国家科技攻关计划(2003BA310A16) 作品数:24 被引量:132 H指数:7 相关作者: 王柯敏 谭蔚泓 何晓晓 羊小海 唐红星 更多>> 相关机构: 湖南大学 中南大学 更多>> 发文基金: 国家科技攻关计划 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 理学 生物学 医药卫生 一般工业技术 更多>>
分子导线聚合物在氰根阴离子检测中的应用研究 被引量:5 2005年 A new method, molecule wire polymer, was developed for the determination of cyanide based on the competitive reaction. The fluorescence of the molecule wire polymer is quenched due to ion-association with Pd 2+ and restored when cyanide was added into the system. The linear detection range is 5×10 -6—2×10 -4 mol/L and the detection limit is 1×10 -7 mol/L for cyanide under optimal conditions. The possible mechanism of the method was investigated by using absorption spectra. This approach provides a potential useful method for anion detection with a high sensitivity and selectivity. 翟秋阁 黄红梅 王柯敏 谭蔚泓 黄杉生 金燕 李邦锐关键词:荧光检测 分子信标用于p53 mRNA的体外定量检测 被引量:9 2006年 根据p53基因的序列设计并合成了能特异性检测p53mRNA的分子信标(MB),发展了一种快速定量测定细胞内总RNA提取物中p53mRNA的方法.采用鼻咽癌(CNE2)细胞系和经RNA干扰技术降低p53基因表达的CNE2-p53RNAi细胞系,抽提总RNA并用MB检测,验证了MB的检测对象是p53mRNA.将该方法应用于多种肿瘤细胞内p53基因表达水平的分析,表达变化趋势与经典的mRNA分析方法RT-PCR检测结果相符.在此基础上,用MB对5-氟尿嘧啶(5-Fu)处理的肺腺癌细胞(A549)进行了p53mRNA的体外定量检测,结果表明采用MB能够快速地获知该药物对细胞内p53mRNA表达影响的信息. 何丽芳 唐红星 王柯敏 谭蔚泓 刘斌 孟祥贤 李军 王炜关键词:分子信标 P53 RNA干扰 5-氟尿嘧啶 p33^(ING1b)对鼻咽癌细胞HNE1增殖的影响 被引量:3 2007年 背景与目的:作为ING1的一种主要表达产物,p33ING1b蛋白结合和稳定p53后诱导肿瘤细胞周期阻断或引起细胞凋亡。本研究通过建立高表达p33ING1b的鼻咽癌细胞HNE1模型,探讨p33ING1b对鼻咽癌细胞增殖影响及分子作用机制。方法:利用脂质体介导转染HNE1细胞,RT-PCR法筛选p33ING1b高表达的阳性克隆,绘制生长曲线检测细胞增殖速度,免疫组化法检测细胞中p53的表达分布,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测p53、p21、Stat3、C-myc和Cyclin D1蛋白水平。结果:转染ING1后p33ING1b表达水平显著升高,HNE1细胞增殖能力受到抑制,出现G0/G1期的阻滞、S期比例下降。细胞中Stat3、C-myc和CyclinD1表达水平显著降低,p53与p21表达水平上升。结论:p33ING1b可能通过促进HNE1细胞中p53和阻断Stat3两种不同信号传导通路抑制鼻咽癌细胞的增殖。 刘斌 王柯敏 谭蔚泓 唐红星 羊小海关键词:P33^ING1B STAT3 HNE1 一种简便快速的聚合酶活性实时检测新方法 被引量:3 2006年 基于双链DNA结合染料能特异嵌入双链DNA发出荧光的原理,发展了一种实时检测DNA聚合酶活性的简便方法.在检测过程中,聚合酶的聚合反应进程被实时转换为荧光信号,通过监测荧光强度的变化实时检测聚合酶的活性及药物对聚合酶活性的影响.