国家自然科学基金(30430580)
- 作品数：38 被引量：157H指数：9
- 相关作者：赵博光李荣贵郭道森王石发林峰更多>>
- 相关机构：南京林业大学青岛大学徐州师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家林业公益性行业科研专项青岛市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学化学工程生物学轻工技术与工程更多>>
- 质粒pACYC184电转化松材线虫携带的荧光假单胞菌GcM5－1A被引量：2
- 2009年
- 以质粒pACYC184为材料,研究了松材线虫携带的荧光假单胞菌的最适电转化条件.结果表明,荧光假单胞菌GcM5-1A培养至D600nm为0.5时制备感受态细胞,以300mmol/L蔗糖溶液为电击缓冲液,质粒DNA终浓度为0.01ng/μL,在25μF电容、9kV/cm电场强度、200Ω电阻的电击条件下电击一次,可得最大的电转化效率,即5.5×106/μg(DNA).SDS-PAGE分析显示,转化质粒pACYC184的氯霉素抗性基因在受体细胞内得到了表达.本方法的建立为松材线虫携带的荧光假单胞菌的基因导入提供技术支持,为进一步通过基因敲除的方法,选择性地失活特定功能基因,进而确定这些基因在松材线虫病病理进程中的作用奠定基础.
- 汪靖超连福明郭道森李荣贵赵博光
- 关键词：电转化松材线虫
- 松材线虫对其携带的一株细菌繁殖和致病性的影响被引量：14
- 2006年
- 采用黑松(Pinusthunbergii)无菌苗和愈伤组织的接种试验证明,松材线虫携带的洋葱伯克霍尔德氏菌(Burk-holderiacepacia)B619菌株的繁殖及对黑松的致病性受松材线虫的影响.进一步的研究表明,松材线虫的分泌物及死尸均可促进该菌株的生长繁殖和致病作用,且活线虫的促进作用比死尸更加显著,这可能是由于松材线虫提供给该菌株某些重要的营养物质.试验还发现,松材线虫分泌液经高温处理后对致病细菌繁殖的促进活性下降.
- 郭道森赵博光李荣贵
- 关键词：松材线虫病松材线虫繁殖
- 松材线虫携带细菌产生抑制真菌的物质被引量：1
- 2008年
- 研究发现松材线虫携带的两株荧光假单胞菌GcM5-1A、ZM4A和恶臭假单胞菌ZpB1-2A具有抑制真菌菌丝生长的作用。首先对供试的8个细菌菌株进行抑菌活性生物测定,从中筛选出3个具有抑菌活性的细菌菌株;接着对细菌培养液及滤液、死细菌及活细菌进行生物测定;最后对细菌代谢物的性质进行生物测定。实验证明抑制真菌菌丝生长的活性成分为松材线虫携带细菌的挥发性代谢产物。
- 杨雪云赵博光
- 关键词：松材线虫细菌抑菌挥发性
- 荧光假单胞菌GcM5-1A胞外木质素过氧化物酶的初步纯化及性质研究被引量：5
- 2010年
- 本文研究了松材线虫携带的荧光假单胞菌GcM5-1A的培养液经硫酸铵分级沉淀后,各组分中木质素过氧化物酶(LiP)的活性及各组分对黑松悬浮细胞的毒性;还对GcM5-1A菌株胞外LiP进行了初步纯化,并对纯化后的酶学性质进行了研究。结果表明:LiP活性主要出现在50%～70%沉淀组分中;0～20%沉淀组分和50%～70%沉淀组分对黑松悬浮细胞的毒性很强;GcM5-1A菌株培养液经硫酸铵分级沉淀以及DEAE-SepharoseFF两步纯化后,其LiP的比活力从0.81U/mg提高到21.30U/mg;其最适温度为35℃,最适pH为4.0;在15～35℃、pH6.0～9.0范围内,酶活力保持相对稳定;NH2OH·HCl和KCN对酶活力的抑制作用分别达到88%和57%,而NaN3对酶活力的抑制作用只有15%左右;吸收光谱显示该酶在406nm处有一个Soret峰,加入1mmol/LNa2S2O4后,吸光度出现了明显的下降,但Soret峰没有显著移动。
- 孔令营郭道森赵博光李荣贵
- 关键词：松材线虫荧光假单胞菌木质素过氧化物酶毒素
- 松材线虫携带一株荧光假单胞菌分泌毒素的初步研究被引量：5
- 2007年
- 本文研究了离体情况下松材线虫携带的致病菌一株荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens GcM5-1A)在LB、NB和PD三种培养基中的毒性,以及产生的毒素对黑松(Pinus thunbergii)切根苗和悬浮细胞的效应。结果显示,菌体在LB和NB培养液的毒性较高,其中LB培养液的毒性最高,且培养液的pH值为7时比pH值为5时毒性高,而该菌在PD培养基中几乎不产毒。细菌培养液经硫酸铵分级沉淀,得到了主要含有50 kDa蛋白的蛋白组分,该蛋白组分对黑松悬浮细胞和切根苗均有较高的毒性,并能改变黑松悬浮细胞细胞膜的透性,导致胞内可溶性糖和游离氨基酸外渗。
