国家自然科学基金(30370853) 作品数:12 被引量:128 H指数:7 相关作者: 赵明 丁在松 石云鹭 张桂芳 张彬 更多>> 相关机构: 中国农业科学院作物科学研究所 中国农业大学 山西农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 国家粮食丰产科技工程 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
家稗Pdk基因叶片特异性表达载体的构建及农杆菌的导入 2007年 【研究目的】构建含家稗Pdk基因的叶片特异性表达载体;【方法】通过PstI和SalI单酶切分别从质粒pRGN及pUCm-Pdk上获得Rubisco小亚基启动子和Pdk基因,将其连入表达载体pCAMBI1301,并通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌EHA105;【结果】构建了由Rubisco小亚基启动子调控的Pdk基因植物表达载体p1301-Prbs-Pdk,选择标记基因为Hpt(潮霉素磷酸转移酶基因),经酶切和PCR鉴定,表达载体已成功导入农杆菌EHA105中;【结论】丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)是C4光合途径中的关键光合酶,本实验中构建了含有rbcs启动子的适于单子叶植物转化的Pdk基因表达载体,为提高转基因植物光合效率奠定了基础。 王金明 赵明 丁在松 张斌 郭志江关键词:根癌农杆菌 影响农杆菌介导旱稻转化效率主要因素的研究 被引量:4 2007年 针对旱稻在基因工程中转化效率低这一难题,以4个旱稻品种为对象,对农杆菌介导的遗传转化的各个步骤进行了优化试验,结果表明NB(N6 macro elements;B5 microelements and vitamins;proline 500mg L-1,L-Glutamine 500mg L-1,casamino acid 300mg L-1,sucrose 30 gL-1,2,4-D2mg L-1,agar8g L-1,pH5.8)培养基适合于旱稻愈伤组织诱导;AAM-AS(Na2HPO4.2H2O339.2mg L-1;KCl2.95g L-1;MgSO4·7H2O500mg L-1;CaCl2114.4mg L-1;MnSO4·4H2O10mg L-1;H3BO33mg L-1;ZnSO4·7H2O2mg L-1;KI0.75mg L-1;NaMO40.25mg L-1;CuSO4.5H2O0.0387mg L-1;CoCl2.6H2O0.025mg L-1;VB10.5mg L-1;VB60.5mg L-1;烟酸0.5mg L-1;肌醇100mg L-1;甘氨酸7.5mg L-1;精氨酸174mg L-1;谷氨酰铵876mg L-1;casamino acid 500mg L-1;蔗糖68.5g L-1;葡萄糖35g L-1;AS200μmol L-1pH5.2)是农杆菌的最佳重悬液;对NPT(new plant type,NPT)这种侵染后易水渍化品种,滤纸法共培养可将其抗性愈伤发生率提高15倍以上;筛选及分化前对抗性愈伤组织进行2d的干燥培养可显著加快愈伤组织分化进程;在分化培养基中加入AgNO3有助于提高分化率;而短期高浓度的CuSO4处理可显著提高分化率。利用此体系获得了一大批PCR鉴定阳性的转基因植株;Southern blot检测证明外源基因大多数以单拷贝形式整合在转基因植株中。 石云鹭 丁在松 张彬 张桂芳 赵明关键词:旱稻 农杆菌转化 共培养 分化 钙对拟南芥耐盐性的调节 被引量:29 2006年 钙作为植物生长的大量元素和胞内重要的第二信使能缓解植物的盐害,但在不同Na+/Ca2+条件下对它们之间的相互作用及生理机制的研究报道很少。为了进一步探讨Ca2+对植物耐盐性的调节作用,本研究用外加不同浓度CaCl2-NaCl的固态和液态培养基对拟南芥的形态和生理生化的多项指标进行了测定。结果表明,0 mmol.L-1下拟南芥的根长随外加钙浓度的增加而增长,当200、250 mmol.L-1NaCl胁迫时抑制了拟南芥根的生长,但在同一NaCl浓度下随钙离子浓度增加,侧根增加且真叶逐渐展开并由紫变绿。在高盐胁迫下,拟南芥的生物量、存活率、K+含量、K+/Na+都降低;但在同一NaCl浓度下,外加钙增加了盐胁迫下拟南芥的生物量、存活率、K+含量、K+/Na+。在高盐胁迫下,拟南芥体内的脯氨酸和丙二醛(MDA)的含量增加,但在同一NaCl浓度下,外加钙增加了脯氨酸含量并抑制了膜脂过氧化的产物丙二醛(MDA)的积累。说明外加Ca2+能通过提高植物对盐胁迫的适应而增加K+含量、脯氨酸含量并降低丙二醛的含量,增强植物抗离子、渗透和氧化等胁迫的能力,从而缓解盐对拟南芥幼苗的伤害,提高拟南芥的耐盐性。 马淑英 赵明关键词:氯化钙 拟南芥 氯化钠胁迫 耐盐性 玉米和小麦在光合诱导期间非光化学猝灭(qN)差异(英文) 被引量:8 2005年 为了比较玉米(ZeamaysL.)(C4)与小麦(TriticumaestivumL.)(C3)黑暗向光照变化过程中的光诱导适应性反应,对非光化学猝灭(Nonphotochemicalquenching,qN)的动态变化特征进行了观察和分析。