四川省教育厅自然科学科研项目(2004A115)
- 作品数：5 被引量：23H指数：2
- 相关作者：陈祥贵杨潇张晟罗静戴清源更多>>
- 相关机构：西华大学安徽工程科技学院更多>>
- 发文基金：四川省教育厅自然科学科研项目四川省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- STAT5b靶控报告基因检测胰岛素受体激酶活性细胞模型的建立被引量：2
- 2009年
- 目的建立方便快捷的检测胰岛素受体激酶活性的方法,为筛选抗糖尿病的药物提供一种新的细胞模型。方法用克隆有胰岛素受体基因、STAT5b基因和STAT5响应元件靶控的荧光素酶报告基因的质粒共转染CHO细胞,RT-PCR检测外源基因的表达。转染的细胞经胰岛素处理,考察胰岛素对报告基因表达的剂量和时间效应,并采用AG1024处理和PTP1B基因共转染考察模型的特异性。结果经瞬时共转染的CHO细胞中检测到胰岛素受体和STAT5b基因表达,转染细胞中荧光素酶表达受胰岛素诱导且呈浓度依赖性和时间依赖性,最高诱导表达率为6.25倍。胰岛素受体酪氨酸激酶特异性抑制剂AG1024和酪氨酸磷酸化酶1B(PTP1B)可特异地阻断胰岛素的对荧光素酶表达的诱导效应。结论该细胞模型通过报告基因表达检测胰岛素受体激酶活性,灵敏性高、特异性强,在胰岛素受体激动剂和增敏剂的筛选方面具有应用价值。
- 戴清源陈祥贵杨潇罗静
- 关键词：STAT5B报告基因细胞模型
- 基于细胞水平的2型糖尿病药物筛选模型研究进展被引量：1
- 2006年
- 杨潇陈祥贵代娟
- 关键词：药物筛选模型2型糖尿病细胞水平代谢紊乱性疾病抗糖尿病药物三多一少
- 基于报告基因的胰岛素受体蛋白酪氨酸激酶激动剂细胞筛选模型的建立被引量：2
- 2009年
- 目的建立用于大规模筛选胰岛素受体蛋白酪氨酸激酶(IRTK)激动剂的细胞模型。方法将含有编码胰岛素受体(IR)基因、转录激活因子5B(STAT5B)基因和STAT5应答元件调控的荧光素酶基因的质粒瞬时共转染仓鼠卵巢(CHO)细胞,人肝癌细胞HepG2和小鼠骨骼肌成肌细胞C2C12,将具有较高的胰岛素诱导表达荧光素酶活性的细胞经G418筛选,获得具有胰岛素诱导表达荧光素酶活性的细胞克隆。RT-PCR检测外源基因的表达的稳定性。荧光素酶活性分析和MTT法检测胰岛素处理后荧光素酶诱导表达的量效关系,以及AG1024和AG490处理后胰岛素诱导荧光素酶表达的特异性。并在96孔板上优化荧光素酶的检测条件。结果共转染的CHO细胞较HepG2和C2C12表现出更高胰岛素诱导的荧光素酶活性,经G418筛选得到一株具有较高诱导表达率的细胞克隆。RT-PCR表明,该细胞克隆表达外源胰岛素受体和STAT5B。该细胞中荧光素酶的诱导表达对于胰岛素具有剂量依赖性。IRTK抑制剂AG1024能阻断胰岛素诱导荧光素酶的表达,而Jak激酶抑制剂AG490无此作用。在96孔板上的荧光素酶的优化检测条件为:接种量每孔15×103个细胞,受试物诱导表达8h,Promega荧光素酶检测试剂按推荐量进行4倍稀释使用。结论在转基因CHO细胞中,IRTK的激活能灵敏、特异地诱导荧光素酶的表达。因此,该细胞模型可用于IRTK激动剂的高通量筛选。
- 杨潇陈祥贵张晟
- 关键词：药物筛选
- 降血糖植物皂苷研究进展被引量：18
- 2007年
- 综述了近年来从植物中发现的具有降血糖功能的皂苷类化合物的研究进展。按化学结构分为三萜类皂苷和甾体类皂苷分别进行概述。
- 张晟陈祥贵
- 关键词：降血糖三萜皂苷甾体皂苷糖尿病
- 胰岛素受体非肽小分子激动剂的研究进展
- 2009年
- 已发现一些非肽小分子物质可模拟胰岛素的作用激活胰岛素受体介导的信号转导通路,为开发新型抗糖尿病药物提供了新的策略。该文综述了近年来国内外胰岛素受体非肽小分子激动剂方面的研究进展,讨论了从中药中筛选胰岛素受体非肽小分子激动剂的前景。
- 罗静陈祥贵
- 关键词：胰岛素受体中药
