公安部应用创新计划(2005YYCX57136)
- 作品数：16 被引量：107H指数：7
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- 相关机构：广州市刑事科学技术研究所南方医科大学广州市公安局白云区分局更多>>
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- 相关领域：医药卫生政治法律生物学更多>>
- 改良IPEP法用于痕量DNA检测的实验研究
- 2007年
- 目的探讨改良扩增前引物延伸（IPEP）法对痕量DNA样本STR检测分型的效果。方法用改良IPEP法对痕量样品DNA进行全基因组扩增（WGA），扩增产物用实时荧光定量PCR技术定量、用AmpFLSTR Indentifiler试剂盒作基因型检测。结果该方法可增加模板DNA约200～1100倍。基因组DNA不低于0．025ng时，可获得15个STR基因座和Amelogenin性别基因座的分型结果。基因组DNA0．01～0．025ng时，可获得9个以上基因座的分型结果。结论改良IPEP法可有效提高痕量DNA样本STR分型检验的灵敏度，有较好的实用价值。
- 陈玲刘超杨电李越胡慧英王慧君
- 关键词：法医物证学全基因组扩增
- Chelex-100法提取脱落细胞检材DNA的实时定量研究被引量：12
- 2009年
- 目的研究脱落细胞检材DNA检验的简便有效的提取方法。方法对76份包括帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水在内的7种脱落细胞检材采用Chelex-100法提取DNA,在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量,同时用Identifiler复合扩增系统扩增,在ABI3130遗传分析仪上进行STR分型。结果从帽子(头套)中获得的脱落细胞DNA平均含量为8.31ng,眼镜擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.20ng,牙刷上获得的脱落细胞DNA平均含量为49.40ng,剃须刀擦拭物上获得的脱落细胞DNA平均含量为6.92ng、梳子擦拭物上获得的的脱落细胞DNA平均含量为10.68ng,口香糖的脱落细胞DNA平均含量为16.30ng,羊水的脱落细胞DNA平均含量为320ng。以上76份检材性别及10个以上STR位点分型成功率为75.8%。结论从帽子、眼镜、牙刷、剃须刀、梳子、口香糖、羊水等检材提取的脱落细胞可用Chelex-100法提取DNA作STR分型。
- 杨电刘超徐曲毅胡慧英
- 关键词：脱落细胞DNA定量
- 茚三酮薰显法在人体接触细胞发现采集中的应用被引量：5
- 2012年
- 目的研究茚三酮薰显法在人体接触细胞发现采集中的应用价值。方法对衣服、口罩、棍棒等可疑人体接触细胞检材258份,采用1%茚三酮溶液进行显色反应,然后用磁珠法提取DNA,并进行DNA定量和STR检测。结果可疑人体接触细胞检材中有172份显色反应阳性,其中115份检出的DNA浓度在0.02ng/μL以上并检出6个以上STR基因座的基因型,检出率为66.86%;显色反应阴性的86份检材均未检出DNA浓度或成功进行STR基因型。结论茚三酮薰显技术可用于指导案件人体接触细胞的发现采集。
- 杨电刘超徐曲毅张翼
- 关键词：法医遗传学STR分型
- 全基因组扩增技术最新进展及其法医学应用现状被引量：5
- 2007年
- 微量模板DNA的检测，是很多领域迫切需要解决的一个难题。因为DNA量不足，用现有的技术手段常无法检测成功。全基因组扩增技术可对非常微量的DNA进行均衡的扩增获得大量DNA，故被认为是目前解决这一难题的一种基本方法，已被广泛用于法医学、单基因遗传病的诊断及疾病基因的分析等领域研究，并取得了良好的效果。现对这一技术的最新研究进展及其在法医学方面的应用现状作一综述。
- 陈玲刘超杨电王慧君
- 关键词：全基因组扩增法医学
- Chelex法和两种磁珠法提取接触DNA效果的比较被引量：20
- 2012年
- 目的比较Chelex法、DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法对接触DNA的提取效果。方法将稀释为10ng、100ng的标准品DNA,分别采用Chelex法、DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法处理;对30例烟蒂和30例牙刷分别采用Chelex法、DNA IQ磁珠法和EQ国产磁珠法提取DNA,然后进行PCR定量和STR检测。结果Chelex法对DNA的提取无损失,DNA IQ磁珠法、EQ国产磁珠法对DNA的提取均有不同程度的损失;烟蒂、牙刷等检材采用Chelex法提取的接触DNA量和IPC CT值显著高于IQ磁珠法、EQ国产磁珠法,但STR检验成功率却低于IQ磁珠法、EQ国产磁珠法。2种磁珠法提取的DNA量、IPC CT值和STR检验成功率无显著性差异。结论污染轻、杂质少的接触DNA检材,用Chelex法提取最为方便快捷;IQ磁珠法、EQ国产磁珠法更适合污染接触DNA检材的提取及自动化操作。
