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刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化: 2014年; [目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并将pPIC9K-Epl1转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,并用不同中终浓度的遗传霉素G418筛选多拷贝重组酵母菌株。[结果]对重组载体进行PCR及双酶切检测为阳性;在含有终浓度为2 mg/ml遗传霉素G418的YPD平板上筛选得到7株多拷贝的转化子GS115-Epl1,经PCR鉴定1株转化子呈阳性。[结论]Epl1基因的载体构建及多拷贝酵母转化子筛选为以后大量分离纯化Epl1蛋白并研究其功能奠定基础。; 遇文婧刘志华王志英古丽吉米拉米吉提黄颖刁桂萍; 关键词：毕赤酵母

深绿木霉发酵液对山新杨防御酶活性的影响被引量：6: 2014年; [目的]探究深绿木霉发酵液对山新杨5种重要植物防御酶活性的影响,为木霉菌代谢产物在木本植物上的应用奠定基础。[方法]测定不同稀释倍数深绿木霉发酵液对山新杨组培移栽苗的超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶、苯丙氨酸解氨酶以及多酚氧化酶活性的影响。[结果]深绿木霉发酵液处理后山新杨叶片组织中防御酶活性明显高于对照组,且不同稀释倍数发酵液之间存在较大差异,其中以50倍和100倍稀释液处理效果最佳。[结论]为今后利用深绿木霉代谢物质防治杨树病害提供了理论依据。; 孙健王志英刘志华遇文婧刁桂萍; 关键词：深绿木霉发酵液防御酶

深绿木霉对山新杨生长及抗叶枯病能力的影响被引量：5: 2019年; 利用深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153菌株不同孢子悬浮液根施山新杨(Populus davidiana×P. alba var. pyramidlis)移栽苗,测定了山新杨根系土壤肥力、生物量、生理酶活性以及抗叶枯病能力,探讨了深绿木霉促进木本植物生长和提高抗叶枯病的能力。结果表明:深绿木霉处理后的山新杨根系土壤p H呈弱酸性,有机质、水解氮和有效磷质量分数明显增加,土壤肥力增强;105、107个·mL^(-1)深绿木霉孢子悬浮液处理60 d的山新杨株高与对照相比分别增长了30.33%和32.91%,地茎、根长、叶片数、鲜质量和干质量都较高;105个·mL^(-1)的深绿木霉孢子悬浮液处理的山新杨抗氧化还原酶(SOD、POD、CAT)和防御酶(PAL和PPO)活性也明显升高;接种叶枯病病原菌后,105个·mL^(-1)的深绿木霉孢子悬浮液处理的山新杨叶片感病面积最小,为山新杨叶片的1.65%。; 遇文婧杨帅刁桂萍; 关键词：木霉促生作用生物菌肥

棘孢木霉葡聚糖酶基因Glu1的克隆及原核表达: 2018年; 从棘孢木霉(Trichoderma asperellum)ACCC30536中克隆获得一个葡聚糖酶基因Glu1,其cDNA全长984bp,编码327个氨基酸。该葡聚糖酶属于Glyco-hydro-12家族,推测为β-1,4-葡聚糖酶,与深绿木霉IMI 206040的Glycohydro-12家族蛋白(XP_013940397.1)有91%相似性,且亲缘关系较近。运用qRT-PCR技术检测9种诱导条件下棘孢木霉Glu1基因的表达水平,结果表明,Glu1基因能参与棘孢木霉对山新杨(Populus davidiana×P.alba var.pyramidlis)或杨树病原菌的识别。构建原核表达载体并获得重组蛋白rGlu1。酶活特性分析结果表明,该酶最适pH为4.5,最适温度为45℃,且酶活性随诱导时间延长逐渐升高,在5h达到稳定。; 刁桂萍杨帅遇文婧; 关键词：山新杨 QRT-PCR 原核表达

二色补血草LbARP基因的克隆及其表达分析被引量：2: 2014年; 从二色补血草(Limonium bicolor)cDNA文库中分离出一个生长素抑制蛋白基因LbARP(GenBank登录号为KF886022)。该基因全长698 bp,含有3个外显子和2个内含子,开放读码框(ORF)387 bp,共编码128个氨基酸,推测蛋白质分子量为13.84 kDa,理论等电点为9.69。多序列比对结果显示,该基因编码的氨基酸序列与其他植物的ARP蛋白序列相似性达到50%以上,具有生长素抑制基因家族的保守结构域。荧光定量PCR结果表明,LbARP基因能够对NaCl、ABA、CuSO4、CdCl2及ZnCl2等非生物胁迫作出应答。; 刁桂萍柳燕宋佳林佳忱刘志华; 关键词：二色补血草实时定量PCR

3种木霉菌混合对山新杨生理酶活性及其幼苗生长的影响: 2014年; [目的]分析混合木霉菌诱导杨树系统抗病性的生理生化机制,筛选出提高杨树抗病性的最佳孢子浓度。[方法]选用3种木霉菌混合孢子根施1年生山新杨移栽苗,分别于不同时间测定山新杨叶部组织的生理酶活性及其生长量变化。[结果]经混合木霉菌处理后,山新杨叶片中的生理酶活性均明显高于对照,其中以1×106个/ml浓度水平处理效果最好;根施混合木霉菌后山新杨的生长量均有所提高。[结论]混合木霉菌能够提高杨树生理酶活性,并且具有促进杨树苗生长的作用。; 遇文婧刘志华王志英马晓乾赵红盈刁桂萍; 关键词：木霉诱导系统抗性 TRICHODERMA

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