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福建医科大学科学研究发展基金(FJGXY04013)
作品数:
1
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相关作者:
林授
林德馨
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2009
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LHR真核表达载体构建及表达
被引量:1
2009年
目的构建黄体生成素受体(LHR)真核表达质粒载体和建立稳定高表达LHR的乳腺癌细胞株。方法KpnⅠ/HpaⅠ双酶切LHR-cDNA质粒载体获得目的基因,定向克隆构建pcDNA3.1(+)真核表达载体,酶切图谱和序列分析鉴定;重组质粒载体经脂质体转染MCF-7乳腺癌细胞,G418筛选,RT-PCR、细胞内cAMP测定,筛选鉴定高表达LHRMCF-7细胞。结果重组质粒pcDNA3.1(+)-LHR酶切图谱分析结果、序列分析证明pcDNA3.1(+)-LHR载体中LHR序列与GenBank的LHR基因序列完全相符。RT-PCR检测MCF-7细胞LHR mRNA,MCF-7细胞内cAMP浓度测定,证实MCF-7细胞高表达LHR。结论构建并转染pcDNA3.1(+)-LHR真核表达载体,在MCF-7细胞中稳定表达,为探讨hCG对乳腺癌细胞的作用提供实验基础。
林授
林德馨
关键词:
绒毛膜促性腺激素
乳腺肿瘤
克隆细胞
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