- 尹永华郭道森赵博光杜希华赵遵田李荣贵
- 关键词：松材线虫毒素
- 半胱氨酸蛋白酶抑制剂防治桑天牛的室内生测被引量：2
- 2011年
- 从双齿围沙蚕(Perinereis aibuhitensisG rube)cDNA文库中筛选出半胱氨酸蛋白酶抑制剂(CPI)的编码基因,将该编码基因转化到大肠杆菌Escherichia coliDH5α并实现胞外表达,得到转基因工程菌E.coliDH5α。对工程菌的杀桑天牛作用进行了研究,结果表明该工程菌对桑天牛成虫和幼虫较对照具有显著致死作用。
- 叶兼菱李荣贵郭道森赵博光
- 关键词：半胱氨酸蛋白酶桑天牛
- 松材线虫对其携带的一株致病细菌产毒的影响被引量：5
- 2005年
- 该文报道了以黑松细胞为材料的一种改进的细胞荧光染色显微生测法.用该方法测定了接种松材线虫虫体上分离到的荧光假单胞GcM5--1A菌株或该菌株和无菌松材线虫混合物接种后的愈伤组织水提物的毒性.结果表明,单独接种无菌松材线虫或单独接种该菌株后的愈伤组织水提液未表现出毒性;而接种无菌松材线虫与该菌株的混合物后的愈伤组织水提液与接种野生松材线虫后的愈伤组织水提液的毒性以及该菌株的NB培养液的无细胞滤液的毒性均很强,并且它们三者之间没有显著差异.该结果说明松材线虫在寄主组织中能促进细菌的产毒.向该菌株的NB培养液的无细胞滤液中添加松材线虫后测定其毒性,结果表明无菌松材线虫对其毒性并无显著影响.实验结果表明松材线虫本身不产生毒素,在荧光假单胞菌培养液的无细胞滤液中加入无菌松材线虫未能显著改变其毒性.
- 赵博光梁波赵林果徐梅
- 关键词：松材线虫致病细菌荧光染色毒素
- 新型手性N-烷基-3-蒎胺类化合物的合成及其抑菌活性的研究被引量：6
- 2009年
- 以(1S,5S)-(-)-α-蒎烯为原料合成了系列新型(1S,2S,3S,5R)-N-烷基-3-蒎胺类化合物.(-)-α-蒎烯经硼氢化氧化、重铬酸吡啶盐(PDC)氧化得到(1S,2S,5R)-(-)-3-蒎酮;在BF3?(C2H5)2O催化下(1S,2S,5R)-(-)-3-蒎酮与伯胺化合物反应生成Schiff碱,再经KBH4或NaBH4还原得到(1S,2S,3S,5R)-N-烷基-3-蒎胺类化合物.采用FT-IR,1HNMR,13CNMR和GC-MS等分析手段对合成所得(1S,2S,5R)-N-烷基-3-蒎烷亚胺和(1S,2S,3S,5R)-N-烷基-3-蒎胺类化合物的结构进行了表征.考察了(1S,2S,3S,5R)-N-烷基-3-蒎胺类化合物对大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、枯草芽胞杆菌(B.subtilis)、荧光假单胞菌(P.fluorescens)、白色念珠菌(C.albicans)、黑曲霉(A.niger)和米根霉(R.oryzae)等细菌和真菌的抑菌和杀菌活性.结果表明(1S,2S,3S,5R)-N-正庚基-3-蒎胺对真菌和细菌均表现出良好的杀菌和抑菌活性。
- 杨益琴李艳苹王石发谷文
- 关键词：抑菌活性
- 松材线虫携带的一株致病细菌对非寄主植物的毒性及对黑松LOX酶活性的影响被引量：2
- 2005年
- 在实验中发现松材线虫携带的一株致病菌株荧光假单孢菌Pseudomonas fluorescens GcM5-1A毒素液对玉米、小麦、木耳菜和油麦菜均有毒害作用.以松针为材料,用不同浓度的毒素液处理,测定不同时间内松针细胞脂氧和酶活性的变化.结果表明毒素原液处理的松针LOX活性在处理后的18 h达到高峰,随后逐渐下降;稀释5倍处理的松针LOX活性在6～12 h呈上升趋势,之后逐渐下降.
- 蒋继宏高甜惠陈凤美曹小迎
- 关键词：松材线虫
- 中日两国的松材线虫对雪松的致病力差异被引量：2
- 2007年
- 分别用日本和中国南京来源的松材线虫在室外苗圃地接种3年生雪松和黑松,发现源自两地的松材线虫对黑松都具有很强的致病力,但对雪松致病力差异较大。日本来源的松材线虫可致70%雪松枯死,而中国来源的松材线虫对雪松致病力很弱;同时发现松材线虫在所接种黑松中的存活繁殖数量远大于在雪松中的数量。此外笔者对雪松感染松材线虫后发病的症状进行了描述。
- 巨云为赵博光蒲昌慧
- 关键词：松材线虫雪松黑松致病力
