江苏省社会发展科技计划(BS2005620)
- 作品数：5 被引量：32H指数：3
- 相关作者：侯建全温端改杨慎敏王小林陈剑华更多>>
- 相关机构：苏州大学南通市肿瘤医院更多>>
- 发文基金：江苏省社会发展科技计划江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Survivin小分子干扰RNA对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响被引量：13
- 2008年
- 背景与目的:膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,通常与体内某些基因突变导致细胞周期改变和抗凋亡机制有关。凋亡抑制蛋白家族(IAPs)的新成员Survivin,通过诱导细胞增殖和抑制细胞凋亡参与了人类多种肿瘤的发生,其中包括膀胱癌。本研究探讨转染靶向survivin的小分子干扰RNA(smallinterfering RNA,siRNA)对膀胱癌生物学行为的影响。方法:设计、合成一对survivin编码基因序列特异的siRNA,用脂质体包裹转染T24膀胱癌细胞,分成不同的浓度组(50～200nmol/L);鼠异位膀胱肿瘤模型中瘤内注射不同剂量的siRNA(5!g和50!g)。分别于体外和体内观察siRNA对膀胱癌生物学行为的影响。结果:survivin编码基因序列特异性siRNA能有效下调survivin基因表达水平,最大效应浓度为100nmol/L,此时survivin表达水平下调了75.91%,并显著的抑制了细胞增殖,抑制率达55.29%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。同时,细胞凋亡率亦由2.8%增加至45.70%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。裸鼠移植瘤内重复多次注射50!g survivin-siRNA能够明显抑制肿瘤生长,与对照相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:survivin-siRNA能显著下调膀胱癌细胞survivin基因表达水平,促进细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖。
- 王小林侯建全温端改何军
- 关键词：SURVIVIN基因膀胱肿瘤
- Survivin基因对膀胱癌细胞体内生长的影响被引量：5
- 2007年
- 目的探讨通过RNA干扰下调Survivin基因对膀胱癌细胞在体内生长的抑制作用。方法构建Survivin基因shRNA真核表达载体pRNAT-U6．1／neo-survivin，转染人膀胱癌细胞124并获得稳定的单克隆细胞。观察裸鼠皮下移植瘤内注射靶向Survivin的siRNA及稳定转染pRNAT-U6．1／neo-survivin对膀胱癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响，肿瘤组织行免疫组织化学检测Survivin蛋白表达。结果经鉴定成功构建靶向Survivin的shRNA真核表达载体pRNAT-U6．1／neo-survivivn，稳定转染重组质粒的124细胞Survivin mRNA表达下调达92．86％；瘤内注射50mg siRNA-Survivin能够明显抑制肿瘤生长，与对照比较差异有统计学意义（P〈0．01）；未转染组在20-29d均发展为体积超过2000mm^3的肿瘤，转染组在43d时形成3个体积不超过62．5mm^3肿瘤；免疫组织化学显示转染组肿瘤Survivin蛋白表达明显降低。结论裸鼠移植瘤内注射siRNA-survivin明显抑制了肿瘤的生长；靶向Survivin的shRNA持久地抑制了膀胱癌124细胞在体内的生长；Survivin基因可作为膀胱癌基因治疗的良好靶点。
- 杨慎敏温端改侯建全何军王小林岑建农陈子兴
- 关键词：SURVIVIN短发夹状RNA膀胱肿瘤RNA干扰
- Survivin及其异构体在膀胱癌中的作用及研究进展
- 2008年
- survivin在膀胱癌的发生、发展中起着重要作用，并与其病理分级．临床分期和预后关系密切，近几年发现survivin有多种异构体存在，并且在肿瘤的进展中发挥着重要作用。因此，本文就survivin及其异构体在膀胱癌等肿瘤中的作用进行综述，进一步了解其结构和功能，为今后的相关研究提供方便。
- 何雪峰温端改(审校)侯建全(审校)何军(审校)
- 关键词：膀胱肿瘤半胱氨酸蛋白酶类
- 原位膀胱癌动物模型的建立及应用被引量：15
- 2007年
- 背景与目的:表浅性膀胱癌术后膀胱灌注丝裂霉素等药物进行化疗,肿瘤仍有较高的复发率。有研究报道往膀胱内灌注小型干扰RNA(siRNA)可抑制裸鼠膀胱肿瘤生长。本研究目的是建立荷人膀胱癌的原位动物模型,通过磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)监测肿瘤生长过程,并利用此模型评价靶向Survivin的干扰质粒对丝裂霉素的增效作用。方法:直视下经尿道机械损伤BALB/c裸鼠膀胱粘膜,将人膀胱癌细胞T24经尿道种植于25只裸鼠膀胱,建立荷人膀胱癌原位动物模型。以钆-二乙三胺五乙酸作为膀胱造影剂,用MRI监测肿瘤的生长,同时取裸鼠膀胱组织标本行HE染色进行病理学检查。同法建立膀胱癌裸鼠动物模型18只,分为对照组、丝裂霉素组和联合组3组,每周两次膀胱灌注,联合组为靶向Survivin的干扰质粒和丝裂霉素交替用药;膀胱灌注6次后荷瘤膀胱称重。结果:25只裸鼠在种植T24细胞后均形成膀胱肿瘤。种植后7天裸鼠膀胱MRI检查无明显变化,l4、21、28天MRI检查均可发现膀胱不同程度的充盈缺损,MRI图像与肿瘤实际大小吻合。病理检查显示:种植后7天,肿瘤生长于裸鼠膀胱粘膜或浅层肌肉;14～28天局限于肌层;35天时侵及浆膜层。丝裂霉素组和联合组的抑瘤率分别为33.45%、56.34%,联合组优于丝裂霉素组(P<0.05)。结论:成功建立了裸鼠原位膀胱癌动物模型,肿瘤生长基本模拟了人膀胱癌的发生、发展过程;MRI检查可作为对裸鼠膀胱原位肿瘤动态观察的可靠方法。靶向Survivin的干扰质粒增加了丝裂霉素的抗肿瘤作用。
- 杨慎敏温端改侯建全何军岑建农陈剑华
- 关键词：膀胱肿瘤动物模型磁共振成像SURVIVIN裸鼠
- 靶向生存素基因的shRNA抑制膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长
- 2007年
- 目的观察稳定转染靶向生存素（survivin）基因短发夹RNA（shRNA）对膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法将靶向生存素基因的shRNA真核表达载体转染人膀胱癌细胞T24并获得稳定的单克隆细胞,实时定量PCR检测转染后生存素mRNA表达的变化;分别将转染和未转染细胞种植于裸鼠皮下,观察肿瘤生长情况;通过免疫组化检测肿瘤组织生存素蛋白表达的差异。结果RNA干扰使T24细胞生存素表达下调92.86%;未转染组在20～29d均形成体积超过2000mm3的肿瘤,转染组在43d时经病理证实3只裸鼠形成肿瘤,最大体积62.5mm3;免疫组化显示转染组形成的肿瘤生存素蛋白表达明显减弱。结论靶向生存素基因的shRNA明显下调了生存素表达,并抑制了膀胱癌细胞T24裸鼠移植瘤的生长。
- 杨慎敏温端改侯建全何军岑建农
- 关键词：生存素核糖核酸干扰膀胱癌