结果表明,在15min至24h的不同暗适应处理中,根据qN的光适应的动态变化可分为F型(快速稳定型)、M型(中速稳定型)和S型(慢速稳定型)3种。在暗适应后的光诱导期间,小麦qN主要表现出M和F型,玉米则表现出S和M型。通过对主要的荧光参数分析,小麦与玉米的Fv/Fm,qP和ΦPSⅡ差异较小,而qN稳定值有一定的差异,但TqNmax(qN达到最大值的时间)和TqN(qN达到稳定值的时间)玉米明显高于小麦,差异极明显。进一步分析经黑暗处理后光诱导的光合速率和气孔导度的动态变化,两作物虽然在增加的速率和稳定后的绝对值有差异,但达到稳定的时间无明显的不同。通过塑料膜包封叶片的方法阻止CO2同化,而qN变化特征也基本不改变。这意味着短时间的C代谢不明显影响qN对光诱导的反应。对光系统Ⅰ反应中心P700的典型氧化还原方式的测定和电子库容能力的分析也表明它们不是造成qN动态变化的主要原因。然而,对qNmax成分的分析证明高能态猝灭(highenergystatequenching,qE)、转化猝灭(transitionquenching,qT)和光抑制猝灭(photoinhibitoryquenching,qI)分别为55.6%、18.5%和25.9%,说明qE是导致玉米qN在暗处理后的光诱导表现出TqNmax高、TqN长的主要原因。这意味着玉米(C4)在暗—光的变化中维持较高的qE,保持较高的类囊体质子梯度,有益于启动NADPH和ATP的形成。 赵明 姜雯 丁在松 石井龙一 陈丽关键词:AESTIVUM 非光化学猝灭 植物丙酮酸磷酸双激酶的分子生物学和基因工程研究进展 被引量:5 2009年 丙酮酸磷酸双激酶是C4光合途径中的专一性酶,在C4光合作用中起着重要作用。综述了植物丙酮酸磷酸双激酶基因结构、基因进化、表达调控机理,概述了植物丙酮酸磷酸双激酶基因工程在植物光合生理方面的研究进展。 张桂芳 王金明 赵明 丁在松关键词:丙酮酸磷酸双激酶 分子生物学 基因工程 小麦基因型对根癌农杆菌菌株敏感性研究 被引量:5 2006年 以栽培冬小麦运丰优、临优145、中优9507的成熟胚愈伤组织为外植体,用C58c1、EHA105和LBA4404 3个根癌农杆菌菌株(都含有pCAMBI1301质粒)研究小麦基因型对根癌农杆菌的敏感性,以及根癌农杆菌对小麦的侵染能力。结果表明,小麦基因型对根癌农杆菌的敏感性存在显著差异,以临优145最敏感。根癌农杆菌菌株对小麦成熟胚侵染能力不同,含有pCAMBI1301(p1301)质粒的C58c1侵染能力较强,但差异未达极显著水平。 张彬 赵明 贾栋 高志强 马建军关键词:小麦 基因型 根癌农杆菌 成熟胚 根癌农杆菌介导获得稗草Ecppc转基因小麦的研究 被引量:35 2007年 采用携带pUbi-Ecppc质粒的3个根癌农杆菌菌株(LBA4404、EHA105和C58c1),对经过预培养10-12 d的春小麦品种扬麦158、Bobwhite和扬麦12的幼胚愈伤组织进行了遗传转化,对筛选中的抗生素浓度、菌液浓度、共培养温度和时间、受体基因型、菌株-质粒组合等影响转化的重要因素进行了研究。首次将单子叶野生C4植物稗草的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(Ecppc)导入不同基因型小麦受体,并得到具有潮霉素(Hyg)抗性的转化植株。从816块共培养愈伤组织中转化得到34株抗性植株,其中14株PCR检测为阳性。扬麦158的转化效率达3.03%。Southern和RT-PCR分析表明,外源基因已整合到小麦基因组并得到正确的转录。生理学检测显示,转基因小麦植株的光合速率和PEPC活性都有所提高。说明Ubiqintin基因启动子控制的稗草PEPC cDNA基因在小麦中可以正确表达和起到一定的生理作用。这些工作为进一步探讨PEPC对小麦光合作用及其他生理过程的影响奠定了基础。 张彬 丁在松 张桂芳 石云鹭 王金明 方立锋 郭志江 赵明关键词:小麦 农杆菌介导法 水稻远缘杂交后代的耐强光和抗光氧化特性 被引量:14 2006年 为探明通过远缘杂交(Oryza sativaAzucena×Oryza rufipogonRamper6)手段获得的水稻高光合后代株系(SHPF6)在生长关键时期的耐强光和抗光氧化能力,本文以生育期一致的推广品种中花10号为对照,进行了光合作用测定和抗光氧化特性的研究。结果表明,强光下SHPF6表现较高的净光合速率Pn,并随着光强进一步增强而有较大的上升,这种高光合优势突出表现于Pn与胞间CO2浓度(Ci)的极显著负相关(r=-0.767,P<0.01),及气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)无论光强大小均高于对照;光氧化条件下,中花10号Fo显著升高(P<0.05),Fv/Fm和Fv/Fo均显著降低(P<0.05),而SHPF6各荧光参数在统计上没有较大差异,说明SHPF6具有较强的抗光氧化能力。这些结果意味着,通过远缘杂交手段,不仅可以提高普通栽培品种的光合速率和CO2羧化能力,还能改善水稻的抗光氧化能力。 