国家自然科学基金(30170193) 作品数:10 被引量:45 H指数:5 相关作者: 梁宋平 王贤纯 胡绍海 周红 胡卫军 更多>> 相关机构: 湖南师范大学 北京大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 理学 医药卫生 更多>>
Physiological and biochemical analysis of L.tredecimguttatus venom collected by electrical stimulation <正>The L.tredecimguttatus venom collected by electrical stimulation was systematically analyzed Using multiple... Xian-Chun Wang Zhi-Gui Duan Jing Yang Xiao-Jun Yan Hong Zhou Xiao-Zhen He Song-Ping Liang~* College of Life Sciences,Hunan Normal University,Changsha,Hunan 410081,China关键词:VENOM PROPERTY 文献传递 重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ用pMAL-p2X载体的表达和纯化 被引量:8 2005年 虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ基因通过PCR扩增 ,插入pMAL p2X载体 ,基因 5′端插入凝血酶切割位点 .在大肠杆菌中经IPTG诱导高效分泌表达 .表达产物N端含麦芽糖结合蛋白 ,融合蛋白被分泌到大肠杆菌的胞间质 .经冷渗透休克后 ,透析脱盐 ,用凝血酶切割融合蛋白 ,再经SuperdexTM75分子筛柱层析、高效液相色谱反相C18柱纯化 ,得到重组虎纹捕鸟蛛毒素Ⅺ .质谱分析表明 ,rHWTX Ⅺ系正确表达产物 ,重组HWTX Ⅺ表现出与天然HWTX Ⅺ一致的生物学活性 . 刘君梁 刁建波 唐建洲 谢锦云 梁宋平关键词:凝血酶 胰蛋白酶抑制剂 海南捕鸟蛛毒素-Ⅵ的分离纯化及鉴定 被引量:9 2002年 从分布于我国海南省的海南捕鸟蛛 (Selenocosmiahainana)粗毒中 ,应用阳离子交换色谱和反相高效液相色谱分离得到 1种多肽神经毒素 ,命名为海南捕鸟蛛毒素 -Ⅵ (Hainantoxin Ⅵ ,HNTX Ⅵ )。MALDI -TOF质谱分析及氨基酸序列分析表明该多肽毒素分子量为 3 9984 9kDa ,序列为NH2 ECKYLWGTCEKDE HCCEHLGCNKKHGWCGWDGTF COOH ,其中的 6个Cys形成 3对二硫键。HNTX Ⅵ能阻断小鼠膈神经膈肌标本神经肌肉接头传递 ,脑室及硬膜外注射毒素能使小鼠瘫软。同源性搜索表明该毒素与蜘蛛Grammostolaspatulata毒素HaTx和蜘蛛Scodragriseipes中的SGTx1毒素有很高的同源性 ,而后两种毒素均为K+ 潘建义 胡卫军 梁宋平关键词:捕鸟蛛 分离纯化 两种蜘蛛多肽毒素的电喷雾电离质谱法序列分析 被引量:2 2005年 虎纹捕鸟蛛毒素-(HWTX-)和敬钊缨毛蛛毒素-(JZTX-)是两种蜘蛛多肽类神经毒素。它们的大部分氨基酸序列已由Edman降解法测出,但仍有部分序列由于某些原因未能确定。为了鉴定未知部分的序列,利用电喷雾电离-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Qq-TOF-MS)对两种蜘蛛毒素的酶解产物进行分析,获得其酶解片段的一级(MS)和二级(MS/MS)图谱,在用软件和手工的方式对含有未知序列的肽段进行解析后,得到未知部分确切氨基酸序列。研究表明:利用质谱的从头测序(denovosequencing)方法获得HWTX-和JZTX-完整的氨基酸序列。该方法在蛋白质和多肽的结构分析和鉴定与传统方法相比具有高灵敏度和快速的优势,是对传统Edman化学降解法的一个很好的补充。 范春明 王贤纯 梁宋平关键词:从头测序 敬钊缨毛蛛毒素-Ⅷ的分离纯化与鉴定 被引量:1 2005年 从敬钊缨毛蛛(Chilobrachys jingzhao)粗毒中,通过阳离子交换色谱和反相高效液相色谱分离得到一种新的多肽神经毒素,命名为敬钊缨毛蛛毒素-Ⅷ(jingzhaotoxin-Ⅷ,JZTX-Ⅷ).经MALDI-TOF分析表明该多肽分子质量为4329.37D a,结合氨基酸序列分析和RACE的cDNA快速扩增法得到了敬钊缨毛蛛毒素-Ⅷ的氨基酸序列和全长cDNA,序列为LFECSFSCDIKKNGKPCKGSGEKKCSGGWRCKMNFCVKVC-OOH,其中6个半胱氨酸形成3对二硫键.敬钊缨毛蛛毒素-Ⅷ能阻断小鼠膈神经-膈肌标本的神经肌肉接头传递,经初步膜片钳实验分析,表明该多肽是一种钙离子通道抑制剂. 胡喆 王美迟 梁宋平Physiological and biochemical analysis of L.tredecimguttatus venom collected by electrical stimulation <正>The L.tredecimguttatus venom collected by electrical stimulation was systematically analyzed Using multiple... Xian-Chun Wang Zhi-Gui Duma Jing Yang Xiao-Jun Yan Hong Zhou Xiao-Zhen He Song-Ping Liang College of Life Sciences,Hunan Normal University,Changsha,Hunan 410081,China关键词:VENOM PROPERTY 文献传递 间斑寇蛛(L.tredecimguttatus)室内饲养及活体采毒方法的初步探讨 被引量:13 2005年 间斑寇蛛Latrotectustredecimguttatus是目前已知毒性最强的蜘蛛之一,为了解决间斑寇蛛毒素研究中毒素来源有限的问题,本实验室开展了间斑寇蛛的室内人工饲养与采毒方法的研究,着重探索影响室内饲养间斑寇蛛生长发育、成活率及繁殖力的主要因素及活体采毒方法。结果表明,温度、湿度和食物种类等多种因素都影响湖南一带室内饲养间斑寇蛛的效果,但相对而言,空气的相对湿度是最重要的因素。与同批次的雌、雄蛛交配比较,利用前批次雌蛛与相隔30天左右的后批次雄蛛交配更有利于产卵率的提高。间斑寇蛛幼蛛度过适当长度的“卵袋期”对于以后的成活与生长发育,尤其是早期的成活与生长发育来说是必要的。尽管有多种方法可用来进行间斑寇蛛的活体采毒,但电刺激采毒法是最佳的活体采毒方法。 周红 何小珍 段志贵 晏小军 胡绍海 王贤纯 梁宋平关键词:间斑寇蛛 室内饲养 活体 雄蛛 雌蛛 幼蛛 间斑寇蛛的生态学观察与实验 被引量:1 2006年 报道间斑寇蛛首次在南方大批量人工养殖成功所获得的行为生态学资料:养殖方法、捕食与食谱、活动规律、蜕皮与体色的关系;温度和湿度对间斑寇蛛活动能力、成活率、蜕皮率的影响;温度和食物对其若蛛生长发育的交互影响作用。间斑寇蛛生长发育的适宜温区是20~30℃,RH55%~75%;最适合温度为25℃,RH65%,苍蝇为较理想的食物。结合野外进行了种群密度的调查、初步分析了其种群分布与栖境生物群落的关系。 胡绍海 胡卫军 周红 杨宵旭 梁宋平关键词:间斑寇蛛 生态学 人工养殖