浙江省自然科学基金(Y2110807)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：温州医学院附属第一医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人血管内皮生长因子165基因慢病毒载体的构建及其在人胚胎神经干细胞中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的:构建携带人血管内皮生长因子165(hVEGF165)基因的慢病毒表达载体,转染人胚胎神经干细胞(hNSCs)并检测hVEGF165基因在hNSCs内的表达。方法:用RT-PCR法扩增出hVEGF165 cDNA,插入pCDH-CMV-copGFP慢病毒载体中,构建pCDH-hVEGF165慢病毒表达载体,双酶切和测序鉴定,包装并转染hNSCs。荧光显微镜观察转染细胞绿色荧光蛋白(GFP)表达,流式细胞术(FCM)测定转染率,Western blot法检测细胞中hVEGF165的表达。结果:酶切及测序结果显示成功构建pCDH-hVEGF165重组慢病毒表达载体,转染7d后观察宿主细胞内有大量GFP表达,FCM测定转染率为63%,Western blot检测证实hVEGF165蛋白在hNSCs中过表达。结论:本实验成功构建了携带hVEGF165的慢病毒表达载体,并在hNSCs中过表达hVEGF165基因。
- 敬华军张宇王晓斌
- 关键词：血管内皮生长因子类慢病毒载体神经干细胞转染
