重庆市杰出青年科学基金(CSCT)
- 作品数：6 被引量：99H指数：4
- 相关作者：杨锡强赵晓东张志勇许峰安云飞更多>>
- 相关机构：重庆医科大学西安市儿童医院重庆理工大学更多>>
- 发文基金：重庆市杰出青年科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”重庆高校创新团队建设计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 严重联合免疫缺陷高危儿羊膜腔穿刺产前诊断7例临床分析被引量：4
- 2011年
- 目的探讨羊膜腔穿刺结合基因序列和染色体核型分析在严重联合免疫缺陷(SCID)高危儿产前诊断中的意义。方法 2008-2010年重庆医科大学附属儿童医院基因诊断明确的7例SCID患儿,其中6例X连锁SCID、1例Omenn综合征。追问病史,建立7个SCID家系图谱,确诊20个异常基因携带者。对其中7个携带异常基因的高危孕妇于孕18～20周经羊膜腔穿刺抽取羊水,部分羊水经离心后,提取羊水细胞DNA,经PCR扩增IL-2RG或RAG1基因,扩增PCR产物进行双向序列重复测定。此外对羊水中胎儿脱落细胞进行培养,采用原位制片、G带染色技术进行染色体核型分析。产后采集高危儿外周血重新进行基因分析,并进行免疫功能评估。结果全部病例穿刺均成功,羊水细胞培养成功率100%。基因和染色体核型分析结果显示,3例为正常男性胎儿,2例为正常女性胎儿,2例为男性缺陷胎儿。2例男性缺陷胎儿均为IL-2RG基因突变。除2例缺陷胎儿行人工流产术外,5例SCID高危儿均顺利出生,产后基因分析结果均正常,与产前结果相同。随访免疫功能均正常。结论羊膜腔穿刺结合基因和染色体核型分析在SCID的产前诊断中是一项成熟有效的操作技术。
- 张志勇张翠吴俊峰赵晓东赵耀蒋利萍杨锡强
- 关键词：羊膜腔穿刺产前诊断严重联合免疫缺陷染色体核型分析
- 苯酚降解菌的分离、鉴定及降解特性被引量：4
- 2010年
- 以苯酚为唯一碳源进行选择性富集培养，从油污染土壤中筛选出2株菌，命名为Phe0901和Phe0902。在32℃、pH值为7．0、200r／min摇床振荡培养72h，用4-氨基安替比林分光光度法测定2菌株培养液中苯酚含量，结果表明2株茵均能彻底降解初始质量浓度为1000mg／L的苯酚培养液，即Phe0901和Phe0902为苯酚降解菌。经形态学观察、生理生化实验及16SrDNA基因序列比对分析，初步确定Phe0901为假单胞℃属（Pseudomonas）成员；Phe902为芽孢杆菌属（Bacillus）成员。在不同温度下用比浊法探讨降解菌株的生长情况，在不同pH值下用4-氨基安替比林分光光度法测定苯酚降解率，结果表明在32℃、pH值为7．0～7．8时适宜Phe0901的降解，Phe0901培养44h能彻底降解1000mg／L的苯酚；在32oC、pH值为7．0时适宜Phe0902的降解，Phe0902培养70h能彻底降解1000mg／L的苯酚。
- 张楠陈波水杨致邦余瑛黄伟九方建华
- 关键词：生物降解降解菌苯酚
- Wiskott—Aldrich综合征高危儿七例产前诊断被引量：7
- 2012年
- 目的探讨Wiskott—Aldrich综合征（WAS）高危孕妇羊水脱落细胞基因分析及脐静脉穿刺脐血WAS蛋白（WASP）检测在WAS高危儿产前诊断中的意义。方法2008年至2010年我院经WASP流式检测和基因分析明确诊断的7例WAS患儿。详细记录先证者病史，进行家族相关亲属基因检测，建立7个WAS家系图谱。2008年至2011年对7个家系中携带异常基因的7个高危孕妇于孕18～20周经羊膜腔穿刺抽取羊水。其中部分羊水提取细胞DNA，经PCR扩增WAS基因。PCR产物进行双向序列重复测定。其中1例高危孕妇孕28周采集脐带血，采用流式细胞术检测WASP。培养羊水中胎儿脱落细胞，采用原位制片及G带染色技术进行染色体核型分析。产后采集高危儿外周血进行基因分析和WASP检测验证产前诊断结果。结果7例WAS高危儿羊膜腔穿刺均成功，羊水细胞培养成功率100％。WAS基因和染色体核型分析结果显示1例正常男性胎儿，4例正常女性胎儿，2例为女性异常基因携带者。1例脐带血流式细胞术检测WASP显示正常表达。7例高危儿均顺利出生，产后WASP和基因分析结果均正常，与产前结果相同。结论羊水脱落细胞核型、基因分析与脐带血WASP检测可为WAS高危孕妇提供可靠的产前诊断服务。
- 赵琴张志勇赵晓东蒋利萍赵耀杨锡强
- 关键词：羊膜腔穿刺术产前诊断胎血