- 杨电张丽萍刘超徐曲毅
- 关键词：法医物证学DNA提取DNA定量STR分型
- 二次消化结合磁珠法提取腐败组织DNA被引量：4
- 2011年
- 目的研究二次消化结合磁珠法对3种腐败组织DNA的提取效果。方法采用二次消化结合磁珠法对用常规磁珠法提取DNA失败的91例高度腐败尸体的软骨、指（趾）甲、关节囊组织提取DNA,QuantifilerTM试剂盒进行DNA定量,用SinofilerTM或MinifilerTM试剂盒进行STR检测分型。结果 91例高度腐败的软骨、指（趾）甲、关节囊组织提取的DNA质量浓度在0~0.225ng/μL,其中62例DNA质量浓度在0.020 ng/μL以上的检材成功获得9个以上STR基因座分型图谱,检验成功率为68.13%。结论二次消化结合磁珠法可提高3种腐败组织DNA的STR检验成功率。
- 杨电刘超刘宏
- 关键词：法医遗传学软骨指(趾)甲关节囊磁珠法
- 2种陈旧骨骼、牙齿DNA纯化方法的比较被引量：6
- 2012年
- 目的比较有机法+QIAquick纯化法和DNA IQ磁珠法对陈旧骨骼和牙齿DNA的纯化效果。方法选择10份陈旧骨骼和12份牙齿样本,进行消化后分别采用有机法+QIAquick纯化法和DNA IQ磁珠法进行提取纯化,进行DNA定量后用SinofilerTM试剂盒进行检测。结果 2种方法纯化的骨骼、牙齿DNA的IPC CT值无显著差异。有机法+QIAquick纯化法纯化的骨骼、牙齿DNA平均浓度分别为0.180ng/μL±0.068ng/μL和0.132ng/μL±0.027ng/μL,所有样品均获得全部基因分型。DNA IQ磁珠法纯化的DNA平均浓度分别为0.038ng/μL±0.028ng/μL和0.036ng/μL±0.007ng/μL,有5份骨骼和6份牙齿样本仅获得部分基因分型或未能分型。结论有机法+QIAquick纯化法对陈旧骨骼、牙齿DNA的纯化效果优于DNA IQ磁珠法。
- 杨电刘超李振营胡慧英陈向红黄永华李中红
- 关键词：法医物证学骨骼DNA
- 多重置换扩增技术用于法医学微量DNA检测效果被引量：7
- 2008年
- 目的探讨多重置换扩增(MDA)技术对法医学微量DNA样品STR检测分型的效果。方法用MDA技术对不同模板量DNA进行全基因组扩增(WGA),扩增产物用实时荧光定量PCR技术定量、用Profiler PlusTM试剂盒检测基因型。结果该方法可对模板DNA增加104～106倍。1ng样品DNA的MDA产物可获得9个STR基因座和Amelogenin性别基因座的准确分型结果;低于0.1ng的样品DNA经MDA扩增后,基因座检出数增加,但可见等位基因不平衡或丢失现象。结论MDA技术可有效增加DNA模板量和提高微量DNA分型效果。但样品DNA量低于0.1ng时,MDA产物的STR分型结果判读须慎重。
- 陈玲刘超王慧君邱平明
- 关键词：多重置换扩增全基因组扩增
- 国产磁珠结合自动化工作站批量提取生物检材DNA的应用被引量：16
- 2009年
- 目的建立国产磁珠结合自动化工作站批量提取案件中生物检材DNA的方法。方法采用国产磁珠结合Bio-Robert Universal System自动化工作站对案件中常见的生物样本进行DNA提取,检测Identifiler系统16个STR基因座,在ABI3130XL遗传分析仪上进行STR分型。其中210份样品同时在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量。结果9100份10类生物检材应用国产磁珠结合自动化工作站,大部分可提取到足够的DNA进行STR检验。STR检验成功率最高的为口腔拭子、肌肉,达100%,接触细胞检材的成功率较低,为50.0%。结论国产磁珠结合自动化工作站可用于案件中常见的大部分生物样本的DNA提取。
- 杨电刘宏刘超武清毓李越刘长晖马文丽
- 关键词：法医物证学DNA定量
- 微量口腔脱落细胞检材的DNA检验被引量：14
- 2008年
- 目的寻求提高微量口腔脱落细胞检材的DNA检验成功率的简便有效的提取方法。方法对不同载体上的100份微量口腔脱落细胞检材采用小体积Chelex-100法提取DNA,在ABI7500型荧光定量PCR仪上进行定量,同时用IdentifilerTM复合扩增系统扩增,在ABI3130遗传分析仪上进行STR分型。结果从25根饮料吸管上提取的DNA量在0.72～116.7.8ng,16个水杯杯缘提取的DNA量在2.15-142.5ng,31个饮料瓶(罐)口提取的DNA量在1～34.65ng,10根筷子上提取的DNA量在3.35～26.6ng,12个果核中提取的DNA量在0.294～21.4ng,6份吃剩的骨头中提取的DNA量在0.88～5.88ng。100份检材性别及9个以上STR位点分型成功率平均为59.38%。除了使用者的个人原因外,检材的提取送检方式、检材的质地、饮料的性质对提取的DNA量有显著影响,是否加蛋白酶K对提取的DNA量无显著影响。结论采用小体积Chelex-100法可对60%左右的微量口腔脱落细胞检材提取DNA进行STR分型。
- 杨电刘超徐曲毅胡慧英刘宏
- 关键词：口腔脱落细胞DNA定量
