食品科学与技术国家重点实验室目标导向资助项目(SKLF-MB-201002) 作品数:11 被引量:77 H指数:6 相关作者: 陈红兵 李欣 高金燕 涂追 刘夏 更多>> 相关机构: 南昌大学 南昌大佳科技有限公司 更多>> 发文基金: 食品科学与技术国家重点实验室目标导向资助项目 国家自然科学基金 教育部“新世纪优秀人才支持计划” 更多>> 相关领域: 轻工技术与工程 生物学 理学 医药卫生 更多>>
大豆主要过敏原及其脱敏方法的研究进展 被引量:18 2011年 大豆是引起食物过敏最常见的过敏原食物之一,如何降低大豆的致敏性,保证大豆食品的安全,已成为食品安全领域的一项重要课题。大豆中的过敏原蛋白很多,大致可分为种子储藏蛋白、结构蛋白和防御相关蛋白。其中7S球蛋白组分中的Gly m Bd 30 K和Gly m Bd 28 K,β-伴大豆球蛋白中的Gly m Bd 60K是3种主要的过敏原。近几年来,以热加工法、酶处理法、超高压法和基因工程法等为代表的大豆脱敏技术研究取得了很多新进展。其中,热加工法与酶处理法已经在食品工业中广泛应用。超高压法作为一种新的大豆脱敏技术,由于它对大豆的营养价值和风味影响较小,越来越受到食品工业的关注,具有潜在的应用前景。基因工程法则是食品脱敏的新技术,它可以消除食物原料过敏原性,但基因食品的安全性仍饱受争议,能否实际应用于脱敏仍待进一步研究。 杨慧 陈红兵 程伟 高金燕 李欣关键词:脱敏 农药西玛津与小牛胸腺DNA的相互作用 被引量:6 2012年 在生理条件(pH 7.4)下,以吖啶橙(AO)为荧光探针,运用荧光光谱、紫外-可见光谱、圆二光谱(CD)和傅里叶转换红外光谱(FT-IR)并结合熔点、粘度及盐效应实验,研究了西玛津与小牛胸腺DNA的相互作用。结果显示,随着溶液中西玛津的浓度增大,DNA-AO复合物的荧光逐渐被猝灭,表明西玛津与AO发生了部分置换作用,而且西玛津的存在使得DNA的熔点和粘度增大,由此推断西玛津与DNA发生嵌插结合。此外,FT-IR光谱分析和盐效应结果表明西玛津与DNA还存在静电结合。计算出的热力学参数表明,疏水作用力是西玛津与DNA结合反应的主要驱动力。 李瑜 张国文 潘军辉关键词:小牛胸腺DNA 相互作用 光谱法 Ca^(2+)、Mg^(2+)对农药三唑醇与小牛胸腺DNA相互作用的影响 被引量:1 2012年 在pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,以溴化乙锭(EB)荧光探针,采用荧光和紫外-可见光谱法并结合DNA熔点测量和黏度实验,研究了Ca2+、Mg2+分别对农药三唑醇与小牛胸腺DNA(ctDNA)结合模式的影响。结果表明:三唑醇主要以嵌插模式与ctDNA结合,Ca2+、Mg2+的存在均能增强三唑醇与ctDNA的相互作用,随着体系中Ca2+、Mg2+浓度的增加,ctDNA-三唑醇复合物的结合常数均呈现出先增大后减小的趋势,表明Ca2+、Mg2+对ctDNA-三唑醇结合的影响取决于金属离子与DNA的碱基和磷酸基团之间的结合程度。 张业鹏 张国文关键词:三唑醇 小牛胸腺DNA 金属离子 食物过敏原构象性表位鉴别的研究进展 被引量:14 2012年 构象性表位是表位的重要组成之一,在过敏反应中起重要作用。表位定位工作是过敏原研究的重要领域。目前应用于构象性表位研究的方法主要有3类:基于线性表位的氨基酸组成和特性预测构象性表位;利用噬菌体筛选得到模拟肽,通过生物信息学定位构象性表位以及利用光谱学等方法测定构象性表位与抗体结合的相关参数确定构象型表位。前两种方法比较常用,而光谱学方法是近年来发展的一种新方法,准确性更高。这3类定位方法可为过敏原的研究提供认识和了解构象性表位的途径,并为构象性表位在过敏中的作用机制提供部分理论依据。 李欣 陈红兵关键词:食物过敏原 食物过敏原结构变化的光谱学研究进展 被引量:2 2012年 光谱学方法已广泛应用于研究食物过敏原结构的变化。常用的光谱学方法包括圆二色光谱、荧光光谱、傅里叶变换红外光谱、拉曼光谱、紫外吸收光谱等,其中圆二色光谱仅应用于澄清的稀溶液中,常研究过敏原二级、三级结构变化;傅里叶变换红外光谱不受过敏原相对分子质量大小、光散射以及荧光的影响,其酰胺Ⅰ带对于过敏原二级结构的研究最有价值;拉曼光谱采用光子探针,对微克级样品无损伤探测,适用于稀有、珍贵样品;荧光光谱多用于研究过敏原在变性过程中疏水性以及微环境变化;紫外吸收光谱在结构鉴定中需与其他光谱方法密切配合。前3种方法均可以确定过敏原二级结构的类型和相对含量,各方法的具体应用仍然值得进一步探索。 白雨鑫 李欣 赵丽霞 陈红兵 高金燕关键词:蛋白结构 光谱学 食物过敏 超声波提取-分散固相萃取净化-气相色谱法测定紫菜中三丁基锡和三苯基锡 被引量:8 2012年 建立了紫菜中三丁基锡(TBT)和三苯基锡(TPhT)化合物同时分析的气相色谱法。