国家自然科学基金(81101485) 作品数:25 被引量:93 H指数:6 相关作者: 祝成亮 高国生 李艳 刘兴晖 徐晓珍 更多>> 相关机构: 武汉大学 宁波市第二医院 湖北医药学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 吴阶平医学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
乙型肝炎病毒对胰岛素样生长因子结合蛋白3表达的影响 被引量:1 2013年 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)表达的影响。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IGFBP3mRNA的表达,免疫印迹法检测IGFBP3的蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IGFBP3血清学含量。结果 IGFBP3mRNA和蛋白的表达在HepG2细胞中的表达水平较HepG2.2.15高;乙肝患者IGFBP3血清学水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBV能够在体内、外抑制IGFBP3的表达。 祝成亮 李艳 汪明 高国生关键词:乙型肝炎病毒 胰岛素样生长因子结合蛋白3 酶联免疫吸附试验 乙型肝炎病毒对胰岛素样生长因子结合蛋白7表达的影响及其临床意义 2013年 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)表达的影响及其临床意义。方法逆转录-聚合酶链反应(PCR)检测IGFBP7 mRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清IGFBP7含量,分析IGFBP7在慢性乙型肝炎(CHB)、肝纤维化(LC)和肝细胞癌(HCC)患者间血清含量的差异。结果 IGFBP7 mRNA在HepG2.2.15细胞中的表达水平较HepG2高;与健康对照组相比,HBV感染者IGFBP7血清学水平明显升高(P<0.05);IGFBP7在LC和HCC患者低于CHB患者(P<0.05)。结论 HBV能够上调IGFBP7的表达,其血清水平与疾病进程呈负相关。 宋惠 刘兴晖 祝成亮 钟基大 李毅关键词:乙型肝炎病毒 肝纤维化 肝细胞癌 乙型肝炎病毒对驱动蛋白家族成员4A表达的影响 被引量:2 2012年 目的探讨有慢性HBV感染史的原发性肝癌患者癌组织与癌旁组织驱动蛋白家族成员4A(KIF4A)表达的差异,了解HBV对KIF4A表达的影响。方法采用RT—PCR和Western印迹法检测患者癌组织和癌旁组织KIF4A的表达;将浓度分别0、0.2、0.4、0.6和0.8μg/mL的HBV感染性克隆pHBV1.3与KIF4A基因启动子共转染HepG2细胞,并测定荧光素酶的活性;检测HepG2细胞转染pHBV1.3后KIF4AmRNA和蛋白表达变化;统计学分析采用t检验。结果KIF4A在癌组织表达显著高于癌旁组织,HBV能激活KIF4A基因启动子的活性,且随着pHBV1.3浓度的增加,荧光素酶活性也不断增强,分别为(126.8土13.4)、(219.8±16.7)、(387.6±21.5)、(586.5±228.9)和(657.6±35.5)RUL//ag蛋白,转染不同剂量的空白对照组,荧光素酶活性分别为(123.6±13.8)、(131.8±14.6)、(129.7±13.5)、(135.3±13.4)和(127.1±12.7)RUL/μg蛋白,两组比较,差异有统计学意义(t=4.875,P=0.006);HBV在mRNA和蛋白水平上调KIF4A的表达,且这种激活作用随着pHBV1.3浓度的增加而增强。结论原发性肝癌患者KIF4A表达水平升高,HBV能上调KIF4A的表达。 刘兴晖 祝成亮 宋惠 邬开朗 王艳 李毅关键词:肝炎病毒 乙型 驱动蛋白 慢性乙型肝炎患者载脂蛋白A1、B、E的血清水平研究 被引量:2 2013年 目的探讨慢性乙型肝炎患者载脂蛋白A1、B、E的表达水平及其影响因素。方法收集44例健康献血员以及122例慢性乙型病毒性肝炎患者血清,检测载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)、载脂蛋白E(ApoE)及其他实验室指标,对检测结果进行统计学分析。