国家自然科学基金(30901789)
- 作品数：4 被引量：10H指数：1
- 相关作者：张光波张学光李淑湘孙海洪高鑫更多>>
- 相关机构：苏州大学安徽医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金苏州市科技计划项目江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒介导的B7同源性3基因RNA干扰对胰腺癌细胞侵袭转移的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察敲减B7同源性3（B7一H3）基因对胰腺癌Patu8988细胞侵袭转移的影响。方法将人B7-H3基因的RNA干扰（RNAi）慢病毒载体感染胰腺癌Patu8988细胞，建立稳定低表达B7一H3的细胞株。细胞分为3组：空白对照组、阴性对照组和实验组。实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）和流式细胞仪检测B7．H3表达水平，Transwell小室检测细胞侵袭力。3组细胞皮下成瘤后，分别以1mm。的瘤组织移植入胰包膜下建立胰腺癌原位模型，6周后处死，观察肿瘤腹腔转移情况。结果RNAi慢病毒感染后，对B7-H3mRNA和蛋白敲减效率分别达91．6％和88．1％，Transwell实验中实验组每高倍视野过膜细胞数明显少于空白对照组[（37±9）个比（86±17）个，F=22．01，P〈0．05]。裸鼠模型中，实验组腹腔转移瘤重低于空白对照组[（0．26±0．13）g比（1．33±0．38）g，F=48．60，P〈0．01）。结论敲减B7-H3基因表达抑制了胰腺癌细胞的侵袭转移。
- 赵华张光波赵鑫
- 关键词：胰腺癌RNA干扰
- B7-H3Ig重组蛋白的真核表达及其对T细胞的作用
- 2013年
- 目的真核表达人B7-H3Ig重组蛋白,探讨B7-H3信号在T细胞中的作用。方法重叠PCR方法构建B7-H3Ig重组基因,进而获得重组逆转录病毒载体pGEZ-Term/B7-H3Ig,转染L929细胞建立L929/B7-H3Ig基因转染细胞株,纯化获得B7-H3Ig重组蛋白。体外激发型CD3单克隆抗体(mAb)刺激活化T细胞过程中加入B7-H3Ig,观察其对T细胞增殖以及IL-10与IFN-γ分泌的作用。结果 B7-H3Ig经Protein G柱纯化后纯度>90%,浓度达0.559 mg/mL。重组蛋白结合实验表明CD3 mAb刺激48 h后T细胞表面B7-H3受体表达达到高峰。B7-H3Ig以剂量依赖方式促进CD3 mAb诱导的T细胞体外增殖与IL-10和IFN-γ分泌。结论成功建立真核表达人B7-H3Ig基因转染细胞株,B7-H3Ig协同刺激T细胞增殖与IL-10和IFN-γ分泌。
- 陈礼文张光波朱一蓓张学光
- 关键词：基因转染
- 前列腺液中B7-H3分子表达对t-PSA灰区内炎性PSA升高的鉴别诊断价值被引量：1
- 2011年
- 目的探讨前列腺液（EPS）中B7-H3分子对血清t—PSA灰区（4～10ng／ml）内炎性PSA升高患者的鉴别诊断价值。方法选择2009年12月至2010年4月收治的全部慢性前列腺炎（CP）患者和t—PSA灰区内行前列腺穿刺活检患者共116例，年龄19—80岁，平均40岁。CP91例，年龄19～49岁，平均31岁。其中慢性细菌性前列腺炎（II型）11例、慢性炎症性非细菌前列腺炎（IIIA型）26例、慢性非炎症性非细菌前列腺炎（IIIB型）54例。t-PSA灰区内接受经直肠超声引导下前列腺穿刺活检患者25例，年龄62—80岁，平均71岁，t-PSA（7．21±2．60）ng／ml。其中穿刺病理结果阳性5例，Gleason评分6分2例、7分2例、8分1例；阴性20例，其中伴炎症细胞浸润11例。采用经直肠按摩法提取EPS。酶联免疫吸附法检测各组EPSB7-H3水平。健康男性对照11例，年龄24～46岁，平均30岁。既往无泌尿系不适症状及手术史。结果对照组、II型组、IIIA型组、IIIB型组EPS中B7—H3水平依次为（49．81±11．54）、（19．33±13．90）、（17．67±15．76）、（25．14±13．44）ng／ml，穿刺阳性组、阴性不伴炎症组、阴性伴炎症组分别为（26．30±16．32）、（30．23±18．42）、（10．11±5．42）ng／ml。CP各组EPSB7-H3水平均低于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。II型组和IIIA型组间差异无统计学意义（P〉0．05），但均显著低于IIIB型组，差异有统计学意义（P〈0．05）。穿刺阴性伴炎症组EPS中B7-H3水平与II型组、IIIA型组比较差异无统计学意义（P〉0．05），但显著低于穿刺阳性组及阴性不伴炎症组，差异有统计学意义（P〈0．05）。EPSB7-H3表达检测在t—PSA灰区内诊断炎性PSA升高患者的ROC曲线下面积为0．883（P=0．001），当EPSB7-H3值≤16．24ng／ml时，诊断敏感性为78．6％，特异性为81．8％。结论EPSB7-H3表达检测可能成为t-PSA灰区内鉴别诊断炎�
- 魏雪栋侯建全张光波袁和兴黄玉华李琛
- 关键词：前列腺特异抗原前列腺液B7-H3
- 人可溶性B7-H3酶联试剂盒的研制及在肝病患者血清中水平的检测被引量：8
- 2012年
- 目的:建立定量检测人的可溶性B7-H3(sB7-H3)酶联检测试剂盒,并分析肝病患者外周血中sB7-H3水平及其临床意义。方法:在已获得2株识别位点不同的小鼠抗人B7-H3单克隆抗体(4H7和2E6)基础上,采用单抗4H7为包被抗体,以经生物素标记的抗体2E6为检测抗体,以重组人可溶性B7-H3为标准品,建立可溶性B7-H3分子的酶标检测方法。在此基础上对健康献血者和不同肝病患者的血清样本进行了检测并分析其临床意义。结果:研制了sB7-H3酶联检测试剂盒,检测的线性范围是8.192～2 000 ng/L,批内、批间变异系数分别为3.35%和6.97%。酶标检测板在4℃放置1个月,变异系数(CV%)<±8.6,回收率为94%～117%,特异性试验显示无交叉反应,提示该检测试剂盒具有良好的灵敏度、稳定性和特异性。用该试剂盒分析不同肝病患者外周血sB7-H3水平后发现,(1)乙肝患者以及乙肝合并肝硬化或肝癌患者与健康对照组之间并不存在差异(P>0.05);(2)重症肝炎患者血清B7-H3水平低于健康对照组(P=0.0183);(3)血吸虫性肝硬化患者血清B7-H3水平显著高于健康对照组(P<0.01)。结论:建立了灵敏、特异的人sB7-H3酶联检测试剂盒,对肝病患者检测的结果表明,不同的肝病患者外周血sB7-H3表达水平不同,显示该试剂盒具有潜在的应用价值。
- 李淑湘张光波孙海洪高鑫张学光
- 关键词：ELISA肝病
