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上海市科学技术委员会资助项目(09140902800)
作品数:
2
被引量:5
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丁训诚
李卫华
王玉柱
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uPA-/-小鼠肝纤维化模型中的a-SMA、MMP13表达分析与模型评价
被引量:1
2012年
目的采用uPA基因缺失(uPA-/-)小鼠构建肝纤维化动物模型,经a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)与金属基质蛋白酶-13(MMP13)的表达分析,评价其可行性。方法选取成年雄性BL/6J野生型和uPA-/-基因缺失型小鼠,分为4组:对照组(Con—WT,Con—uPA-/-)和模型组(Mod—WT,Mod—uPA-/-),每组20只。模型组小鼠腹腔注射10%CCl4,对照组小鼠腹腔注射橄榄油,每周2次,连续6周,诱导小鼠肝纤维化。用Real—time PCR方法检测小鼠肝脏组织中a—SMA和MMP13的mRNA表达,Western blot及免疫组化分析a-SMA和MMP13的蛋白表达。结果Real—time PCR结果显示,uPA乒小鼠的肝脏中a-SMA、MMP13的mRNA表达量显著高于M小鼠;Western blot结果显示,a-SMA蛋白和MMP13蛋白在对照组小鼠肝脏中几乎不表达,在Mod—WT中有少量表达,在Mod-uPA-/-中表达明显增多:免疫组化结果显示,Mod-uPA-/-的a-SMA和MMP13表达高于Mod-WT。结论a—SMA的mRNA和蛋白表达在uPA-/-小鼠中均明显升高,uPA基因的缺失促进了肝星型细胞向肌成纤维细胞的转化,从而加速了细胞外基质蛋白在肝脏中的沉积;MMP13蛋白表达在肝纤维化模型小鼠中均有明显升高。uPA基因缺失(uPA-/-)小鼠是建立肝纤维化模型的易感品系。
夏敏杰
成倩倩
王玉柱
田芳
温成丽
王晓东
李卫华
丁训诚
关键词:
肝纤维化
MMP13
uPA基因缺失型小鼠与野生型小鼠肝纤维化模型的比较研究
被引量:4
2011年
目的分别采用C57BL/6J野生型(wT)和uPA基因缺失(uPA-/-)小鼠构建肝纤维化动物模型,并进行比较研究。方法选取成年雄性C57BL/6J野生型和uPA-/-小鼠,分为4组:对照组(WT,uPA-/-)和模型组(WT,uPA-/-),每组10只。模型组小鼠腹腔注射10%CCl40.15ml,对照组小鼠腹腔注射橄榄油0.15ml,每周2次,连续4周和6周。测定动物血清中ALT、AST、ALB及A/G等生化指标;盐酸水解法测定肝组织羟脯氨酸(Hyp);用放射免疫法测定血清Ⅲ型前胶原蛋白(PCⅢ)含量;用HE染色及Masson三色胶原染色观察肝组织病理学改变。结果造模4周和6周时,无论是wT模型组小鼠还是uPA-/-模型组小鼠血清ALT和AST活性均较对照组小鼠显著升高,ALB含量降低(P〈0.01);造模4周时,仅见uPA-/-小鼠的A/G含量降低(P〈0.01)。造模4周和6周时,uPA-/-模型组小鼠血清PCⅢ水平和肝脏组织Hyp含量较对照组显著升高(P〈0.01);造模6周时,wT模型组小鼠才出现血清PCⅢ水平和肝脏组织Hyp含量升高(P〈0.01),且升高值明显低于uPA-/-模型组小鼠。病理组织学观察显示,uPA-/-模型组的肝脏纤维化程度比wT模型组明显严重。结论与WT小鼠相比,采用uPA-/-小鼠建立肝纤维化动物模型的造模周期明显缩短,肝纤维化程度更严重。
王晓东
张燕
王玉柱
金佳璟
成倩倩
李卫华
丁训诚
关键词:
CCL4
肝纤维化
动物模型
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