结果慢性乙型肝炎患者ApoA1、B均低于正常对照组;而ApoE显著高于正常对照组(P均<0.05)。随着疾病的加重,ApoA1含量逐渐降低;而ApoE含量逐渐升高。随着HBV-DNA载量的升高,ApoA1含量逐渐升高,而ApoB、ApoE含量逐渐降低。相关分析显示:ApoA1与TBA、TBil呈负相关;ApoB、ApoE与TBA、TBil呈正相关。结论慢性乙型肝炎患者载脂蛋白水平可能受肝脏合成功能、淤胆因素以及HBV本身等多种因素的影响。 鲁姣英 高国生 祝成亮关键词:慢性乙型肝炎 载脂蛋白 乙型肝炎病毒 丙型肝炎病毒调节白介素32表达的分子机制研究 2015年 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)调节白细胞介素32(IL-32)表达的分子机制。方法将HCV单个基因的表达质粒(p CMV-core、p CMV-p7、p CMV-E1、p CMV-E2、p CMV-NS2、p CMV-NS3、p CMV-NS4A、p CMV-NS4B、p CMVNS5A、p CMV-NS5B)分别与IL-32基因启动子共转染Huh7.5.1细胞,并测定荧光素酶的活性。采用荧光定量PCR检测IL-32细胞内mRNA的表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清中IL-32的含量。结果 HCV核心蛋白(core)能够在Huh7.5.1细胞中上调IL-32基因启动子的活性,上调倍数为4.51倍;而且随着HCV core基因的含量不断增加,其调节作用不断增强。与对照组相比,转染core基因后Huh7.5.1细胞的IL-32 mRNA上调3.86倍,细胞上清中IL-32的含量亦明显升高。结论 HCV在Huh7.5.1细胞通过core基因上调IL-32的合成和分泌。 赵峰 祝成亮 高国生 丁世雄 陆传统关键词:丙型肝炎病毒 白细胞介素32 核心蛋白 酶联免疫吸附试验 血清GP73及其它5种血清学标志物对原发性肝癌的诊断价值探讨 被引量:4 2012年 目的:探讨血清高尔基体蛋白73(Golgi protein 73,GP73)及AFP、ALP、GGT、LAP、AFU等血清学标志物单项和联合检测对原发性肝癌(PHC)的诊断价值。方法:收集32例慢性肝炎、36例肝硬化、57例原发性肝癌(PHC)患者及30名健康体检者的血清,对GP73及AFP、ALP、GGT、LAP、AFU等血清学标志物进行检测,并对检测结果进行统计学分析。结果:Spearman相关分析表明血清GP73与AFP、ALP、GGT、LAP、AFU均有一定的相关性(均P<0.05)。GP73、AFP、ALP、GGT、LAP、AFU在疾病组(包括慢性肝炎组、肝硬化组、PHC组)和正常对照组中的总体差异均有统计学意义(均P<0.05),疾病组血清水平均高于正常对照组;疾病组中又以PHC患者最高,GP73的血清水平均显著高于其他组(均P<0.05)。通过logistic回归对上述指标构建新的预测模型,新的预测因子的AUC虽然高于其它单项指标,但与GP73的差异不大(P>0.05),且这两者的AUC均显著高于其它5种血清学标志物(P<0.05)。结论:GP73单项检测对PHC有较好的诊断作用,GP73联合AFP、AFU、GGT、LAP、ALP检测对提高诊断效能帮助不大,GP73是潜在的有可能取代AFP的诊断PHC的重要血清标志物。 徐炜烽 高国生 祝成亮 徐晓珍 胡耀仁 翁彭剑关键词:原发性肝癌 高尔基体蛋白73 ROC曲线 高尔基体蛋白联合甲胎蛋白检测在原发性肝癌早期诊断中的价值 被引量:12 2014年 目的探讨血清高尔基体蛋白73(GP73)、甲胎蛋白(AFP)联合检测对原发性肝癌(PHC)早期诊断中的作用。方法选取2007年7月~2012年7月武汉钢铁(集团)第二职工医院PHC患者76例(PHC组)、肝硬化患者53例(肝硬化组)和正常人群50例(对照组),采用酶偶联吸附法和化学发光免疫分析法进行血清GP73、AFP检测,分析两者单独及联合检测在早期诊断PHC中的价值。