李涛 丁在松 关东明 陈传永 孙锐 赵明关键词:远缘杂交 野生稻 光合作用 光氧化 Three photosynthetic patterns characterized by cluster analysis of gas exchange data in two rice populations 被引量:1 2014年 Plant photosynthetic rate is affected by stomatal status and internal CO2 carboxylation. Understanding which process determines photosynthetic rate is essential for developing strategies for breeding crops with high photosynthetic efficiency. In this study, we identified different physiological patterns of photosynthetic rate in two different rice populations. Photosynthetic gas exchange parameters were measured during the flowering stage in two rice populations. Clustering and correlation analyses were performed on the resulting data. Five or six groups were defined by K-means clustering according to differences in net photosynthetic rates(Pn). According to differences in stomatal conductance(gs) and carboxylation efficiency(CE), each group was clustered into three subgroups characterized by physiological patterns stomatal pattern, carboxylation pattern, and intermediate pattern. Pn was significantly correlated with gs(r = 0.810) and CE(r = 0.531). Pn was also significantly correlated with gs and CE in the three physiological patterns. The correlation coefficients were highest in the stomatal pattern(0.905 and 0.957) and lowest in the carboxylation pattern(0.825 and 0.859). Higher correlation coefficients between Pn and gs or CE in the three physiological patterns indicate that clustering is very important for understanding factors limiting rice photosynthesis. ? 2013 Production and hosting by Elsevier B.V. on behalf of Crop Science Society of Zaisong Ding Tao Li Xianguo Zhu Xuefang Sun Suhua Huang Baoyuan Zhou Ming Zhao关键词:CLUSTER PHOTOSYNTHESIS STOMATAL PATTERN CARBOXYLATION PATTERN 家稗丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)基因的克隆及序列分析 被引量:14 2007年 为揭示C4植物家稗[Echinochloa crusgallivar.frumentacea(Roxb.)W.F.Wight]PPDK结构和功能特点,探索改善作物高光效途径,采用RT-PCR技术,克隆了家稗丙酮酸磷酸双激酶(PPDK)基因的cDNA全长。核苷酸序列分析表明,该片段全长3 085 bp,包含一个2 844 bp的开放阅读框,编码948个氨基酸(GenBank登录号:AY 792619)。编码区核苷酸序列与高粱(Sorghum bicolor)、甘蔗(Saccharum officinarum)、玉米(Zea mays)等C4型pdk基因同源率分别为85.1%、84.0%和82.0%;与水稻[Oryza sativa(japonicacultivar-group)]pdk基因同源性也高达82.6%。氨基酸序列进化树分析表明,其与玉米、水稻等禾本科植物最为接近。半定量RT-PCR研究表明,pdk基因仅在绿色叶片中表达。 王金明 丁在松 张桂芳 赵明关键词:基因克隆