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高效液相色谱质谱联用法测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素浓度被引量：11: 2014年; 目的：建立同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素浓度的LC-MS/MS方法。方法用25％三氯乙酸-乙腈（2∶1）沉淀蛋白血浆样品，用ZORBAX Extend C18色谱柱，以乙腈-水（均含0.1％甲酸）为流动相梯度洗脱，用电喷雾离子化源，正离子方式，多反应监测（ MRM ）扫描方式进行监测。结果血浆中万古霉素和去甲万古霉素的线性范围均为0.2～100.0μg· mL-1（ r＝0.9978），定量下限为0.2μg· mL -1，平均回收率94.4％～107.2％，日内、日间精密度（ RSD）均小于15％。结论该方法快速、灵敏、准确，专属性强，重复性好，适用于人血浆中万古霉素和去甲万古霉素浓度的测定。; 李贺廉洪肖昌钱李力; 关键词：万古霉素去甲万古霉素液质联用法血药浓度

LC-MS/MS法同时测定人血浆中4种茶碱类药物浓度被引量：7: 2014年; 目的：建立同时测定人血浆中茶碱、多索茶碱、二羟丙茶碱和氨茶碱浓度的LC-MS/MS法。方法人血浆样品用乙腈直接沉淀蛋白后，用ZORBAX SB C18色谱柱，以乙腈-10 mmol· L-1乙酸铵溶液（均含0.1％甲酸）为流动相梯度洗脱，用电喷雾离子化源，正离子方式，多反应监测（ MRM）扫描方式进行监测。结果血浆中茶碱、多索茶碱、二羟丙茶碱和氨茶碱的线性范围为0.10～50.00μg· mL-1（ r ＞0.99），定量下限为0.10μg · mL-1；平均回收率93.5％～109.8％；日内、日间精密度（ RSD）均小于15％；提取回收率在81.2％～90.8％。结论该方法快速、灵敏、准确，专属性强，重复性好，适用于人血浆中4种茶碱类的药代动力学研究。; 肖昌钱李贺李卫李力; 关键词：茶碱多索茶碱二羟丙茶碱液质联用法

电穿孔法介导转染老年人成纤维细胞参数的优化被引量：1: 2015年; 目的探究采用电穿孔法将质粒pGenesil-1(简称p G)转染老年人成纤维细胞,从中寻找最佳的参数。方法采用电穿孔法将能表达G418抗性蛋白和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒p G转染老年人成纤维细胞。荧光显微镜下观察EGFP表达并测定转染效率、细胞存活率;通过G418筛选得到稳定转染的细胞。结果本实验室电穿孔法介导的老年人成纤维细胞转染的最佳电转条件:电压:240 V;电容:750μF;DNA剂量:8μg。48 h后电穿孔法的转染率接近30%。结论用电穿孔法将质粒pG稳定转染老年人成纤维细胞耗时短,有利于在体外对老年人成纤维细胞进行后续实验。; 王雅珍杨舟鑫徐伟红吕远栋毛根祥; 关键词：老年人成纤维细胞电穿孔

红景天苷干预人胚肺二倍体成纤维细胞衰老的microRNA芯片筛选与分析被引量：3: 2017年; 本文运用microRNA芯片方法检测红景天苷干预人胚肺二倍体成纤维细胞衰老过程中的microRNA表达变化,并预测miRNA调控的靶基因功能与信号通路。将人胚肺二倍体成纤维细胞分为3组:年轻细胞(28 PD,young)、近复制衰老(50 PD,old)和红景天苷处理的50 PD细胞(old+SAL),进行miRNA表达谱分析。结果找到43个miRNA与细胞复制性衰老显著相关。58个miRNA在红景天苷干预后表达发生了改变。6个miRNA分子包括hsa-let-7c、hsa-let-7e和hsa-mir-3620表达量在衰老细胞组中表达降低而在红景天苷干预后表达增加,hsa-mir-411、hsa-mir-24-2-5p和hsa-mir-485-3p则表现出相反的趋势。对已经报道过的靶基因进行功能聚类和信号通路分析,靶基因功能明显富集于31个GO,11条信号通路。挑选4个miRNA经RT-PCR验证结果与芯片结果相符。本研究结果为从microRNA水平探讨红景天苷抗衰老机制提供了线索。; 张婧苏慧丽王雅珍文晓林贾兵兵毛根祥; 关键词：红景天苷 MIRNA芯片成纤维细胞 LET-7