结果①PHC组患者血清GP73[(208.3±53.6)μg/L]AFP[(871.2±497.6)μg/g/L]明显高于肝硬化组[(74.8±26.4)、(91.7±68.5)μg/L]±11对照组[(31.6±7.7)、(12.7±7.9)μg/L],差异均有统计学意义(P〈0.05)。②PHC组患者血清GP73和AFP阳性检出率[81.6%(62/76)、63.2%(48/76)1分别高于肝硬化组[15.1%(8/53)、17.0%(9/53)]和对照组[0.0%(0/50)、0.0%(0/50)],差异均有统计学意义(P〈0.05)。③联合检测对PHC诊断灵敏度[96.1%(73/76)]高于GP73和AFP单项检测[81.6%(62/76)、63.2%(48/76)],差异有统计学意义(P〈0.05);而检测的特异性与单项检测相比差异无统计学意义(P〉0.05)。结论PHC患者血清中GP73和AFP水平较高.两者联合检测可以显著提高对PHC早期诊断的能力。 徐向勇 刘显畅 李正峰 祝成亮关键词:甲胎蛋白 原发性肝癌 白细胞介素-35对乙型肝炎病毒复制的影响研究 被引量:2 2016年 目的探讨白细胞介素(IL)-35对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响。方法将HBV感染性克隆pHBV1.3及其启动子pHBV-Luc分别转染HepG2细胞,加入不同浓度的重组人IL-35蛋白,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平;荧光定量聚合酶链反应检测细胞闭合环状DNA(cccDNA)的水平;采用Luminometer荧光检测仪分析HBV启动子活性的变化。结果 IL-35能够抑制细胞上清液中HBsAg和HBeAg的水平及细胞内HBV cccDNA的拷贝数,并下调HBV启动子的活性。结论 IL-35能够在HepG2细胞中抑制HBV的复制。 祝成亮 李艳 袁丽关键词:乙型肝炎病毒 酶联免疫吸附试验 HBV感染者血清载脂蛋白E的检测及临床意义探讨 被引量:3 2013年 目的:探讨血清载脂蛋白E(ApoE)在不同病情HBV感染患者中的表达水平及其临床意义。方法:收集40例健康献血员以及57例慢性乙型病毒性肝炎(CHB)、55例乙肝肝硬化(LC)及50例原发性肝癌(HCC,HBSAg阳性)患者血清,检测载脂蛋白E(ApoE)、总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白A1(ApoA1)、载脂蛋白B(ApoB)及肝功能指标,并对检测结果进行统计学分析。结果:疾病组(包括CHB、LC、HCC)血清ApoE含量均显著高于正常对照组(均P<0.05),随着疾病的进展ApoE含量逐渐升高,但组间差异不大(均P>0.05);而疾病组的其它血脂指标(TCHO、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB)均低于正常对照组。血清APOE与多个指标相关,特别是与γ-谷氨酰基转移酶(GGT)和亮氨酰氨基肽酶(LAP)的相关性较高(均r>0.30,均P<0.01)。高GGT值(大于100U/L)组血清APOE水平显著高于低GGT值(小于100U/L)组(t=-4.926,P=0.000)。高HBV载量(大于103IU/mL)组血清APOE水平显著高于低HBV载量(小于103IU/mL)组(t=-2.239,P=0.026)。结论:血清ApoE在不同病情HBV感染患者中的水平普遍升高,其表达可能受肝脏合成功能、淤胆因素以及HBV等多种因素的影响。 高国生 徐晓珍 祝成亮关键词:乙型肝炎病毒 载脂蛋白E HBV感染患者LP(a)检测及其临床意义分析 2012年 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)对脂蛋白(a)[LP(a)]表达的影响及其临床意义。方法采用全自动生化分析仪检测HBV感染患者和健康者血清LP(a)水平,分析慢性乙型肝炎(CHB)、肝纤维化(HF)和肝细胞癌(HCC)患者LP(a)表达水平差异。结果 HBV感染患者血清LP(a)水平低于健康者(P<0.05);CHB患者LP(a)水平高于HF患者和HCC患者(P<0.05)。结论 HBV能够抑制LP(a)的表达,其血清水平与疾病进程相关。 祝成亮 李艳 高国生 张平安 叶芳丽 刘莉关键词:脂蛋白A 肝硬化 肝肿瘤