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国家科技重大专项(2008ZXl0004-001)
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用噬菌体展示肽库技术筛选甲肝病毒抗原模拟表位
2012年
目的用噬菌体展示肽库技术筛选甲型肝炎(甲肝)病毒抗原模拟表位,为病毒抗原决定簇定位探索可行方法。方法用纯化的抗甲肝病毒单克隆抗体,对噬菌体展示12肽库进行3轮“吸附一洗脱一扩增”筛选,随机挑取10个克隆,用酶联免疫吸附法(ELISA)对噬菌体克隆进行抗原性鉴定、竞争抑制鉴定及DNA序列测定分析,推导出展示肽氨基酸序列并与甲肝病毒(HAV)代表株结构蛋白氨基酸序列比较。结果lO个噬菌体克隆ELISA检测全为阳性,9个具有一致序列,与HAVHMl75株结构蛋白中和活性表位之一:VPl157—171区具有类似序列,另一株噬菌体克隆在HAVHMl75中未发现类似序列,结果表明这些展示肽可能是HAV抗原模拟表位。结论用噬菌体展示肽库技术筛选得到了HAV模拟表位,为开展病毒模拟表位研究打下了基础。
曹经瑗
李建东
郑惠惠
毕胜利
李德新
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肽库
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