LC-MS/MS测定人血浆中阿罗洛尔浓度: 2014年; 目的建立LC-MS/MS方法测定人血浆中阿罗洛尔的浓度。方法人血浆样品用乙酸乙酯提取后,选用ZORBAX Extend C18（2.1 mm×100 mm,3.5-m）色谱柱,以乙腈-水（80∶20,含0.1%甲酸）为流动相,流速为0.30 m L·min^-1,采用电喷雾离子化源,正离子方式,多反应监测（MRM）扫描方式进行监测,用于定量分析的离子反应分别为m/z372.3→315.9（阿罗洛尔）和m/z 267.2→145.0（内标阿替洛尔）。结果血浆中阿罗洛尔的线性范围为0.5~1 000 ng·m L^-1（r=0.995 2）,定量下限为0.5 ng·m L^-1;日内、日间RSD均〈15%;低、中、高3个浓度的提取回收率分别为（80.6±1.6）%,（83.2±3.1）%和（87.5±4.5）%。结论该方法快速、灵敏、准确,专属性强,重复性好,适用于人血浆中阿罗洛尔浓度的测定,可应用于阿罗洛尔的血药浓度检测和药动学研究。; 李力肖昌钱朱逢佳廉洪韩奇刘炜; 关键词：阿罗洛尔液质联用血药浓度药动学

DZNep inhibits the proliferation of colon cancer HCT116 cells by inducing senescence and apoptosis被引量：10: 2015年; EZH2 is over-expressed in human colon cancer and is closely associated with tumor proliferation,metastasis and poor prognosis.Targeting and inhibiting EZH2 may be an effective therapeutic strategy for colon cancer.3-Deazaneplanocin A(DZNep),as an EZH2 inhibitor,can suppress cancer cell growth.However,the anti-cancer role of DZNep in colon cancer cells has been rarely studied.In this study,we demonstrate that DZNep can inhibit the growth and survival of colon cancer HCT116 cells by inducing cellular senescence and apoptosis.The study provides a novel view of anti-cancer mechanisms of DZNep in human colon cancer cells.; Mingquan ShaGenxiang MaoGuofu WangYufeng ChenXiaojian WuZhen Wang; 关键词：EZH2

鼠尾草酸延缓人胚肺二倍体成纤维2BS细胞衰老的实验研究被引量：5: 2014年; 目的研究鼠尾草酸(carnosic acid,CA)延缓细胞衰老的作用及相关机制。方法采用体外细胞模型人胚肺二倍体成纤维2BS细胞系,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定CA对2BS细胞活力的影响,筛选获得最佳CA培养浓度,再用该浓度的CA对2BS进行传代培养,观察其对细胞代龄、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)活性、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平、细胞周期分布和衰老相关蛋白p53、p21的影响。结果 MTT实验表明CA在1μmol/L、5μmol/L能够上调2BS细胞活力;采用含1μmol/L CA的培养液对2BS细胞从30PD(population doubling,倍增次数,亦称作"代")开始培养,直至完全停止生长,同时设立对照。对照组细胞于54PD左右发生衰老,SA-β-Gal染色阳性率达85%,而55PD的CA处理组仅为20%左右,接近年轻细胞水平;此时CA组细胞内MDA水平显著低于对照组,处于G1/G0期细胞的比例显著低于对照组,而S期比例则显著高于对照组,p53、p21蛋白水平均显著低于对照组,CA组细胞继续培养至61PD左右才出现衰老。结论 CA在1μmol/L剂量下能延缓2BS细胞的复制性衰老,该作用可能与其抗氧化能力有关。; 陶萍华文晓林王雅珍毛根祥; 关键词：细胞衰老氧化应激

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国家自然科学基金(31201040)