- 白介素7受体α基因缺陷导致严重联合免疫缺陷病一例被引量：8
- 2009年
- 目的探讨我国首例白介素7受体α（IL-7Rα）基因缺陷患儿的临床特征和基因突变类型。方法患儿为男性，5月龄，生后15d开始反复出现发热、咳嗽、腹泻，伴卡介苗接种处破溃、流脓和左腋下包块。采用PCR方法扩增患儿及父母IL-7Rα基因组DNA。采用RT—PCR扩增患儿及父母IL-7RαmRNA。PCR产物直接进行双向序列测定。结果患儿的免疫球蛋白IgG6867ms／L，IgA249mg／L，IgM206mg／L，IgE2．3U／ml。淋巴细胞分类T淋巴细胞（CD3＋）0，B淋巴细胞（CD19＋）58％，NK细胞（CD16＋CD56＋）42％。基因分析患儿为IL-7Rα基因的复合杂合突变。在第4内含子剪接位点＋1位发生突变[intron4（＋1）G〉A]，患儿父亲为此突变基因的携带者；第5外显子638位核苷酸发生无义突变（638C〉T，R206X），患儿母亲为此突变基因的携带者。第4内含子剪接位点突变[intron4（＋1）G〉A]为首次报道的突变类型。RT-PCR检测发现患儿IL-7RotmRNA表达明显降低。患儿IL-7RdcDNA经巢式PCR扩增并T-A克隆，测序发现外显子4出现64个核苷酸缺失（496．559del，K158fsl60X）。结论通过临床筛查和基因分析，鉴定出我国首例IL-7RoL基因复合杂合突变[intron4（＋1）G〉A和638C〉T]患儿。
- 张志勇赵晓东王墨于洁安云飞杨锡强
- 关键词：重症联合免疫缺陷突变
- 重庆地区婴幼儿重症肺炎呼吸道病毒病原分析被引量：72
- 2010年
- 目的了解重庆地区婴幼儿重症肺炎病毒病原的感染情况。方法2006年12月至2008年3月，取ICU病房收集诊断为重症肺炎患儿的深部气道或机械通气气管导管内吸取物标本119例，采用RT—PCR或PCR方法检测呼吸道合胞病毒（RSV）、人偏肺病毒（hMPV）、博卡病毒（HBoV）、腺病毒（ADV）、副流感病毒（PIV）1、2、3和流感病毒（IV）A、B等呼吸道病毒病原。结果119例标本中病毒总检出例数为86例（72．3％），其中RSV检出率最高，为41．2％（49／119）。有2种及以上病毒协同感染23例，占26．7％（23／86）；RSV阳性中有19例存在协同感染，占38．8％（19／49）。69例行细菌检测，其中53例为阳性，阳性率为76．8％。这69例标本中，病毒阳性率为76．8％；病毒细菌双阳性为41例，占59．4％。结论（1）病毒感染仍是重庆地区婴幼儿重症肺炎的重要病因。（2）RSV是婴幼儿重症肺炎最常见病毒病原，其次为ADV和hMPV。（3）病毒的协同感染较在重症呼吸道患儿中可能较为普遍，但尚无证据说明病毒协同感染可加重病情。
- 余春梅杨锡强许峰左泽兰赵晓东
- 关键词：肺炎病毒儿童
- X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征一例基因及蛋白表达研究被引量：10
- 2009年
- 目的探讨表现为顽固性腹泻、皮疹以及有或无胰岛素依赖性糖尿病的疑似X连锁多内分泌腺病肠病伴免疫失调综合征（IPEX）患儿FOXP3基因变异及其蛋白表达水平。方法对近两年来我院收治的4例表现为早发性顽固性腹泻、皮疹以及有或无胰岛素依赖性糖尿病的疑似IPEX男性患儿进行FOXP3基因扩增及测序分析，将发现的可疑突变位点通过数据库查询及与100例健康儿童相同位点序列比较，采用流式细胞仪检测CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞比例和F0肼）3蛋白表达。结果4例疑似患儿中发现1例FOXP3突变，为11号外显子66位碱基错义突变（G〉A），导致FOXP3蛋白370位氨基酸由甲硫氨酸替换为异亮氨酸（Met370Ile），患儿母亲为携带者。100例正常儿童FOXP3基因相同位点未见变异，故可排除该位点多态性可能。该突变为此前未见报道的新突变，患儿CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞比例升高而FOXP3表达量无减低。结论通过临床、免疫学筛查和基因分析，发现我国首例IPEX患儿（g：13128G〉Ac：1298G〉AMet370Ile），对早发胰岛素依赖性糖尿病、顽固性腹泻及不明肾脏损害婴幼儿，应考虑IPEX可能并进行FOXP3基因分析。
- 安云飞赵晓东许峰杨锡强
- 关键词：免疫缺陷综合征DNA突变分析T淋巴细胞调节性
