河南省科技攻关计划(08210213007)
- 作品数：6 被引量：24H指数：3
- 相关作者：魏战勇崔保安贾艳艳耿静微李金磊更多>>
- 相关机构：河南农业大学郑州牧业工程高等专科学校河南省动物性食品安全重点实验室更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划河南省杰出人才创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪伪狂犬病毒SYBR-GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立被引量：9
- 2009年
- 利用PCR技术扩增出猪伪狂犬病毒gH基因中187 bp的片段,并克隆到pGEMT载体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪伪狂犬病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.26×102拷贝.μL-1,与猪圆环病毒,猪细小病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪瘟病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对15份疑似病料进行了检测,发现均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出6份阳性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PRV感染的检测.
- 李明凤魏战勇郭显坡贾艳艳陈红英王学兵崔保安
- 关键词：猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR
- 猪细小病毒感染Marc-145细胞后对其分泌白细胞介素6转录时相的影响被引量：4
- 2011年
- 为了更好地了解猪细小病毒(PPV)感染Marc-145后引起的细胞炎性反应,特别是白细胞介素6(IL-6)的反应,以及探讨宿主与病毒之间的作用关系,运用荧光定量PCR技术,测定和分析PPV感染Marc-145细胞后病毒DNA含量的变化和IL-6的分泌水平。结果表明,病毒感染后1 h就可以检测到病毒DNA,但病毒量相对较低,在感染48 h达到最高峰,为感染时的170倍左右。IL-6的表达量在感染后1 h、3 h、24 h显著增加,48 h下降至低于对照水平,说明猪细小病毒感染后可引起Marc-145细胞分泌IL-6的增加。
- 张彦桃梁秀丽刘芳李金磊耿静微魏战勇
- 关键词：MARC-145细胞白细胞介素6猪细小病毒转录时相
- 猪细小病毒感染Marc-145细胞后对其分泌白细胞介素18转录时相的影响被引量：1
- 2011年
- 为了解猪细小病毒(PPV)感染Marc-145细胞后引起细胞炎性反应特别是白细胞介素18(IL-18)的反应,探讨宿主-病毒之间的作用关系,运用荧光定量PCR技术,测定和分析了PPV感染Marc-145细胞后引起的病毒DNA含量的变化和IL-18的分泌水平.结果表明,IL-18的表达量在1 h无明显变化、在3,24 h增加,48 h轻微下调.表明猪细小病毒感染可引起Marc-145细胞分泌IL-18增加.
- 党玉丽哈斯通拉嘎耿静微王瑞宁郭东辉胡清林魏战勇
- 关键词：猪细小病毒MARC-145细胞白细胞介素18转录时相
- PPV感染Marc-145细胞后对其分泌IL-13转录时相的影响被引量：1
- 2011年
- 运用荧光定量PCR技术,测定和分析猪细小病毒(PPV)感染Marc-145细胞后引起的病毒DNA含量的变化和IL-13的分泌水平。结果IL-13的表达量在1,3和24 h明显增加,48 h轻微下调。
- 刘石哈斯通拉嘎王瑞宁郭东辉胡清林魏战勇
- 关键词：MARC-145细胞白细胞介素13猪细小病毒转录时相
- 多重PCR检测猪伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型的研究被引量：14
- 2010年
- 根据GenBank上已发表的猪伪狂犬病毒(PRV)的gH基因、猪细小病毒(PPV)的VP2基因序列和猪圆环病毒2型(PCV2)的ORF2基因序列,设计合成了3对特异引物,分别建立了PRV,PPV和PCV2的单项PCR诊断方法;通过对扩增条件的筛选,建立了PRV,PPV,PCV2的复合PCR诊断方法,利用1次PCR反应,即可同时扩增PRV的355 bp,PPV的195 bp和PCV2 487 bp的特异性片段,而猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、正常细胞(PK-15)扩增结果均为阴性,对PRV,PPV,PCV2的最低检出量分别为100 fg,1 pg和10 pg的DNA.该方法适合对PRV,PPV和PCV2的联合检测和鉴别诊断.
- 胡慧贾艳艳杨春华王亚宾陈丽颖张红英崔保安
- 关键词：多重PCR猪伪狂犬病毒猪细小病毒猪圆环病毒2型
- 猪细小病毒对猪外周血淋巴细胞分泌猪白细胞介素18转录时相影响的探讨
- 2011年
- 猪细小病毒体外感染外周血淋巴细胞(PBMC)后引起细胞免疫反应尚不清楚,为了更好的了解猪细小病毒(PPV)感染PBMC后引起猪白细胞介素18的反应,探讨宿主-病毒之间的作用关系,运用荧光定量PCR技术,测定和分析了PPV感染PBMC后引起的病毒DNA含量的变化和猪IL-18的分泌水平。结果猪IL-18的表达量在3,6,12,24 h增加,1,48,72 h下调。可见,猪细小病毒感染可引起PBMC分泌猪白细胞介素18的增加。
- 刘占通李金磊魏战勇
- 关键词：外周血淋巴细胞猪细小病毒转录时相
