子量的扩增片段 ,皆属日本地方株Kawasaki型。结论 秋冬型恙虫病流行季节病人、野外优势鼠种黑线姬鼠、鼠体外优势螨种小盾纤恙螨体内所分离的恙虫病东方体Sta5 6基因型是一致的 ,并在病人、黑线姬鼠、小盾纤恙螨间构成相互传播关系 ,这对当地恙虫病疫源地的维持有重要作用。
- 刘运喜高媛赵仲堂张景兰杨占清步秀萍苏静静
- 关键词：恙虫病东方体宿主恙螨基因型
- 山东地区恙虫病东方体分离株的基因分型与序列分析被引量：11
- 2006年
- 目的鉴定山东地区恙虫病东方体分离株的基因型别,分析其核苷酸序列。方法以日本、韩国常用的恙虫病东方体分型引物,用巢式PCR技术检测恙虫病东方体分离株的相对分子质量(Mr)56×103蛋白基因片段,对群引物扩增的PCR产物纯化回收后测序,并行序列分析。结果Gilliam、Karp、Kato、山东分离株用群引物均扩增出481-507 bp的目的片段,Gilliam、Karp、Kato经相应的型引物扩增出了目的片段。山东分离株仅Kawasaki型的分型引物扩增出目的条带,序列分析证实山东分离株与Kawasaki型相似。结论在国内首次扩增出Gilliam、Karp、Kato三型标准株,山东地区恙虫病东方体分离株为Kawasaki型;山东地区恙虫病东方体与日本的Kawasaki型相似,两者有较近的亲缘关系。
- 杨丽萍赵仲堂刘运喜冯月秋王显军李忠
- 关键词：恙虫病东方体基因分型
- 山东省泰安市鼠类自然感染恙虫病东方体调查被引量：6
- 2008年
- 目的了解山东省泰安地区鼠类自然感染恙虫病东方体(Ot)的情况。方法应用巢式PCR对山东省泰安地区采集的鼠类标本Ot-Sta56kDa基因片段进行检测,对阳性标本进行序列分析。结果在泰安地区秋冬季共捕获鼠类68只,阳性率为5.88%;不同鼠种间阳性率差异无统计学意义(Fisherχ2=4.714,P=0.062)。其中3只鼠胚胎标本均未检出Ot。序列同源性分析显示,2只鼠脾标本(08P,53P)的核苷酸序列与Sdu-1型的核苷酸序列同源性最高,为99.77%;其次,与Taguchi和Oishi型的同源性均为95.98%,与Kanda和Kawasaki型的同源性均为95.74%。而另2只鼠类标本(55P,56P)的核苷酸序列与TA686型的同源性最高,分别为86.27%和77.11%。系统发生树分析也显示,08P和53P与Sdu-1型在同一分支,它们又与Kawasaki、Kanda、Taguchi和Oishi型共处于同一分支;而55P和56P与TA686型在同一分支。结论山东省泰安地区鼠类存在Ot自然感染。该地区Ot的基因型较为复杂,不仅存在与临沂地区相同的Ot型,该型与日本的Kawasaki型相似;同时还存在与泰国的TA686型相似的Ot型。
- 杨丽萍杨会利李忠王显军赵仲堂
- 关键词：恙虫病鼠类恙虫病东方体分子流行病学
