云南省森林灾害预警与控制重点实验室开放基金(ZK09A102) 作品数:17 被引量:45 H指数:5 相关作者: 王金华 熊智 张武先 王海林 孙佑赫 更多>> 相关机构: 西南林业大学 西南林学院 云南玉林泉酒业有限公司 更多>> 发文基金: 云南省森林灾害预警与控制重点实验室开放基金 国家自然科学基金 云南省中青年学术和技术带头人后备人才项目 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 文化科学 更多>>
3龄思茅松毛虫幼虫肠道好氧细菌的分离及ARDRA多态性分析 被引量:3 2012年 从3龄思茅松毛虫(Dendrolimus kikuchii)幼虫肠道样品中分离得到11株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,扩增16 S rDNA,并用4种限制性内切酶HaeⅢ和HindⅢ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。对聚类图谱的分析结果发现11株好氧细菌在70%的遗传相似度水平上聚成4个不同分类操作单元(OTU),表明3龄松毛虫中肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。 康柳 王金华 孙佑赫 高艳 张凯关键词:肠道细菌 ARDRA 猪鼻软骨硫酸软骨素双酶法提取初探 2010年 采用双酶法,通过不同种类的酶、不同添加量、不同料液比提取猪鼻软骨中的硫酸软骨素,综合对比,分析不同种类酶对硫酸软骨素提取的影响。结果表明,猪鼻软骨硫酸软骨素提取最佳工艺为:料液比1:1.5,第1类酶使用碱性蛋白酶,用量为2.5%,第2类酶(胰酶)用量为1.2%,成品收率达到16.740%。 王金华关键词:硫酸软骨素 双酶法 柿子叶提取物对思茅松毛虫肠道细菌抑制作用的研究 被引量:2 2013年 以3龄和5龄的思茅松毛虫幼虫肠道细菌为供试菌种,采用牛津杯法测定柿子叶5种不同的提取物对思茅松毛虫肠道细菌的抑菌效果。结果显示:除柿子叶石油醚提取物对供试菌株没有抑制作用外,其余4种柿子叶提取物对供试菌株都有不同程度的抑制作用,且随着浓度的降低其抑制作用也降低,抑制作用大小顺序为乙酸乙酯提取物>氯仿提取物>乙醇提取物>正丁醇提取物,这四种柿子叶提取物对302号菌株都表现出了极强的抑制效果。因此,柿子叶提取物有作为良好的新型植物源生物农药进行开发利用的潜力。 朱丽丽 刘绍雄 施蕊 王金华 思斯 熊智关键词:提取物 思茅松毛虫 肠道细菌 抑菌作用 五龄恩茅松毛虫幼虫的肠道好氧细菌多样性分析 被引量:5 2013年 采用16s rDNA通用引物进行PCR扩增,16s rDNA扩增片段经寡位点酶组合(HaeⅢ+HindⅢ)和多位点酶组合(HinfⅠ+TaqⅠ)酶切后得到ARDRA指纹图谱,ARDRA指纹图谱通过MVSP软件进行聚类分析(UPGMA),并对5大类群的代表菌株进行测序,研究了5龄思茅松毛虫Dendrolimu kikuchii Matsumura肠道细菌的多样性。结果表明:寡位点酶组合(HaeⅢ+HindⅢ)或多位点酶组合(HinfⅠ+TaqⅠ)酶切得到的ARDRA指纹图谱不能反映5龄思茅松毛虫肠道细菌的多样性,两组酶切结果组合后可以充分反映5龄思茅松毛虫肠道细菌的多样性。通过测序可知,5龄思茅松毛虫的肠道内主要定植产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella oxytoca)、雷金斯堡约克氏菌(Yokenella regensburgei)、克雷伯氏杆菌(Klebsiella peneumoniae)、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),多样性丰富,它们形成的肠道微生物生态系统可以抵制外来菌对恩茅松毛虫的侵害,维持恩茅松毛虫的健康。 王金华 李彪 张武先 熊智 赵丽芳 王海林关键词:思茅松毛虫 肠道细菌 多样性 思茅松毛虫四龄幼虫肠道好氧细菌的ARDRA分析及鉴定 被引量:8 2012年 从思茅松毛虫Dendrolimu kikuchii Matsumura4龄幼虫肠道环境中分离、纯化、培养,获得11株好氧细菌菌株。以细菌基因组DNA为模板,用细菌通用引物(27f、1492r)对模板进行PCR扩增,并用4种限制性内切酶HaeⅢ、HindⅢ、HinfⅠ、TaqⅠ对PCR产物进行ARDRA(amplified rDNA restriction analysis)多态性分析,在84%的相似水平上可分成6大类群,多样性丰富。对6大类群的代表菌株进行16SrDNA序列测定,分析表明:分离到的11株好氧细菌中4N05、4N08和4N11归属克雷伯氏杆菌属(Klebsiellasp.),4N02归属Lysinibacillus属;4N03和4N09确定到种,分别是γ-变形杆菌(Gamma proteobacterium)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis strain);4N04、4N06、4N07和4N01、4N10也可以确定到种,其中前3株是短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevisstrain),后2株是沼泽短芽孢杆菌(Brevibacillus limnophilusstrain),并且这5株菌都归属短芽孢杆菌属(Brevibacillus sp.)