国家高技术研究发展计划(2006AA10A210)
- 作品数:32 被引量:153H指数:8
- 相关作者:邱德文曾洪梅杨秀芬袁京京赵秀云更多>>
- 相关机构:中国农业科学院植物保护研究所华中农业大学南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 极细链格孢蛋白激发子诱导棉花抗病性及相关酶的变化被引量:12
- 2007年
- 张志刚邱德文杨秀芬曾洪梅袁京京官春云
- 关键词:蛋白激发子棉花黄萎病生化机制
- 苏云金芽胞杆菌对云斑天牛杀虫活性的体外检测被引量:1
- 2010年
- 模拟自然界中云斑天牛Batocera horsfieldi(Hope)成虫的生活状态,建立室内人工饲养及生测方法,对苏云金芽胞杆菌(Bt)的杀虫活性进行测定。将苏云金芽胞杆菌菌悬剂涂抹在野蔷薇枝条表面,饲喂云斑天牛成虫,20 d后统计死亡率、体质量变化及产卵数量。在室内测定了80株苏云金芽胞杆菌的活性,通过1次初筛和2次复筛,筛选到1株对云斑天牛成虫有较高致死率的菌株ZQ-51。该菌株处理云斑天牛成虫后平均死亡率为53.33%,平均体质量减少率和平均产卵减少率分别是5.67%和12.48%,与对照差异均极显著。从感染死亡的成虫肠道中重新分离了该菌株,并验证分离的菌株与ZQ-51具有相似的形态特征和杀虫活性,表明苏云金芽胞杆菌可通过云斑天牛取食进入肠道而发挥杀虫作用。
- 逯晋忠李菁菁张献芳祁髙富陈京元赵秀云
- 关键词:苏云金芽胞杆菌云斑天牛杀虫活性
- 水稻条斑病细菌hrp基因诱导表达系统的建立被引量:10
- 2007年
- 水稻条斑病细菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xooc)决定在非寄主植物上激发过敏反应(hypersensitive response)和在寄主水稻上具致病性(pathogenicity)的hrp基因簇是诱导表达的。为研究hrp基因的功能,利用hpa1和hrpX基因的启动子与gfp基因进行融合,构建了hrp基因诱导表达系统。绿色荧光蛋白表达揭示,Xooc的hrp基因在营养丰富的NB培养基上不能有效表达,在hrp诱导培养基XOM3上可有效表达。以hrpX和hrpG突变体为参照,RT-PCR研究结果提示,Xooc野生型菌株hpa1基因在NB上不能有效表达,在XOM3培养基上可有效表达。相应地,hrpX突变体中hpa1基因不能被诱导表达,而在hrpG突变体中hpa1基因转录表达水平低于野生菌。研究结果还证实,水稻悬浮细胞能高效诱导Xooc的hrp基因表达。Xooc hrp基因诱导表达系统的建立为研究hrp基因功能、发掘T3SS效应分子以及开展Xooc致病性研究奠定了基础。
- 肖友伦李玉蓉刘之洋向勇陈功友
- 关键词:HRP基因水稻RT-PCR
- 水稻条斑病菌hrpX基因调控hpa1基因的表达
- 水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xooc)是稻黄单胞种下两个致病变种之一,通过气孔侵入水稻叶片,定殖在水稻薄壁细胞内,繁殖受叶脉限制,形成条斑症状,引发水稻细菌性条斑病(Bacte...
