解放军总医院医药卫生科研基金(01-Z-092)
- 作品数：2 被引量：26H指数：2
- 相关作者：杨松涛李彦舫夏咸柱高玉伟鞠会艳更多>>
- 相关机构：军事医学科学院吉林大学更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 用RT-PCR检测病料中犬瘟热病毒的研究被引量：19
- 2006年
- 利用RT-PCR技术检测了来自不同地区水貂、狐狸、貉子和老虎病料中是否存在犬瘟热病毒。根据犬瘟热病毒H和N基因核苷酸序列,设计合成2对引物。利用这2对引物分别对14份病料进行了检测。利用H基因引物从7份病料中扩增出761 bp的核酸片段,利用N基因引物也从同样的7份病料中扩增出586 bp的核酸片段。其余病料的检测结果为阴性。2对引物对病料的检测结果一致。
- 鞠会艳夏咸柱高玉伟杨松涛冯娜王铁城李彦舫
- 关键词：犬瘟热病毒RT-PCR
- 表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒构建与包装被引量：7
- 2005年
- 为构建表达犬瘟热病毒核蛋白的重组犬2型腺病毒,用MluⅠ和SphⅠ双酶切真核表达载体pVAXLPN,获得CDV N基因表达盒,将CDV N基因表达盒克隆入预先用SspⅠ酶切后的线性化质粒pVAXΔE3中,构建含CDV N基因表达盒的转移质粒pVAXΔE3LPN。用NruⅠ和SalⅠ双酶切转移质粒pVAXΔE3LPN,回收E3区部分缺失的含CDV N基因表达盒的目的片段,定向克隆入同样酶切处理含CAV-2全基因组的质粒载体ppoly2-CAV-2中,构建E3区部分缺失的包含CDV N基因表达盒的重组质粒pCAV-2-CDVLPN。重组质粒pCAV-2-CDVLPN经AscⅠ酶切获得线性化基因组CAV-2-CDVLPN。此基因组与NruⅠ和SalⅠ分别酶切CAV-2 SY基因组获得的片段混合,利用脂质体介导共转染MDCK细胞,重复转染3次后,出现典型CAV-2病变,经电镜观察和酶切鉴定,证明表达犬瘟热核蛋白的重组犬2型腺病毒包装成功。
- 鞠会艳李彦舫夏咸柱高玉伟杨松涛
- 关键词：犬瘟热病毒犬腺病毒重组病毒