该方法不需要对DNA进行放射性同位素标记和荧光标记,也不需要聚丙烯酰胺凝胶电泳和聚合酶链式反应,是一种简便、快速的聚合酶活性实时检测新方法,为研究抗肿瘤药物对聚合酶活性的影响提供了一种简捷方法,也将为相关疾病诊治和药物筛选提供一种新的思路. 栾瑞波 孟祥贤 羊小海 王柯敏 谭蔚泓 郭秋平关键词:聚合酶 实时监测 活性 基于脱氧核酶的新型铅离子荧光探针 被引量:15 2007年 将荧光猝灭基团修饰的17E脱氧核酶(17E DNAzyme)与荧光基团修饰的底物链通过6个脱氧核苷酸相连,得到了一种新型的对Pb2+敏感的荧光探针.由于DNAzyme与底物链发生分子内杂交,荧光基团与猝灭基团相互靠近,导致荧光猝灭.当Pb2+存在时,DNAzyme被激活,底物链被切断后释放出荧光基团标记的DNA片段,从而产生明显的荧光信号.据此可在常温下快速检测Pb2+,检测下限为10 nmol/L.在Zn2+,Mn2+,Co2+,Cd2+,Cu2+,Mg2+和Ni2+等多种二价金属离子中,除Zn2+,Mn2+和Cd2+略有干扰外,其它几种金属离子均无响应,表明该荧光探针对Pb2+具有良好的选择性. 王青 羊小海 王玲 王柯敏 赵翔关键词:铅 荧光 水溶性量子点荧光探针用于胃癌细胞相关抗原CA242的检测 被引量:12 2006年 基于量子点荧光探针对胃癌细胞相关抗原CA242进行了检测。首先在水溶液中直接合成性能优良的量子点荧光纳米颗粒,并在其表面成功修饰了羊抗小鼠IgG和聚乙二醇,制得功能化的水溶性量子点荧光探针,并利用探针对胃癌细胞相关抗原CA242进行检测,进一步与传统的基于荧光染料标记的免疫荧光分析方法进行了比较。实验结果表明:该功能化的探针能够有效地识别胃癌细胞相关抗原CA242,并且在光稳定性和灵敏度方面都较传统的基于荧光染料标记的免疫荧光分析方法有明显的改善,从而为CA242的相关检测以及胃癌的诊断与愈后判断提供了新的方法。 付志英 李朝辉 何晓晓 王柯敏 谭蔚泓 李慧敏关键词:胃癌细胞 抗原 光稳定性 基于分子信标荧光增强速率检测活细胞内p21 mRNA表达 被引量:1 2007年 根据肿瘤抑制基因p21序列设计合成分子信标,通过显微操作将其注入p21表达水平存在差异的两种鼻咽癌细胞内,以活细胞成像方式动态检测了分子信标进入鼻咽癌细胞后荧光信号的变化.p21分子信标注入两种细胞后,荧光信号均逐渐增强,约15min后达到最大值;注入细胞后4min内,细胞间荧光增强速率存在明显差异,该差异反映了p21mRNA表达水平的变化趋势,与常规逆转录PCR(RT-PCR)结果相符.在使用分子信标进行活细胞内mRNA表达水平的研究中,通过分析荧光增强速率的变化,可有效降低细胞内的酶的影响,提高检测结果的准确性. 唐红星 羊小海 王柯敏 谭蔚泓 刘斌 何丽芳 王炜关键词:分子信标 P21 鼻咽癌细胞 活细胞成像 基于pH纳米传感器的Hela细胞内酸化与细胞凋亡的相互关系研究 被引量:2 2006年 采用本研究小组发展的pH敏感染料异硫氰酸荧光素(FITC)和参比染料联钌吡啶(RuBpy)同时包埋的具有内参比功能的pH纳米传感器研究了抗癌药物硫酸长春新碱诱导的Hela细胞内酸化与细胞凋亡之间的相互关系.通过利用该纳米传感器对硫酸长春新碱诱导后的Hela细胞内pH变化的活体、原位、实时监测,发现在硫酸长春新碱诱导引起凋亡的Hela细胞中,细胞内的pH值由诱导前的7.11酸化为6.51,并且在一定的浓度和时间范围内,硫酸长春新碱诱导后细胞的酸化率与诱导药物的浓度和诱导时间成正相关关系.通过进一步比较硫酸长春新碱诱导后的细胞酸化率和细胞凋亡率,证实了经硫酸长春新碱诱导后,Hela细胞内酸化是Hela细胞凋亡的先发事件.这些研究结果的获得有望为利用硫酸长春新碱或其他抗癌药物干预细胞内pH变化以达到对肿瘤的治疗提供理论指导. 何晓晓 王燕 王柯敏 彭姣凤 刘芳 谭蔚泓关键词:硫酸长春新碱 HELA细胞 细胞凋亡 线性微珠阵列生物芯片用于乙型肝炎病毒基因分型的研究 乙型肝炎病毒可以分为8个亚型,快速、准确地识别病人的乙型肝炎病毒亚型对制定合适的治疗方案具有重要参考价值。中国是乙型肝炎发病率较高的国家之一,但是B、C、D三种乙型肝炎病毒亚型占患者的95%。我们利用本实验室所发展的线性... 文建辉 张何 王柯敏 羊小海 周雷激 左新兵 陈韵晴文献传递 线性微珠阵列生物芯片用于P53蛋白功能相关高突变位点的检测 线性微珠阵列生物芯片具有高通量检测及微量检测的双重特性,因此能广泛应用于癌症的微创诊断、稀有样品的高信息量检测以及单细胞水平上生物学信息的获取等等,将为生物医学研究及诊断领域提供一种快速、可靠、微量的检测工具,具有广阔的... 张何 王柯敏 羊小海 左新兵 文建辉 陈韵晴文献传递