- 李玉蓉肖友伦杨娟邹丽芳赵静雅邹华松陈功友
- 文献传递
- 激发素结构研究进展被引量:2
- 2010年
- 激发素(elicitins)是一类能诱导植物产生防卫反应的蛋白质类激发子。综述概述了有关激发素的结构,特别是激发素-固醇复合体结构的研究进展,并对激发素与配体固醇结合的分子机制,以及激发素的结构与生理功能之间的关系进行了探讨。
- 李唐曾洪梅邱德文
- 关键词:蛋白质结构与功能
- 棉铃虫HaHR3基因的克隆及其植物RNA干扰载体的构建被引量:5
- 2010年
- 采用RT-PCR方法克隆了棉铃虫蜕皮调节转录因子HaHR3基因,该基因含有1671 bp的完整开放阅读框。序列分析表明,HaHR3与多种昆虫蜕皮调节转录因子高度同源。利用生物信息学方法对HaHR3的结构特征进行分析发现,HaHR3具有蜕皮调节转录因子超家族的典型特征,包括两个锌指结构和一个DNA结合结构域,不存在信号肽序列和N糖基化位点。选择HaHR3基因的部分片段构建了RNAi中间载体pRNAi1017-HaHR3sa,再将HaHR3正反向序列亚克隆至植物表达载体pCAMBIA2300-35S-OCS,成功构建了由35s启动子调控的HaHR3基因的正反向RNA干扰载体pCAM-RNAi-HaHR3。这一载体的成功构建为下一步通过植物介导的RNA干扰技术防治棉铃虫打下了坚实的基础。
- 尹富仕曾洪梅张雨良邱德文杨秀芬王立梅
- 关键词:棉铃虫RNA干扰
- 蛋白酶产生菌的化学诱变及酶学性质被引量:1
- 2010年
- 对1株产蛋白酶的枯草芽胞杆菌(Z5)进行化学诱变,筛选得到1株产较高酶活性、大分子质量蛋白酶的菌株。检测该蛋白酶对底物明胶的分解能力,发现该蛋白酶的分子质量约为100 ku,还原剂巯基乙醇对其活性的影响较大。在不同温度、不同pH值处理该蛋白酶后,用茚三酮法测定酶活性,发现该蛋白酶催化反应的最适pH为6,最适温度为50℃,并且该蛋白酶有较好的热稳定性,70℃处理10 min仍能保留50%左右的酶活性。由于此蛋白酶在分子质量及最适pH方面均不同于已报道过的枯草芽胞杆菌蛋白酶,推测其为一种新型的蛋白酶。
- 马宏宇李菁菁祁高富喻子牛赵秀云
- 关键词:枯草芽胞杆菌蛋白酶化学诱变酶学性质
- 极细链格孢菌peaT1基因在毕赤酵母中的表达与功能分析被引量:8
- 2009年
- 建立了在毕赤酵母(Pichiapastoris)中分泌表达PeaT1蛋白的技术。将来源于极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)的基因peaT1亚克隆至酵母分泌型表达载体pPIC9K,构建了重组表达载体pPIC9K-peaT1,分别用SalI或BglII酶切线性化后电击转入毕赤酵母GS115菌株中,经MD平板筛选、PCR鉴定获得整合有外源基因的重组菌株。在α-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,PeaT1在酵母中大量表达并分泌到胞外,SDS-PAGE检测表明表达蛋白的表观分子量约为35kD。表达蛋白上清稀释液能诱导烟草产生对TMV的抗性,其枯斑数抑制率可达到30.37%。每升表达上清液经超滤浓缩和离子交换层析可纯化目的蛋白16.13mg,该纯化蛋白能显著地促进小麦幼苗的生长。
- 刘延锋曾洪梅玉山江杨秀芬毛建军邱德文
- 关键词:毕赤酵母
- 灰葡萄孢菌激活蛋白PEBC2的生物功能被引量:10
- 2008年
- 通过沸水浴、离心、阴离子交换层析等方法,从灰葡萄孢菌Botrytis cinerea BC-4-2-2-1菌丝体中分离纯化出一种激活蛋白,命名为PEBC2,经SDS-PAGE银染显示呈单一条带,相对分子量约为14kD。该激活蛋白能显著提高小麦种子的发芽率,促进小麦幼苗生长,增强小麦的抗旱性和番茄对灰霉病的抗性。经激活蛋白处理后小麦发芽率从75.00%提高到98.33%,处理7、9、11天时株高分别比对照增加了17.07%、23.05%和17.19%,幼苗抗旱综合系数从36.53提高到57.45;该激活蛋白对番茄灰霉病的诱抗效果达60.09%。
- 张云华邱德文张立军杨秀芬曾洪梅袁京京
- 关键词:灰葡萄孢菌纯化生物活性
- 1株解淀粉芽孢杆菌发酵条件的优化及其对油茶炭疽病的防效被引量:29
- 2011年
- 以从水稻根部分离到的1株解淀粉芽孢杆菌WH1为材料,通过红外吸收光谱对其发酵液中的抗菌活性物质进行了鉴定,并通过平板抑制试验和离体叶片防治试验,研究其发酵液对油茶炭疽病的抑制作用。结果表明:WH1发酵液中的抗菌活性物质为脂肽,该成分能够使油茶炭疽病菌丝畸形,高稀释倍数的发酵液对离体油茶叶片上的炭疽病仍然有显著的防效。以WH1作为防治油茶炭疽病的生物农药,通过Plackett-Burman设计和田口设计对WH1的发酵条件进行了优化,使抗菌脂肽产量大幅上升。在3、20、500 L的发酵罐上进行放大,控制溶氧在30%以上,成功的完成250 mL摇瓶到500 L罐的放大。500 L罐上培养48 h后发酵液10倍稀释液在PDA平板上的抑菌率为50.8%,对发酵液进行喷雾干燥后药效存留率为86.2%。
- 信珊珊祁高富朱发银逯晋忠李菁菁王圣英柳艳军陈京元王义勋赵秀云
- 关键词:解淀粉芽孢杆菌脂肽油茶炭疽病抗菌活性生物农药