广西壮族自治区直属公益性基本科研项目(2060302GXIF-2009-05)
- 作品数：5 被引量：72H指数：4
- 相关作者：吴祥庆童桂香韦信贤黎小正叶欣宇更多>>
- 相关机构：广西渔业病害防治环境监测和质量检验中心广西水产研究所上海海洋大学更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区直属公益性基本科研项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 实时荧光定量PCR技术及其在水生动物病毒病定量检测中的应用被引量：15
- 2010年
- 韦信贤黎小正童桂香吴祥庆
- 关键词：实时荧光定量PCR
- TaqMan-MGB探针法快速检测对虾Taura综合征病毒的研究被引量：1
- 2011年
- 为建立Taura综合征病毒(Taura syndrome virus,简称TSV)的TaqMan-MGB探针荧光定量RT-PC方法,根据TSV衣壳蛋白基因保守序列设计引物和TaqMan-MGB探针,扩增产物长度为118bp。将PCR产物克隆到pGM-T载体,重组质粒经筛选鉴定、SalⅠ单酶切,得到线性化转录模板DNA,经体外转录获得标准品RNA。以体外转录的RNA作为模板,进行一步法荧光定量RT-PCR反应,根据RNA模板拷贝数与Ct(Cycle threshold,Ct)值制备了标准曲线,制作的标准曲线在2×101拷贝/μL≤TSV RNA≤2×107拷贝/μL的范围内具良好的线性关系,可以用于TSV的定量分析,检测灵敏度为20个拷贝数。特异性、重复性试验结果表明,该方法对SPF对虾组织RNA没有扩增反应,表现出良好的特异性;组内和组间实验变异系数分别为0.32%～1.84%和0.79%～2.71%。利用TaqMan-MGB探针建立检测TSV的一步法荧光定量RT-PCR方法可用于对虾TSV的检测。
- 韦信贤童桂香谢宗升黎小正吴祥庆廖永志黄国秋
- 关键词：TSVTAQMAN-MGB探针RT-PCR
- 黄沙鳖温和气单胞菌的分离鉴定及药敏试验被引量：22
- 2010年
- 从患病黄沙鳖的肝脏组织中分离到一株菌株（NN090617）,经人工感染试验证实其具有较强的致病性。对分离菌进行了形态特征、理化特性鉴定,该菌的形态和生理生化表现为：革兰氏阴性、两端钝圆的杆菌,葡萄糖产酸,氧化酶、触酶、V-P阳性,鸟氨酸脱羧酶、脲酶、七叶苷阴性。采用BioFosun微生物鉴定系统对该菌进行鉴定,将适当浊度的细菌悬液接种GN48板条培养16~24 h后读出结果,将结果输入BioFosun-Ⅰ软件分析鉴定为温和气单胞菌（Aeromonas sobria）,概率达99%,相似指数和距离指数分别为0.858、2.000,鉴定结果良好,结合形态和生理生化特点将其鉴定为温和气单胞菌。纸片琼脂扩散法药敏试验结果表明,该菌对供试的15种抗菌药物中的头孢拉定、头孢哌酮、氧氟沙星等6种药物敏感,对苯唑青霉素、庆大霉素、克拉霉素等9种药物均存在不同程度的耐药性。
- 童桂香韦信贤黎小正吴祥庆叶欣宇
- 关键词：黄沙鳖温和气单胞菌药敏试验
- 黄喉拟水龟致病菌——松鼠葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验被引量：19
- 2009年
- 从患病的黄喉拟水龟Mauremys mutica肝、肾中分离得到一株革兰氏阳性菌株，经人工感染试验证实，该菌为致病菌。对该菌的生理生化指标进行了分析，结果表明：该菌具有氧化酶、触酶、葡萄糖呈阳性，凝固酶、鸟氨酸脱羧酶、密二糖呈阴性，M—R为阳性，VP反应为阴性等特征，与报道的松鼠葡萄球菌特征一致。采用BIOLOG自动微生物鉴定系统对该菌进行鉴定，将适当浊度的细菌悬液接种GP2板条培养16—24h后读出结果，并将结果输入计算机，经Biolog Microlog24．2软件分析鉴定，结果显示为松鼠葡萄球菌Staphylococcus sciuri，可能性为99％，相似性和位距分别为0．913和1．30。结合形态和生理生化特点，将其鉴定为松鼠葡萄球菌。纸片扩散法药敏试验结果表明，该菌仅对头孢拉定和阿米卡星敏感，对头孢哌酮中度敏感，对其他抗生素均存在不同程度的耐药性。
- 黎小正韦信贤童桂香吴祥庆黄玉柳
- 关键词：黄喉拟水龟药敏试验
- 斑点叉尾鮰套肠症的病原鉴定及其药敏特性被引量：17
- 2009年
- 从患败血症并出现肠套叠的斑点叉尾鮰Ictalurus punctatus肝脏、肾脏及脑组织中分离到一株细菌(TE090214),经人工感染试验证实,该菌为斑点叉尾鮰病鱼的病原且具有高度致死性。对分离菌进行了形态特征、理化特性等较系统的表观分类学特征鉴定。结果表明:该菌经革兰氏染色为阴性,形状为两端钝圆的短杆菌,无荚膜及芽孢,氧化酶阳性,鸟氨酸脱羧酶阴性;能发酵葡萄糖产气,能利用甘露醇、蔗糖、阿拉伯糖和水杨苷产酸,能水解七叶苷等。对该菌的16S rDNA进行PCR扩增、克隆测序,得到1条长度为1 537 bp的核苷酸序列(GenBank登录号GQ184148);在以该菌16S rDNA序列和GenBank数据库内同源性较高的细菌16S rDNA序列构建的系统发育树中,菌株TE090214与嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophi-la聚在一簇,结合形态及生理生化特点,可将该菌株鉴定为嗜水气单胞菌。药敏试验结果显示:在供试的15种抗菌药物中,菌株TE090214对头孢哌酮、卡那霉素、氧氟沙星、恩诺沙星、诺氟沙星敏感,对链霉素、阿米卡星、复方新诺明中度敏感,对氨苄青霉素等7种药物存在不同程度的耐药性。
- 童桂香黎小正韦信贤吴祥庆卢小花
- 关键词：斑点叉尾鮰嗜水气单胞菌药敏特性