。通过研究,既可以为松毛虫的生物防治提供微生态理论依据,又丰富了微生物资源库。 孙佑赫 熊智 王金华 张武先 王海林关键词:思茅松毛虫 多样性 ARDRA 不同温度下山地马铃薯淀粉糖化率分析 被引量:2 2010年 对不同温度下山地马铃薯淀粉糊化糖化率进行了比较研究。选用云南省宣威市的山地马铃薯并提取淀粉,在不同α-淀粉酶作用下,选取不同温度、时间、料水比,比较分析糖化率的变化情况。山地马铃薯的淀粉平均含量为11.25%。使用中温α-淀粉酶,料水比为1∶5,糊化温度为80℃,28h能使糖化率达到80%以上;使用耐高温α-淀粉酶,料水比为1∶5,糊化温度为90℃,16h能使糖化率达到80%以上。这对于节约原材料和生产成本,提高马铃薯淀粉利用率具有重要意义。 王金华 李本德 沈先文 伏启红关键词:马铃薯 淀粉 糊化 紫茎泽兰乙醇提取物对五龄思茅松毛虫肠道细菌的抑制作用 被引量:5 2012年 以思茅松毛虫五龄幼虫肠道细菌为供试菌,采用牛津杯法测定紫茎泽兰不同部位乙醇提取物的抑菌效果。结果表明:紫茎泽兰不同部位乙醇提取物除茎提取物外,对5种思茅松毛虫肠道细菌(共10株)均有不同程度的抑制作用,抑制作用大小顺序为叶>根>茎。在相同质量浓度下,叶提取物对5种肠道细菌的抑菌作用大小顺序为雷金斯堡约克氏菌(Yokenella regensburgei)>弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)>产酸克雷伯氏杆菌(Klebsiella oxytoca)>克雷伯氏杆菌(Klebsiella peneumoniae)>苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),其对雷金斯堡约克氏菌、产酸克雷伯氏杆菌以及弗氏柠檬酸杆菌的最低抑菌质量浓度为0.125g/mL,对其余2种细菌的最低抑菌质量浓度分别为0.25g/mL、0.5g/mL。根提取液对雷金斯堡约克氏菌和克雷伯氏杆菌无抑制作用,在相同质量浓度下,其对其余3种细菌的抑制作用大小顺序与叶提取液相同,最低抑菌质量浓度为0.25g/mL。紫茎泽兰乙醇提取物具有良好的抑菌效果,可用于开发新型的植物源生物农药。 朱丽丽 刘绍雄 王金华 李彪 张敬宜 熊智关键词:入侵生物 紫茎泽兰 乙醇提取物 思茅松毛虫 肠道细菌 抑菌作用 思茅松毛虫7龄幼虫肠道好氧细菌的筛选及毒力测定 被引量:5 2012年 将思茅松毛虫7龄幼虫中肠样品倍比稀释后涂布平板分离菌株,共分离得到14株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,用细菌16S rDNA通用引物(27f,1492r)对模板扩增,并用2种限制性内切酶HaeⅢ和HindⅢ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。对聚类图谱的分析结果发现,14株好氧细菌在86%的相似水平上聚成4个不同分类操作单元(OTU),表明思茅松毛虫7龄幼虫肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。室内毒力试验表明,肠道细菌杀虫死亡高峰期在4~8 d,菌株7I-5杀虫效果最佳,12 d时校正死亡率达到64.29%。 马艳芳 陈升富 王金华 李彪 熊智 张武先关键词:思茅松毛虫 肠道细菌 毒力 思茅松毛虫2龄幼虫肠道好氧细菌的筛选及毒力测定 被引量:4 2011年 [目的]筛选思茅松毛虫(Dendrolimu.kikuchii Matsumura)2龄幼虫肠道好氧细菌并测定其毒力。[方法]将思茅松毛虫2龄幼虫中肠样品倍比稀释后涂布平板分离菌株,共分离得到5株好氧细菌。以细菌基因组DNA为模板,用细菌16S rDNA通用引物(27f和1492r)对模板扩增,并用4种限制性内切酶Hae Ⅲ和Hind Ⅲ、HinfⅠ和TaqⅠ对PCR扩增产物进行ARDRA多态性分析。[结果]聚类图谱分析发现,5株好氧细菌在95%的相似水平上聚成2个不同分类操作单元(OTU),表明思茅松毛虫2龄幼虫肠道内好氧细菌的遗传多样性水平偏低。室内毒力试验表明,肠道细菌杀虫死亡高峰期在4~10d,菌株4杀虫效果最佳,12d时校正死亡率达到53.57%。[结论]为防治思茅松毛虫提供了参考。 张武先 王金华 熊智 孙佑赫 李彪 赵丽芳 王海林关键词:思茅松毛虫 肠道细菌 毒力 马铃薯淀粉发酵制酒工艺研究 被引量:2 2010年 对马铃薯淀粉发酵制酒工艺进行研究,在工艺流程中使用不同的淀粉酶,在不同的发酵温度下,连续测量发酵液糖度和酒度,分析最大出酒率下的最佳发酵温度和时间。结果表明,马铃薯淀粉发酵制取酒精最佳温度为30.5℃,最佳时间为加入酵母后的6~7d,高温环境下的发酵时间比中温提前。 王金华 李本德 丁发博 王廷高关键词:马铃薯 淀粉 发酵 制酒