样品以乙酸乙酯-正己烷(体积比为4∶1)超声提取,四乙基硼酸钠衍生,衍生物经活性炭固相材料分散净化后,用响应面分析法对提取条件进行优化,最后采用气相色谱-火焰光度法(GC-FPD)测定。研究结果表明,TBT、TPhT这两种有机锡化合物在0.1~10mg/L浓度范围内均线性良好,其相关系数分别为0.9989和0.9996;检测限分别为0.038和0.049mg/L。在三个不同添加水平下,TBT、TPhT的平均回收率范围为80.3%~106.9%,相对标准偏差为5.1%~8.7%。该方法快速、准确,可应用于紫菜中TBT、TPhT的同时检测。 毛雪金 李娟 万益群关键词:三丁基锡 三苯基锡 超声波提取 分散固相萃取 抗AFB_1单域重链抗体文库淘选方法的研究 被引量:9 2011年 比较两种从噬菌体展示文库中淘选抗黄曲霉毒素B1单域重链抗体的方法,并为淘选针对小分子物质的单域重链抗体提供参考。采用固相淘选技术,以黄曲霉毒素B1人工抗原为靶分子,淘选天然单域重链抗体库,分别采用Gly-HCl法和AFB1竞争法洗脱结合噬菌体,对洗脱物进行滴度测定,以回收率和富集度为指标,对两种洗脱方法进行比较。采用phage-ELISA法鉴定噬菌体克隆,并对阳性克隆进行交叉反应分析以及序列测定。滴度测定结果显示,Gly-HCl法回收率比竞争法高5~10倍。分别随机挑取20个单克隆进行phage-ELISA鉴定,其中,Gly-HCl洗脱法未获得阳性克隆,AFB1竞争洗脱法得到8个阳性克隆。序列测定结果显示,这8个克隆均编码单域重链抗体。 刘夏 许杨 涂追 何庆华关键词:黄曲霉毒素B1 噬菌体展示 鸡蛋卵转铁蛋白过敏原B细胞线性表位的预测研究 被引量:1 2011年 为预测鸡蛋过敏原卵转铁蛋白的B细胞线性表位,以GenBank中提供的鸡蛋卵转铁蛋白氨基酸序列为基础,分别用Jameson-Wolf法、Kyte-Doolittle法、Emini法和Karplus-Schulz法对鸡蛋卵转铁蛋白的抗原指数、亲水性、蛋白表面可及性及柔韧性进行预测,并用Chou-Fasman法和Deleage-Roux法预测其二级结构,综合分析以上预测结果,得出鸡蛋卵转铁蛋白可能的B细胞线性表位区。结果表明鸡蛋卵转铁蛋白存在7个潜在表位区,包括蛋白第174~181、215~222、231~240、288~294、332~344、415~429、547~555位可能为B细胞线性表位优势区域。该结果将有助于鸡蛋卵转铁蛋白B细胞表位的进一步精确定位。 佟平 高金燕 陈红兵 李欣 简姗 张银关键词:卵转铁蛋白 鸡蛋过敏 驼源天然单域重链抗体库的构建与鉴定 被引量:8 2011年 从未经主动免疫的健康羊驼(Lama pacos)外周血淋巴细胞中提取总RNA,反转录后作为第一轮PCR的模板。根据重链抗体保守区域设计引物,经巢式PCR法扩增获得了全套重链抗体可变区基因,将其克隆至噬菌粒pHEN1,电转化大肠杆菌TG1得到初级抗体库NAL,含有2×107个独立克隆,菌落PCR和Hinf I酶切分析结果显示,克隆效率大于97%,文库的多样性良好。辅助噬菌体救援后,得到噬菌体展示文库命名为NA-PDL,滴度达1013CFU/ml。以真菌毒素人工抗原DON-MBSA为目标抗原,对NA-PDL进行了淘选,第二轮洗脱物中,阳性克隆率达36.4%,提示针对目标抗原的噬菌体颗粒得到了有效富集,文库NA-PDL多样性较好,为后续淘选针对特定抗原的单域重链抗体奠定了基础。 涂追 许杨 刘夏 何庆华 陶勇关键词:羊驼 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 噬菌体文库 抗DON单域重链抗体序列分析及三维建模与对接 被引量:2 2011年 探讨应用分子模拟与对接技术预测抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)单域重链抗体(DONIV2)的三维结构及其与DON的结合模式。采用生物信息学相关工具和网站分析预测DONIV2的理化特性及其二级结构,同源建模方法获得三级结构,然后采用分子对接软件Autodock 4.2将三维结构模型与DON进行分子对接。二级结构和三级结构分析显示,DONIV2由10个β片层结构组成,CDR区为无规则卷曲结构,位于分子的一端,在CDR1、CDR2与CDR3之间形成1条宽度约为1.2 nm的凹槽结构。对接结果显示,可能的DON结合位点由Arg59、Arg103和Arg105等残基组成,他们位于CDR2和CDR3区域。表明通过分子模拟与对接相关工具获得了DONIV2的一、二、三级结构及可能的结合活性位点,为深入认识DON与抗体相互作用机理提供了理论指导,并为下一步DONIV2体外亲和力的成熟提供了线索。 涂追 许杨 付金衡 刘夏 陶勇关键词:单域抗体 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 分子模拟 分子对接