宁夏回族自治区自然科学基金(NZ0781)
- 作品数：4 被引量：14H指数：2
- 相关作者：裴秀英高玉婧杨华董晓薇李岩更多>>
- 相关机构：宁夏医学院宁夏医科大学宁夏自治区人民医院更多>>
- 发文基金：宁夏回族自治区自然科学基金国家自然科学基金教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 模板DNA质量对单核苷酸多态性分析的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探索在单核苷酸多态性分析中模板DNA质量对实验的影响以及提高模板DNA质量的途径。方法用PCR-RFLP法研究SNP rs1024611(G/A)的基因分型,从样本保存方式、保存时间及DNA提取方法三方面进行对比实验,观察其对模板DNA质量及SNP分析的影响。结果从抗凝血中提取DNA模板的得率比非抗凝血高,在SNP分析中,EDTA抗凝血效果最好、肝素抗凝血效果不好;基因组DNA在全血中的有效保存时间比提纯的DNA有效时间长;试剂盒法提取DNA的得率和纯度均高于传统的酚-氯仿法。结论可通过以下途径提高SNP研究中DNA模板的质量:采集血样用EDTA抗凝、分装成小份在-20℃冻存,避免反复冻融。使用前在37℃水浴中快速解冻,用试剂盒法提取DNA更适合于SNP的研究,提取的模板DNA要及时实验或分装后冻存于-20℃,若需长期保存模板DNA,保存全血优于保存纯化的DNA。
- 张淑雅李岩裴秀英高玉婧刘芳蒋学锋董晓薇随瑞枝
- 关键词：单核苷酸多态性
- 维生素D受体基因多态性与宁夏结核病遗传易感性的关联性研究被引量：10
- 2008年
- 目的探讨维生素D受体(VDR)基因多态性与宁夏结核病发病的关系。方法采用以医院为基础的病例对照研究设计,选择108例临床确诊的结核病患者,平均年龄为(33.29±9.86)岁,另选择与其年龄相匹配的154例健康人群作为对照,平均年龄为(36.79±10.95)岁,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法检测VDR-FokⅠ多态性位点的基因型,计算基因型频率、等位基因频率及比值比(OR)。结果VDR-FokⅠ-FF、Ff和ff基因型在病例组中的分布频率分别为31.5%、50%和18.5%,在对照组中的分布频率分别为24.7%、61%和14.3%。以FokⅠ-ff为参照组,FokⅠ-FF和Ff与之相比,在病例组和对照组间的分布无统计学意义(P>0.05)。结论VDR基因-FokⅠ位点多态性与宁夏人群结核发病无显著的关联性。
- 高玉婧裴秀英杨华刘芳蒋学峰
- 关键词：结核VDR基因多态性遗传易感性
- 小鼠Ccr2基因真核表达载体的构建及稳定转染细胞株的建立被引量：1
- 2010年
- 目的:构建小鼠Ccr2基因真核表达载体,转染RAW264.7,建立稳定转染Ccr2的RAW264.7细胞系。方法:应用RT-PCR从小鼠脾脏组织中扩增Ccr2mRNA全序列,插入真核表达载体pEGFP-N1中。用脂质体将重组质粒pEGFP-N1/Ccr2转染RAW264.7细胞,通过G418筛选建立Ccr2稳定转染的RAW264.7细胞系。经RT-PCR、Western blot检测、荧光显微镜和流式细胞仪FCM检测,了解Ccr2在RAW264.7细胞中的表达水平及细胞内定位。结果:成功构建了pEGFP-N1/Ccr2重组质粒,建立了稳定转染的RAW264.7细胞株。RT-PCR和Western blot检测证实,Ccr2基因在该细胞系中成功表达,荧光显微镜下观察到该基因定位于细胞膜上,FCM显示90%以上的细胞膜上均有CCR2的表达。结论:构建了Ccr2真核表达载体并建立了稳定转染的RAW264.7细胞株。为进一步研究MCP1/CCR2信号通路在结核杆菌诱导巨噬细胞凋亡中的作用奠定了基础。
- 赵薇芦晓红裴秀英
- 关键词：趋化因子受体真核表达转染RAW264.7细胞
- 重组结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶表达特性的研究
- 2009年
- 目的通过对所构建的重组结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶表达特性的研究,获取最佳可溶性表达。方法以IPTG诱导重组质粒pET28a(+)-icl和pET28a(+)-aceA在大肠杆菌BL21(DE3)和BL21(DE3)plysS细胞表达,筛选最佳诱导浓度、时间和温度。结果以0.25mmol/L和0.1mmol/L的IPTG在25℃诱导8h和6h后可溶性重组ICL蛋白和AceA蛋白的最高含量。结论本研究构建的结核分枝杆菌异柠檬酸裂解酶重组表达质粒,可获得可溶性表达蛋白,为抗结核药物的筛选奠定了基础。
- 李岩裴秀英杨华郝方高玉婧董晓薇
- 关键词：结核分枝杆菌
